臨床上骨折及骨不愈合等骨科常見疾病,其治療始終是骨科領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)問題,如療效不佳則嚴(yán)重影響患者功能預(yù)后。近年來,創(chuàng)傷骨科如外固定架等治療技術(shù)及組織工程骨研究的迅猛發(fā)展,均得益于對(duì)骨折再生與重建機(jī)制的深入研究探索。由此可見,對(duì)骨折再生和重建過程中多種因素的生物學(xué)效應(yīng)及調(diào)控機(jī)制進(jìn)行廣泛深入的研究,將為臨床治療提供了全新治療思路和技術(shù)方法。神經(jīng)因素在骨組織再生及重建過程中作用重要,而神經(jīng)肽正是神經(jīng)因素發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的主要物質(zhì)。P物質(zhì)（Substanc P, SP）是廣泛分布于骨髓和骨膜的感覺神經(jīng)元分泌的一種神經(jīng)肽,其生物化學(xué)結(jié)構(gòu)由11種氨基酸構(gòu)成,參與調(diào)控骨組織細(xì)胞如骨髓基質(zhì)干細(xì)胞、成骨細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)。SP已被證實(shí)參與了細(xì)胞炎癥反應(yīng)、增殖、成骨分化、凋亡和動(dòng)員過程。骨再生及重建過程中神經(jīng)肽SP陽性的神經(jīng)纖維數(shù)量增加,提示SP可能直接參與局部的骨形成調(diào)控過程。不少體內(nèi)和體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)表明,SP可以通過促進(jìn)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）增殖能力增強(qiáng)、成骨基因表達(dá)及礦化來促進(jìn)骨形成過程,調(diào)控骨折愈合生理過程。骨形成過程中骨髓基質(zhì)干細(xì)胞需要一定的數(shù)量基礎(chǔ),而神經(jīng)肽SP可能是維持大鼠骨髓基質(zhì)... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＢＭＳＣｓ獲取培養(yǎng)（ｘｌＯＯ）??－

巧光顯微鏡下觀察結(jié)果顯示：Ｈ代ＢＭＳＣｓ培養(yǎng)呈現(xiàn)出梭形生長外觀，培養(yǎng)??瓶底部分布均勻。ＦＩＴＣ標(biāo)記的綠色英光主要存在于ＢＭＳＣｓ的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜??上，細(xì)胞核處較空虛，較少綠色英光分布（圖１－３）。說明ＢＭＳＣｓ表達(dá)有ＮＫ－１??受體，主要表達(dá)部位在于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。??ＫＳ??圖１－４?ＢＭＳＣｓ的ＮＫ－１受體免疫巧光（ＸＩＯＯ）??Ｆｉｇ．１－４?Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｏｆ?ＮＫ－１?ｒｅｃ巧化ｒｓ?ｉｎ?ＢＭＳＣｓ?（Ｘ１００）??２．４?ＢＭＳＣｓ調(diào)亡過程中ＮＫ－１受體表達(dá)量檢測(cè)??Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ結(jié)果顯示ＮＫ－１受體在正常情況和去血清誘導(dǎo)調(diào)１２４小時(shí)時(shí)均??有表達(dá)，且兩者表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ｐ＞０．０５）。說明ＢＭＳＣｓ在去血清誘導(dǎo)調(diào)亡??過程中ＮＫ－１受體可相對(duì)穩(wěn)定地表達(dá)。??＂］?口?Ｃ加的１??Ｉ＂?勵(lì)?ＳＤ??ＢＭＳＣｓ?ＮＫＩ?Ｗ?ｎ?；??ＧＡＰＤＨ??Ｊ??Ｓｅｒｕｍ?ｄｅｐｒｉｖｅｄ?－?＋?〇．〇－＊—■——??ＢＭＳＣｓ??圖１－５?ＢＭＳＣｓ的ＮＫ－１受體的ｗｅｓ化ｒｎ?ｂｌｏｔ結(jié)果??Ｆｉｇ．１－５?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＮＫ－１?ｒｅｃ巧化＂ｉｎ?ＢＭＳＣｓ??３．討論??感覺神經(jīng)纖維通過分泌神經(jīng)肋類物質(zhì)如Ｐ物質(zhì)等作用于骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，??９??

巧光顯微鏡下觀察結(jié)果顯示：Ｈ代ＢＭＳＣｓ培養(yǎng)呈現(xiàn)出梭形生長外觀，培養(yǎng)??瓶底部分布均勻。ＦＩＴＣ標(biāo)記的綠色英光主要存在于ＢＭＳＣｓ的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜??上，細(xì)胞核處較空虛，較少綠色英光分布（圖１－３）。說明ＢＭＳＣｓ表達(dá)有ＮＫ－１??受體，主要表達(dá)部位在于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。??ＫＳ??圖１－４?ＢＭＳＣｓ的ＮＫ－１受體免疫巧光（ＸＩＯＯ）??Ｆｉｇ．１－４?Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｏｆ?ＮＫ－１?ｒｅｃ巧化ｒｓ?ｉｎ?ＢＭＳＣｓ?（Ｘ１００）??２．４?ＢＭＳＣｓ調(diào)亡過程中ＮＫ－１受體表達(dá)量檢測(cè)??Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ結(jié)果顯示ＮＫ－１受體在正常情況和去血清誘導(dǎo)調(diào)１２４小時(shí)時(shí)均??有表達(dá)，且兩者表達(dá)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ｐ＞０．０５）。說明ＢＭＳＣｓ在去血清誘導(dǎo)調(diào)亡??過程中ＮＫ－１受體可相對(duì)穩(wěn)定地表達(dá)。??＂］?口?Ｃ加的１??Ｉ＂?勵(lì)?ＳＤ??ＢＭＳＣｓ?ＮＫＩ?Ｗ?ｎ?；??ＧＡＰＤＨ??Ｊ??Ｓｅｒｕｍ?ｄｅｐｒｉｖｅｄ?－?＋?〇．〇－＊—■——??ＢＭＳＣｓ??圖１－５?ＢＭＳＣｓ的ＮＫ－１受體的ｗｅｓ化ｒｎ?ｂｌｏｔ結(jié)果??Ｆｉｇ．１－５?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＮＫ－１?ｒｅｃ巧化＂ｉｎ?ＢＭＳＣｓ??３．討論??感覺神經(jīng)纖維通過分泌神經(jīng)肋類物質(zhì)如Ｐ物質(zhì)等作用于骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，??９??


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