本文關(guān)鍵詞：AKT信號(hào)通路在機(jī)械循環(huán)壓力作用下對(duì)終板軟骨退變的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:在體外大鼠終板軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)上,建立終板軟骨細(xì)胞在間歇循環(huán)牽張力作用下退變的細(xì)胞模型,然后在進(jìn)一步研究AKT/m TOR信號(hào)通路對(duì)大鼠終板軟骨細(xì)胞退變的影響。方法:在實(shí)驗(yàn)室于無(wú)菌的條件下分離、培養(yǎng)大鼠的終板軟骨細(xì)胞,然后選擇第二代大鼠終板軟骨細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)所用的細(xì)胞。建立終板軟骨細(xì)胞在FX5000-T細(xì)胞應(yīng)力加載系統(tǒng)作用下的軟骨細(xì)胞退變的模型。具體實(shí)驗(yàn)分組為:空白對(duì)照組(P2代細(xì)胞);實(shí)驗(yàn)組1:FX5000-T間歇循環(huán)牽張力組;實(shí)驗(yàn)組2:FX5000-T間歇循環(huán)牽張力及AKT/mTOR細(xì)胞信號(hào)通路抑制劑組。甲苯胺藍(lán)染色法檢測(cè)各組終板軟骨細(xì)胞蛋白聚糖的變化;倒置相差顯微鏡觀察各組終板軟骨細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化;免疫印跡法檢測(cè)AKT、P-AKT以及位于AKT下游的蛋白質(zhì)表達(dá)情況;實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)各組細(xì)胞中SOX-9、蛋白聚糖、Ⅱ型膠原以及細(xì)胞細(xì)胞基質(zhì)分解代謝基因MMP-3、MMP-13、Adamts-5等相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果:大鼠的終板軟骨細(xì)胞在間歇循環(huán)牽張力作用下,隨著FX5000-T細(xì)胞應(yīng)力加載系統(tǒng)作用時(shí)間的進(jìn)行,大鼠的終板軟骨細(xì)胞中軟骨標(biāo)志物:SOX9、二型膠原、蛋白聚糖基因的表達(dá)逐漸降低,隨后又逐漸增高;提示剛開(kāi)始大鼠終板軟骨細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)合成在剛開(kāi)始時(shí)受到了抑制。在機(jī)械循環(huán)牽張力的作用下,大鼠的終板軟骨細(xì)胞中的軟骨細(xì)胞的基因標(biāo)志物及AKT/m TOR信號(hào)通路的關(guān)鍵的基因以及相關(guān)蛋白的表達(dá)逐漸降低;抑制AKT/mTOR信號(hào)通路后,大鼠軟骨細(xì)胞的基因標(biāo)志物的表達(dá)明顯降低,AKT/mTOR信號(hào)通路的相關(guān)基因及相關(guān)蛋白的表達(dá)也明顯降低,提示大鼠終板軟骨細(xì)胞退變的程度明顯加重。結(jié)論:間歇循環(huán)牽張力載荷通過(guò)激活A(yù)KT/mTOR/P70S6K細(xì)胞信號(hào)通路,進(jìn)而誘導(dǎo)大鼠終板軟骨細(xì)胞的退變。AKT/m TOR/P70S6K信號(hào)通路可能在大鼠終板軟骨細(xì)胞于體外間歇循環(huán)牽張力作用下退變的過(guò)程中發(fā)揮重要的作用,人為的調(diào)控或干預(yù)AKT/mTOR/P70S6K信號(hào)通路的表達(dá)可能減緩,或者抑制大鼠終板軟骨的退變。
【關(guān)鍵詞】：椎間盤(pán) 終板軟骨細(xì)胞 AKT/m TOR/P70S6K 細(xì)胞退變
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R681.5
【目錄】：

