15-LOX-1調(diào)控骨性關節(jié)炎軟骨下骨中TGF-β1表達的研究
發(fā)布時間：2021-10-02 07:04
背景:骨性關節(jié)炎（osteoarthritis）是最常見的慢性退化性的關節(jié)疾病,病變特點是關節(jié)軟骨的退化,軟骨下骨的異常重塑以及硬化,骨贅的生成和關節(jié)滑膜的炎性變等。以往的研究焦點在于關節(jié)軟骨,但是近期的研究表明軟骨下骨在骨性關節(jié)炎中的病變早于關節(jié)軟骨,同時軟骨下骨異常重塑以及硬化等病變會引發(fā)其對軟骨機械支撐特性的改變,影響覆蓋其表面的關節(jié)軟骨的穩(wěn)定,使軟骨發(fā)生病變,最終引發(fā)骨性關節(jié)炎。所以軟骨下骨的病變在骨性關節(jié)炎的發(fā)病和病程的進展中扮演著重要的角色,研究軟骨下骨的病變機制具有重要的實際意義。在骨性關節(jié)炎的軟骨下骨所含有的細胞中,成骨細胞占有大部分的比例,在軟骨下骨病變中所發(fā)揮的作用也最為關鍵,成骨細胞中過度表達的TGF-β1可以直接導致軟骨下骨的異常重塑以及硬化,最終引發(fā)骨性關節(jié)炎,而降低軟骨下骨中TGF-β1的表達能夠明顯的減輕骨性關節(jié)炎中軟骨下骨的病變。故針對骨性關節(jié)炎軟骨下骨中TGF-β1表達的研究在未來治療骨性關節(jié)炎中顯得尤為重要。15-脂氧合酶-1（15-lipoxygenase-1,15-LOX-1）,屬于脂氧合酶家族,涉及很多疾病的病理過程并且可以加重疾病的炎性反應,...
【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省
【文章頁數(shù)】：105 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
原代成骨細胞的鑒定。(1a)茜素紅染色后在200倍和400倍鏡下觀察。(1b)堿性磷酸酶染色后在200倍和400倍鏡下觀察。Scale bar=100μm(200 x),Scale bar=50μm(400 x).
圖1 原代成骨細胞的鑒定。(1a)茜素紅染色后在200倍和400倍鏡下觀察。(1b)堿性磷酸酶染色后在200倍和400倍鏡下觀察。Scale bar=100μm(200 x),Scale bar=50μm(400 x).3.2 15-LOX-1,TGF-β1 的表達在骨性關節(jié)炎軟骨下骨的成骨細胞中是增加的
進一步通過western blot實驗驗證TGF-β1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨的表達相對于正常的軟骨下骨也是增高的,且具有統(tǒng)計學差異,qRT-PCR實驗也表現(xiàn)出類似的結果,這一結果和文獻報道相同[6],故此說明所取的樣品是可靠的(圖2c,圖2d)。圖2 在骨性關節(jié)炎的軟骨下骨的成骨細胞中15-LOX-1,TGF-β1的表達水平是增多的。(2a)通過western blot實驗測定15-LOX-1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨負重區(qū),骨性關節(jié)炎軟骨下骨非負重區(qū)以及正常軟骨下骨中的含量。正常軟骨下骨標本來自于下肢截肢的病人,且沒有患骨性關節(jié)炎。骨性關節(jié)炎軟骨下骨標本來自于患有骨性關節(jié)炎進行全膝關節(jié)置換術的病人,*P<0.05,**P<0. 0 1。蛋白濃度被ImageJ軟件所分析。(2b)通過qRT-PCR實驗測定15-LOX-1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨負重區(qū),骨性關節(jié)炎軟骨下骨非負重區(qū)以及正常軟骨下骨中的含量。正常軟骨下骨標本來自于下肢截肢的病人,且沒有患骨性關節(jié)炎。骨性關節(jié)炎軟骨下骨標本來自于患有骨性關節(jié)炎進行全膝關節(jié)置換術的病人,*P<0.05,**P<0. 0 1。(2c)通過western blot實驗測定TGF-β1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨負重區(qū)和正常軟骨下骨中蛋白的含量,**P<0. 0 1。蛋白濃度被ImageJ軟件所分析。(2d)通過qRT-PCR實驗測定TGF-β1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨負重區(qū)和正常軟骨下骨中的含量,**P<0. 0 1。(2e)通過免疫組化觀察15-LOX-1在骨性關節(jié)炎組和正常組中的表達差異。Scale bar=75μm。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Activation of mTORC1 in subchondral bone preosteoblasts promotes osteoarthritis by stimulating bone sclerosis and secretion of CXCL12[J]. Chuangxin Lin,Liangliang Liu,Chun Zeng,Zhong-Kai Cui,Yuhui Chen,Pinling Lai,Hong Wang,Yan Shao,Haiyan Zhang,Rongkai Zhang,Chang Zhao,Hang Fang,Daozhang Cai,Xiaochun Bai. Bone Research. 2019(01)
[2]mTOR signaling in skeletal development and disease[J]. Jianquan Chen,Fanxin Long. Bone Research. 2018(01)
本文編號：3418194
【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省
【文章頁數(shù)】：105 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
原代成骨細胞的鑒定。(1a)茜素紅染色后在200倍和400倍鏡下觀察。(1b)堿性磷酸酶染色后在200倍和400倍鏡下觀察。Scale bar=100μm(200 x),Scale bar=50μm(400 x).
