研究背景骨肉瘤（osteosarcoma,OS）是一種在兒童和青少年中較為常見的惡性骨腫瘤,具有高度轉(zhuǎn)移的潛能。雖然手術(shù)聯(lián)合輔助化療已明顯提高患者的5年生存率至70%,但療效仍然急待提高;同時(shí),常規(guī)化療藥物的毒副作用較大易致患者預(yù)后不良。因此,積極尋找新的、安全有效的抗骨肉瘤藥物具有重要的意義。葡萄籽原花青素（grape seed procyanidins,GSP）為一類從葡萄籽中分離提取的聚多酚化合物。研究表明:GSP低毒,且可調(diào)節(jié)免疫、減輕機(jī)體損傷、抗氧化和抗炎等,還能抑制肺癌、胃癌和乳腺癌等多種腫瘤生長,發(fā)揮抗腫瘤作用。但是其對(duì)骨肉瘤的作用及機(jī)制仍不清楚。目的本文擬通過研究GSP對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖、遷移、凋亡、周期及骨肉瘤體內(nèi)生長的影響及其分子機(jī)制,以探討其是否具有抗骨肉瘤作用。方法1 GSP對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖、遷移、凋亡和周期的影響經(jīng)GSP處理骨肉瘤細(xì)胞系143B和MG63后,用普通倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變;采用MTT法和克隆形成試驗(yàn)分別檢測(cè)GSP對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖活力和集落形成能力的影響;利用劃痕愈合試驗(yàn)和Transwell試驗(yàn)檢測(cè)GSP對(duì)骨肉瘤細(xì)胞的遷移能力的影響;采用流式... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

GSP抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖（A.鏡下觀察;B.MTT法;C.克隆形成試驗(yàn);ns:P>0.05,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.005）

P 抑制骨肉瘤細(xì)胞的遷移愈合試驗(yàn)結(jié)果見圖2A。1) GSP對(duì)143B細(xì)胞的影響：對(duì)照組和G μg/ml)的劃痕愈合率分別為(91.73±7.16)%、(83.30±15.94)%、(53.013±10.01)%，與對(duì)照組相比，20 和 40 μg/ml GSP 組細(xì)胞的遷移能05, P<0.05)。 2) GSP 對(duì) MG63 細(xì)胞的影響：GSP 組(10、20 和合率依次為(79.09±6.63)%、(59.27±11.65)%和(36.87±9.16)%，與3.90)%相比，20 μg/ml 及其以上 GSP 處理組的遷移能力明顯降低。提示 GSP 抑制骨肉瘤細(xì)胞的遷移。nswell 試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí) GSP 抑制骨肉瘤細(xì)胞的遷移，結(jié)果見圖 2μg/ml GSP 組的穿膜細(xì)胞數(shù)目是對(duì)照組的 63.91% (P<0.01)，40 μ照組的 30.93% (P<0.005)。同樣地，在 MG63 中，20 μg/ml GSP對(duì)照組的45.78% (P<0.01)，40 μg/ml GSP組是對(duì)照組的20.48% (

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文Fig 2 GSP inhibited the migration of osteosarcoma cells(A. Wound healing assay; B. Transwell assay;*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.005) GSP 促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的凋亡Hoechst 33258 染色檢測(cè)凋亡結(jié)果見圖 3A，GSP 組的凋亡細(xì)胞多于對(duì)照組SP 促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的凋亡。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡結(jié)果見圖 3B。1) 143B40 和 60 μg/ml GSP 組的凋亡率分別是(51.93±14.56)%和(72.41±12.11)%，于對(duì)照組凋亡率(20.73±7.34)% (P<0.01, P<0.005)。2) MG63 細(xì)胞中：與對(duì)率(11.69±1.68)%相比，40和60μg/ml GSP處理組的凋亡率分別是(28.85±92.71±8.27)% (P<0.05, P<0.01)，均明顯升高。提示 GSP 促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞凋

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3436691