目的:本研究旨在通過利用外源性PTHrP作用于C57 BL/6小鼠生長板或生長板軟骨細(xì)胞,驗(yàn)證PTHrP可通過旁分泌途徑調(diào)節(jié)生長板軟骨細(xì)胞中HDAC4的核內(nèi)外穿梭進(jìn)而調(diào)控軟骨細(xì)胞增殖。方法:1.C57BL/6小鼠脛骨生長板軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定。顯微鏡下對出生3-5天C57小鼠脛骨生長板進(jìn)行觀察并定位,通過HE染色、番紅O染色觀察生長板組織中軟骨細(xì)胞的大致形態(tài)與分布特點(diǎn);超凈工作臺(tái)分離生長板組織,采用胰酶、Ⅱ型膠原酶序貫消化法對小鼠生長板組織進(jìn)行消化,提取生長板軟骨細(xì)胞;通過HE染色與番紅O染色對細(xì)胞大致形態(tài)觀察,免疫組化實(shí)驗(yàn)對所培養(yǎng)軟骨細(xì)胞Col-Ⅱ進(jìn)行檢測。2.PTHrP對生長板軟骨細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究。將生長板軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)至第二代后隨機(jī)分為3個(gè)組別:高表達(dá)組,培養(yǎng)液中添加外源性PTHrP、Lipo2000;抑制表達(dá)組,使用Lipo2000運(yùn)載PTHLH-homo-617質(zhì)粒轉(zhuǎn)染軟骨細(xì)胞;空白對照組,培養(yǎng)液中添加Lipo2000。通過Rt-PCR實(shí)驗(yàn)檢測軟骨細(xì)胞增殖相關(guān)指標(biāo)如Sox-9、Col-Ⅱ、Agg、Ihh、Col-Ⅹ、Runx-2及MMP-13的基因表達(dá)水平變化;EdU... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
常用縮寫詞中英文對照表
前言
第一部分 C57BL/6 小鼠脛骨生長板軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
第二部分 PTHrP促進(jìn)生長板軟骨細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究
    1 PTHrP對生長板軟骨細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果
    2 PTHrP促進(jìn)生長板軟骨細(xì)胞增殖相關(guān)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]間充質(zhì)干細(xì)胞在軟骨損傷修復(fù)中的研究進(jìn)展[J]. 衛(wèi)旭東,黨源,胡德慶.  中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志(電子版). 2017(03)
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本文編號(hào)：3477465