骨關(guān)節(jié)炎、軟骨磨損和骨軟骨組織缺損是臨床中常見(jiàn)的問(wèn)題,骨軟骨組織工程是一種治療骨軟骨缺損最具潛力的手段,制備能保持種子細(xì)胞的增殖、分化活性,且與體內(nèi)微環(huán)境匹配的仿生支架對(duì)骨軟骨組織工程至關(guān)重要。骨軟骨結(jié)構(gòu)復(fù)雜,構(gòu)建仿生梯度支架有難度,而且現(xiàn)有種子細(xì)胞復(fù)合支架的組織工程策略,獲取種子細(xì)胞時(shí)可能造成對(duì)細(xì)胞黏附分子和細(xì)胞間連接信號(hào)的破壞,接種時(shí)可能會(huì)發(fā)生種子細(xì)胞的流失。采用細(xì)胞層技術(shù)可避免上述問(wèn)題,獲得的具有完整細(xì)胞外基質(zhì)細(xì)胞層,可極大程度地保存細(xì)胞活性,通過(guò)多層疊加構(gòu)建三維組織修復(fù)體,用于骨軟骨組織再生研究具有優(yōu)勢(shì)。為賦予細(xì)胞層良好的操作性和調(diào)控性,本研究以靜電紡絲法制備的纖維膜為支撐,孵育骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）細(xì)胞層,BMSCs是具有多向分化潛能的成體干細(xì)胞,纖維膜仿生天然細(xì)胞外基質(zhì)的結(jié)構(gòu),為BMSCs的增殖和分化創(chuàng)造有利微環(huán)境。針對(duì)骨軟骨再生修復(fù),本論文重點(diǎn)探索了 BMSCs細(xì)胞層在體外的成軟骨、成鈣化軟骨和成骨分化調(diào)控,并仿生構(gòu)建了三維梯度骨軟骨修復(fù)體植入新西蘭白兔膝關(guān)節(jié)骨軟骨缺損,評(píng)價(jià)了梯度誘導(dǎo)分化的BMSCs細(xì)胞層/纖維膜復(fù)合體用于骨軟骨再生修復(fù)的可行性。首先,制備了無(wú)紡... 

【文章來(lái)源】：北京化工大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖１－１靜電紡絲裝置示意圖??Ｆｉｇ．?１－１?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｉｎｎｉｎｇ?ａｐｐａｒａｔｕｓ??

?ｆ??Ｒ?咖?ｉａｇ?ｇｒｗｍｄｅｄ?？Ｕｅｃｉ４？：?ｄ？ａ？??圖１－１靜電紡絲裝置示意圖??Ｆｉｇ．?１－１?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｉｎｎｉｎｇ?ａｐｐａｒａｔｕｓ??１．１．５常用的骨軟骨種子細(xì)胞??骨軟骨組織工程修復(fù)重建的效果與種子細(xì)胞有著密不可分的聯(lián)系。種子細(xì)胞的選??擇需要考慮以下幾點(diǎn)［１９］：?（１）對(duì)供體損傷較小，并且取材操作步驟方便簡(jiǎn)單；（２）??增殖性能良好且可控、具有分化潛能；（３）沒(méi)有致瘤性風(fēng)險(xiǎn)；（４）不引起明顯炎癥??反應(yīng)，免疫原性低。骨軟骨組織工程的種子細(xì)胞，依據(jù)細(xì)胞的分化能力，分為成熟體??細(xì)胞與具備多向分化潛能的干細(xì)胞兩種［４９】。??骨軟骨組織，由于具備不同的結(jié)構(gòu)與豐富的細(xì)胞種類(lèi)所以成熟的成體細(xì)胞，??主要選用成骨細(xì)胞與軟骨細(xì)胞作為種子細(xì)胞。成骨細(xì)胞移植后，仍能保持分化狀態(tài)和??一定的增殖能力；軟骨細(xì)胞移植后仍具備軟骨分化狀態(tài)，但增殖能力較差，通常其提??取過(guò)程還會(huì)對(duì)宿主機(jī)體造成影響［５Ｇ］。由于這兩種細(xì)胞擺脫不了普通成熟成體細(xì)胞的自??身局限性，不適合大規(guī)模使用。??ＢＭＳＣｓ是一種常用的多能干細(xì)胞，在不同的誘導(dǎo)條件下，可向脂肪、骨、軟骨、??肌腱等不同方向進(jìn)行分化［５１］

２．３．１?ＰＬＬＡ／Ｇｅｌ纖維膜的表征??在靜電場(chǎng)的牽伸作用下，以４００ｒｐｍ轉(zhuǎn)速滾筒接收器接收到的ＰＬＬＡ／Ｇｅｌ復(fù)合??纖維膜，經(jīng)ＥＤＣ／ＮＨＳ交聯(lián)后，如圖２．１所示，纖維呈多向不規(guī)則排布，纖維表面光??滑，無(wú)明顯的串珠、融并出現(xiàn)。由丨ｍａｇｅ?Ｊ分析，纖維平均直徑為７４９?ｎｍ?（圖２－??２Ａ）。纖維膜具有較高的孔隙率及連續(xù)孔結(jié)構(gòu)，纖維間距為１０?左右（圖２－??２Ｂ）。纖維堆積可以為細(xì)胞生長(zhǎng)提供支撐作用，而高的孔隙率可以為細(xì)胞間的物質(zhì)??交換及代謝產(chǎn)物排出提供條件，利于在纖維膜表面高密度細(xì)胞培養(yǎng)形成細(xì)胞層。??ｍｕ??圖２－１?ＰＬＬＡ／Ｇｅｌ復(fù)合纖維膜ＳＥＭ照片??Ｆｉｇ．?２－１?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ＰＬＬＡ／Ｇｅｌ?ｆｉｂｒｏｕｓ?ｍｅｓｈｅｓ??１８??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]rhBMP-2、膠原、珊瑚復(fù)合骨誘導(dǎo)骨形成生物活性的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 馬秦,毛天球,劉寶林,戴毅敏,韓亮.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2000(02)

碩士論文
[1]PLLA/明膠納米纖維膜在不同模擬體液中生物礦化過(guò)程研究[D]. 郭有剛.北京化工大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3483264