目的探討冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白（cold-inducible RNA binding protein,CIRP）對冷凍保存大鼠坐骨神經(jīng)活性及同種異體移植后神經(jīng)再生的影響。方法176條15 mm雄性SD大鼠坐骨神經(jīng)片段置于DMEM溶液中,分別在4℃、15℃、32℃預(yù)處理24 h（A組:4℃組,B組:15℃組,C組:32℃組）,設(shè)置新鮮神經(jīng)對照組（D組）,Real-time PCR和Western blot檢測CIRP基因及蛋白表達。將上述四組神經(jīng)置于冷凍保存液中液氮保存4周,鈣黃綠素/碘化丙啶（Calcein-AM/propidium iodide,Calcein-AM/PI）熒光染色、激光共聚焦顯微鏡觀察保存后神經(jīng)活細(xì)胞、死細(xì)胞情況,Western blot檢測Bax、Bcl-2蛋白表達。取冷凍保存4周的坐骨神經(jīng),于37℃、5%CO₂孵箱中培養(yǎng)7天,Western blot檢測NGF、GDNF蛋白表達。用冷凍保存4周或新鮮雄性SD大鼠坐骨神經(jīng)（E組:新鮮神經(jīng)組）,修復(fù)對應(yīng)的雄性Wistar大鼠坐骨神經(jīng)10 mm缺損（A′:同種異體移植4℃組、B′:同種異體移植15℃... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠坐骨神經(jīng)預(yù)處理后CIRPmRNA水平（A）及Westernblot分析CIRP蛋白水平（B）（±s，n=6；*P<0.05）

D 組 E 組圖 2 大鼠坐骨神經(jīng)冷凍保存 4 周后 Calcein-AM /PI 熒光染色激死細(xì)胞數(shù)量（×400，標(biāo)尺=50 μmFig. 2 Confocal microscope analysis of the live/dead cell stainedsciatic nerve after cryopreserved 4 we

圖 3 大鼠坐骨神經(jīng)冷凍保存 4 周后 Bax（A, B）,Bcl-2（A, C）蛋白表達及 Bax/Bcl-2 比率（D）（ ±s，n=6；* P<0.05 ）。Fig. 3 The protein level of Bax（A, B）,Bcl-2（A, C） and the index of Bax/Bcl-2 in rat sciaticnerve after cryopreserved 4 weeks. Data are means±SEM (n＝6 each group, *P<0.05).


本文編號：3433699