背景:骨性關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis）是最常見的慢性退化性的關(guān)節(jié)疾病,病變特點(diǎn)是關(guān)節(jié)軟骨的退化,軟骨下骨的異常重塑以及硬化,骨贅的生成和關(guān)節(jié)滑膜的炎性變等。以往的研究焦點(diǎn)在于關(guān)節(jié)軟骨,但是近期的研究表明軟骨下骨在骨性關(guān)節(jié)炎中的病變早于關(guān)節(jié)軟骨,同時(shí)軟骨下骨異常重塑以及硬化等病變會引發(fā)其對軟骨機(jī)械支撐特性的改變,影響覆蓋其表面的關(guān)節(jié)軟骨的穩(wěn)定,使軟骨發(fā)生病變,最終引發(fā)骨性關(guān)節(jié)炎。所以軟骨下骨的病變在骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病和病程的進(jìn)展中扮演著重要的角色,研究軟骨下骨的病變機(jī)制具有重要的實(shí)際意義。在骨性關(guān)節(jié)炎的軟骨下骨所含有的細(xì)胞中,成骨細(xì)胞占有大部分的比例,在軟骨下骨病變中所發(fā)揮的作用也最為關(guān)鍵,成骨細(xì)胞中過度表達(dá)的TGF-β1可以直接導(dǎo)致軟骨下骨的異常重塑以及硬化,最終引發(fā)骨性關(guān)節(jié)炎,而降低軟骨下骨中TGF-β1的表達(dá)能夠明顯的減輕骨性關(guān)節(jié)炎中軟骨下骨的病變。故針對骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨中TGF-β1表達(dá)的研究在未來治療骨性關(guān)節(jié)炎中顯得尤為重要。15-脂氧合酶-1（15-lipoxygenase-1,15-LOX-1）,屬于脂氧合酶家族,涉及很多疾病的病理過程并且可以加重疾病的炎性反應(yīng),... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

原代成骨細(xì)胞的鑒定。(1a)茜素紅染色后在200倍和400倍鏡下觀察。(1b)堿性磷酸酶染色后在200倍和400倍鏡下觀察。Scale bar=100μm(200 x),Scale bar=50μm(400 x).

圖1 原代成骨細(xì)胞的鑒定。(1a)茜素紅染色后在200倍和400倍鏡下觀察。(1b)堿性磷酸酶染色后在200倍和400倍鏡下觀察。Scale bar=100μm(200 x),Scale bar=50μm(400 x).3.2 15-LOX-1,TGF-β1 的表達(dá)在骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨的成骨細(xì)胞中是增加的

進(jìn)一步通過western blot實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證TGF-β1在骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨的表達(dá)相對于正常的軟骨下骨也是增高的,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,qRT-PCR實(shí)驗(yàn)也表現(xiàn)出類似的結(jié)果,這一結(jié)果和文獻(xiàn)報(bào)道相同[6],故此說明所取的樣品是可靠的(圖2c,圖2d)。圖2 在骨性關(guān)節(jié)炎的軟骨下骨的成骨細(xì)胞中15-LOX-1,TGF-β1的表達(dá)水平是增多的。(2a)通過western blot實(shí)驗(yàn)測定15-LOX-1在骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨負(fù)重區(qū),骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨非負(fù)重區(qū)以及正常軟骨下骨中的含量。正常軟骨下骨標(biāo)本來自于下肢截肢的病人,且沒有患骨性關(guān)節(jié)炎。骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨標(biāo)本來自于患有骨性關(guān)節(jié)炎進(jìn)行全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)的病人,*P<0.05,**P<0. 0 1。蛋白濃度被ImageJ軟件所分析。(2b)通過qRT-PCR實(shí)驗(yàn)測定15-LOX-1在骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨負(fù)重區(qū),骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨非負(fù)重區(qū)以及正常軟骨下骨中的含量。正常軟骨下骨標(biāo)本來自于下肢截肢的病人,且沒有患骨性關(guān)節(jié)炎。骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨標(biāo)本來自于患有骨性關(guān)節(jié)炎進(jìn)行全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)的病人,*P<0.05,**P<0. 0 1。(2c)通過western blot實(shí)驗(yàn)測定TGF-β1在骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨負(fù)重區(qū)和正常軟骨下骨中蛋白的含量,**P<0. 0 1。蛋白濃度被ImageJ軟件所分析。(2d)通過qRT-PCR實(shí)驗(yàn)測定TGF-β1在骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨負(fù)重區(qū)和正常軟骨下骨中的含量,**P<0. 0 1。(2e)通過免疫組化觀察15-LOX-1在骨性關(guān)節(jié)炎組和正常組中的表達(dá)差異。Scale bar=75μm。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Activation of mTORC1 in subchondral bone preosteoblasts promotes osteoarthritis by stimulating bone sclerosis and secretion of CXCL12[J]. Chuangxin Lin,Liangliang Liu,Chun Zeng,Zhong-Kai Cui,Yuhui Chen,Pinling Lai,Hong Wang,Yan Shao,Haiyan Zhang,Rongkai Zhang,Chang Zhao,Hang Fang,Daozhang Cai,Xiaochun Bai.  Bone Research. 2019(01)
[2]mTOR signaling in skeletal development and disease[J]. Jianquan Chen,Fanxin Long.  Bone Research. 2018(01)



本文編號：3418194