• 中英文縮寫(xiě)、略寫(xiě)詞對(duì)照表5-9
• 摘要9-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-15
• 研究材料（資料、內(nèi)容）和方法15-29
• 1. 實(shí)驗(yàn)研究?jī)?nèi)容15-16
• 1.1 建立終板軟骨細(xì)胞在體外機(jī)械循環(huán)牽張力作用下退變的模型15
• 1.2 觀察機(jī)械循環(huán)張力加載前后終板軟骨細(xì)胞的生物學(xué)表型改變15
• 1.3 AKT/mTOR信號(hào)通路在牽張力誘導(dǎo)終板大鼠軟骨細(xì)胞退變過(guò)程中的作用15-16
• 1.4 抑制AKT/mTOR信號(hào)通路后，觀察該信號(hào)通路在機(jī)械循環(huán)牽張力誘導(dǎo)下對(duì)大鼠終軟骨細(xì)胞退變的影響16
• 2. 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法16-28
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物16
• 2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及實(shí)驗(yàn)儀器16-18
• 2.3 建立大鼠終板軟骨細(xì)胞體外機(jī)械循環(huán)牽張力誘導(dǎo)模型18-21
• 2.4 AKT/mTOR信號(hào)通路抑制試驗(yàn)21
• 2.5 機(jī)械循環(huán)牽張力作用前后對(duì)終板軟骨細(xì)胞增殖、凋亡的檢測(cè)21-23
• 2.6 細(xì)胞的甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)23
• 2.7 Real time RT-PCR法檢測(cè)mRNA的表達(dá)23-26
• 2.8 Western blot法測(cè)定蛋白質(zhì)的表達(dá)26-28
• 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理28-29
• 結(jié)果29-38
• 討論38-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-55
• 綜述：AKT/m TOR/P70S6K 信號(hào)通路在軟骨分化及發(fā)育中的研究進(jìn)展55-64
• 參考文獻(xiàn)60-64
• 附錄64-67
• 作者簡(jiǎn)介及相關(guān)科研成果67-68
• 致謝68-69

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙鳳東;范順武;Patricia Dolan;Michael Adams;;腰椎終板骨折特點(diǎn)及相關(guān)因素的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華外科雜志;2006年16期

2 馬兆龍;邱勇;朱鋒;王守豐;吳波;;青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸患者終板軟骨的組織形態(tài)學(xué)研究[J];中國(guó)脊柱脊髓雜志;2008年09期

3 汪大武;張子林;殷文兵;張海青;徐寅生;徐靜;;腰椎間盤(pán)退變伴終板骨軟骨炎的低場(chǎng)強(qiáng)MRI表現(xiàn)[J];河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年04期

4 徐亦農(nóng);張靖;王玉海;;終板的應(yīng)用解剖[J];南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年04期

5 仝彥格;李現(xiàn)林;譚毅;;終板源性腰痛治療的研究進(jìn)展[J];中國(guó)臨床新醫(yī)學(xué);2014年02期

6 胡安文;羅光平;肖業(yè)生;楊長(zhǎng)遠(yuǎn);;冷光源下有限化手術(shù)治療終板破裂型腰椎間盤(pán)突出癥[J];中國(guó)矯形外科雜志;2010年22期

7 張帆;呂飛舟;王洪立;姜建元;;頸椎終板生物力學(xué)與終板形態(tài)學(xué)及椎間盤(pán)退變的關(guān)系[J];國(guó)際骨科學(xué)雜志;2012年06期

8 鐘小玲;吳仁華;邱小康;;磁共振診斷腰椎間盤(pán)退變中終板骨軟骨炎的價(jià)值[J];贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年04期

9 趙鳳東;范順武;丁獻(xiàn)軍;;腰椎終板退變的研究進(jìn)展[J];中華外科雜志;2006年24期

10 苗勝;沙廣釗;王永東;顏連啟;宋良玉;郭政;范磊;邵林;;不同程度退變的軟骨終板的影像學(xué)變化及其臨床意義[J];中國(guó)骨傷;2008年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 姚建飛;;腰椎終板炎的MRI表現(xiàn)[A];2008年浙江省放射學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2008年

