目的:深低溫停循環(huán)（deep hypothermic circulatory arrest,DHCA）具有為術(shù)者提供清晰的術(shù)野、降低患者機體代謝率、延長腦部等重要組織器官缺血缺氧耐受時間等諸多特點,是心臟外科手術(shù)中不可或缺的重要輔助技術(shù)。但DHCA神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥仍然是深低溫停循環(huán)術(shù)后最嚴重的并發(fā)癥之一,影響患者的預后甚至危及生命。miR-494與腦缺血、神經(jīng)退行性病變、腦腫瘤、脊髓病變等疾病密切相關,通過調(diào)節(jié)多種下游靶點的表達,對細胞的增殖、分化、遷移以及凋亡發(fā)揮重要的調(diào)控作用。本研究通過構(gòu)建大鼠深低溫停循環(huán)模型,探討miR-494在DHCA后海馬組織中的變化及在抵抗DHCA后腦損傷中可能的保護作用。方法:80只SD大鼠隨機分為5組,每組16只。假手術(shù)組（Sham）:術(shù)前5天側(cè)腦室注射10μl PBS液,5天后行體外循環(huán)2小時不降溫停循環(huán);深低溫停循環(huán)組（DHCA）:術(shù)前5天側(cè)腦室注射10μl PBS液,5天后行DHCA手術(shù);上調(diào)miR-494后深低溫停循環(huán)組（AgomiR-494）:術(shù)前5天側(cè)腦室注射10μl AgomiR-494慢病毒載體,5天后行DHCA手術(shù);下調(diào)miR-494后... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

側(cè)腦室注射示意圖

圖 2 體外循環(huán)插管及管路圖A：左側(cè)股動脈插管，B：右側(cè)頸外靜脈及氣管插管，C：體外循環(huán)管道整體示意圖動靜脈端置管小心與體外循環(huán)管道連接，排氣并檢查管道及各接口處誤后，膜肺進氣端連接氧氣，開始轉(zhuǎn)機，溫度探頭潤滑后置入肛門監(jiān)測體免插入過深造成腸道破裂出血。起始流量 160ml/kg/min，使用冰袋物理降溫水箱等方式逐漸降溫，降溫時間應至少大于 30 分鐘，隨著溫度的降低小流量，隨心率的降低逐漸減少呼吸機輔助次數(shù)，當溫度達到 18℃時停，保持體外循環(huán)管道血液自循環(huán)，防止膜肺產(chǎn)生血栓。此時監(jiān)護儀提示0mmHg，心率<50 次/分，心率血壓雖然未完全達到零，但難以提供充分供給。維持體溫 18℃停循環(huán) 60 分鐘后，開始轉(zhuǎn)流、復溫，給予適當?shù)?5氫鈉注射液糾正酸中毒及呋塞米利尿，使用 100W 燈泡及變溫水箱緩慢復溫時間應至少大于 30 分鐘，復溫時逐漸增加流量，并隨心率的增加而調(diào)機輔助次數(shù)。當體溫達到 34℃時，應維持心率在 300 次/分以上，平均動

中國醫(yī)科大學碩士學位論文3 結(jié)果3.1 側(cè)腦室注射后大鼠腦組織熒光由于本實驗使用的慢病毒載體中嵌有 GFP 綠色熒光蛋白，故成功轉(zhuǎn)染后，在熒光顯微鏡下可以看到組織中發(fā)出綠色熒光。大鼠經(jīng)側(cè)腦室注射慢病毒載體，5 天后再次吸入異氟烷麻醉，斷頭法處死，于冰上分離出海馬組織，立即制作成冰凍切片，于熒光顯微鏡下觀察，可見海馬組織呈現(xiàn)出綠色熒光，說明慢病毒載體成功將目的基因轉(zhuǎn)染至大鼠海馬組織，通過側(cè)腦室注射的方法可以將攜帶AgomiR-494 及 AntagomiR-494 的慢病毒載體轉(zhuǎn)染至大鼠海馬組織。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Up-Regulation of Trem2 Inhibits Hippocampal Neuronal Apoptosis and Alleviates Oxidative Stress in Epilepsy via the PI3K/Akt Pathway in Mice[J]. Ai-Hua Liu,Min Chu,Yu-Ping Wang.  Neuroscience Bulletin. 2019(03)
[2]深低溫停循環(huán)大腦海馬區(qū)差異性miRNAs表達變化及機制探討[J]. 王小華,吉冰洋,孫燕華,朱賢,陳燕,王世磊,劉晉萍,龍村.  中國體外循環(huán)雜志. 2012(02)
[3]Expression profiles of microRNAs after focal cerebral ischemia/reperfusion injury in rats[J]. Fengguo Zhai 1,Xiuping Zhang 1,Yue Guan 2,Xudong Yang 1,Yang Li 3,Gaochen Song 4,Lixin Guan 1 1Department of Pharmacology,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 2Department of Endocrinology,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 3Department of Thoracic Surgery,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 4Department of Biochemistry,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China.  Neural Regeneration Research. 2012(12)
[4]順行性腦灌注與逆行性腦灌注[J]. 王茜,龍村.  中國體外循環(huán)雜志. 2011(01)



本文編號：3438103