目的:脊髓缺血再灌注損傷是心臟大血管外科手術(shù)術(shù)后嚴(yán)重并發(fā)癥,其發(fā)生率可高達(dá)到3-8%,嚴(yán)重者可以引起截癱甚至死亡,極大程度的威脅了患者的健康與生活。隨著基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展,干細(xì)胞移植治療脊髓缺血再灌注損傷引起了廣泛的關(guān)注。外泌體作為細(xì)胞間相互交流的重要媒介,可通過膜受體等途徑與靶細(xì)胞結(jié)合,參與生物信息的調(diào)控。已有研究表明移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分泌的外泌體在神經(jīng)系統(tǒng)損傷的修復(fù)中發(fā)揮重要的作用。本研究體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）,利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染miR-25的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,并提取其外泌體,鞘內(nèi)注射至大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型,觀察過表達(dá)miR-25的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對脊髓短暫缺血的保護(hù)作用,從而為神經(jīng)系統(tǒng)損傷的外泌體生物治療方式提供實(shí)驗(yàn)思路和治療依據(jù)。研究方法:1.復(fù)蘇大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞并進(jìn)行傳代培養(yǎng),光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。貼壁法培養(yǎng)擴(kuò)增所需的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,通過慢病毒載體感染的方式構(gòu)建過表達(dá)miR-25骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,通過熒光顯微鏡觀察感染情況,RT-PCR法測定細(xì)胞中m... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

第1代BMSCs培養(yǎng)24h(100×)

第2代BMSCs培養(yǎng)72h(400×)

第3代BMSCs培養(yǎng)5d(400×)


本文編號：3425372