圖1 原代成骨細胞的鑒定。(1a)茜素紅染色后在200倍和400倍鏡下觀察。(1b)堿性磷酸酶染色后在200倍和400倍鏡下觀察。Scale bar=100μm(200 x),Scale bar=50μm(400 x).3.2 15-LOX-1,TGF-β1 的表達在骨性關節(jié)炎軟骨下骨的成骨細胞中是增加的
進一步通過western blot實驗驗證TGF-β1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨的表達相對于正常的軟骨下骨也是增高的,且具有統(tǒng)計學差異,qRT-PCR實驗也表現(xiàn)出類似的結果,這一結果和文獻報道相同[6],故此說明所取的樣品是可靠的(圖2c,圖2d)。圖2 在骨性關節(jié)炎的軟骨下骨的成骨細胞中15-LOX-1,TGF-β1的表達水平是增多的。(2a)通過western blot實驗測定15-LOX-1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨負重區(qū),骨性關節(jié)炎軟骨下骨非負重區(qū)以及正常軟骨下骨中的含量。正常軟骨下骨標本來自于下肢截肢的病人,且沒有患骨性關節(jié)炎。骨性關節(jié)炎軟骨下骨標本來自于患有骨性關節(jié)炎進行全膝關節(jié)置換術的病人,*P<0.05,**P<0. 0 1。蛋白濃度被ImageJ軟件所分析。(2b)通過qRT-PCR實驗測定15-LOX-1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨負重區(qū),骨性關節(jié)炎軟骨下骨非負重區(qū)以及正常軟骨下骨中的含量。正常軟骨下骨標本來自于下肢截肢的病人,且沒有患骨性關節(jié)炎。骨性關節(jié)炎軟骨下骨標本來自于患有骨性關節(jié)炎進行全膝關節(jié)置換術的病人,*P<0.05,**P<0. 0 1。(2c)通過western blot實驗測定TGF-β1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨負重區(qū)和正常軟骨下骨中蛋白的含量,**P<0. 0 1。蛋白濃度被ImageJ軟件所分析。(2d)通過qRT-PCR實驗測定TGF-β1在骨性關節(jié)炎軟骨下骨負重區(qū)和正常軟骨下骨中的含量,**P<0. 0 1。(2e)通過免疫組化觀察15-LOX-1在骨性關節(jié)炎組和正常組中的表達差異。Scale bar=75μm。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Activation of mTORC1 in subchondral bone preosteoblasts promotes osteoarthritis by stimulating bone sclerosis and secretion of CXCL12[J]. Chuangxin Lin,Liangliang Liu,Chun Zeng,Zhong-Kai Cui,Yuhui Chen,Pinling Lai,Hong Wang,Yan Shao,Haiyan Zhang,Rongkai Zhang,Chang Zhao,Hang Fang,Daozhang Cai,Xiaochun Bai. Bone Research. 2019(01)
[2]mTOR signaling in skeletal development and disease[J]. Jianquan Chen,Fanxin Long. Bone Research. 2018(01)
本文編號：3418194
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