2 袁維;董健;;大鼠尾椎終板下缺血模型的制作[A];第二十屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會(huì)、第二屆中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師分會(huì)骨傷科學(xué)術(shù)年會(huì)、第十九屆浙江省中西醫(yī)結(jié)合骨傷科專(zhuān)業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2013年

3 趙鳳東;黃悅;范順武;;MODIC終板退變的研究進(jìn)展[A];2004年浙江省骨科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

4 陸騫;陳維善;;青春期兔頸椎終板分離損傷的組織學(xué)研究[A];2007年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)骨科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省抗癌協(xié)會(huì)骨軟腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

5 臧虎;楊陽(yáng);彭傳剛;朱慶三;;國(guó)人男性頸椎上下終板高度的測(cè)量及臨床意義[A];第八屆全國(guó)脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

6 曹?chē)?guó)永;周躍;張傳志;李華壯;郭志良;;大鼠腰椎終板軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)及其生物學(xué)性狀的研究[A];第八屆全國(guó)脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

7 張寧;陸騫;陳維善;陳其昕;徐侃;李方才;吳瓊?cè)A;;終板生長(zhǎng)軟骨分離建立兔頸椎間盤(pán)退變模型[A];2008年浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

8 郭永飛;陳德玉;何志敏;陳宇;劉軍海;王新偉;袁文;賈連順;;頸椎退變對(duì)終板傾斜角的影響[A];第八屆全國(guó)脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

9 王少波;王圣林;;頸椎退變的終板及終板下骨的MRI信號(hào)改變[A];中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)會(huì)頸椎病專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第十次學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

10 陳帥;秦安;范順武;;ADAMTS-5在終板軟骨中的表達(dá)及相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制[A];2013中國(guó)工程院科技論壇暨浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 丁慶豐;COX-2功能缺失通過(guò)影響Noggin/BMP-2信號(hào)通路延緩腰椎終板軟骨骨化[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

2 劉勇;終板池、終板相關(guān)顯微解剖和臨床應(yīng)用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

3 莊汝杰;腰椎間盤(pán)終板變化與慢性下腰痛相關(guān)性的臨床研究[D];浙江中醫(yī)藥大學(xué);2012年

4 趙鳳東;腰椎終板損傷及其相關(guān)因素[D];浙江大學(xué);2005年

5 王衛(wèi)明;大鼠終板軟骨細(xì)胞向髓核遷移的規(guī)律及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 徐磊;腰椎退行性改變:退變椎間盤(pán)相鄰椎體血流動(dòng)力學(xué)及腰椎終板退變分布特點(diǎn)的相關(guān)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

2 馬明明;張力負(fù)荷下CC復(fù)合體介導(dǎo)的RhoA信號(hào)通路對(duì)大鼠終板軟骨細(xì)胞退變的影響與作用[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2016年

3 徐楊飛;彌散加權(quán)成像在椎體良性骨折及終板炎診斷中的價(jià)值研究[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2016年

4 張書(shū)豐;AKT信號(hào)通路在機(jī)械循環(huán)壓力作用下對(duì)終板軟骨退變的影響[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2016年

5 李帥;經(jīng)終板入路的顯微解剖及臨床應(yīng)用研究[D];鄭州大學(xué);2010年

6 李志剛;腰椎終板生物力學(xué)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2006年

7 呂軍;腰椎終板退變?cè)谘韧慈巳褐械姆植技芭R床轉(zhuǎn)歸[D];浙江大學(xué);2007年

8 楊陽(yáng);國(guó)人男性頸椎上下終板高度的測(cè)量及臨床意義[D];吉林大學(xué);2007年

9 蘇優(yōu)樂(lè)圖;腰椎終板抗壓強(qiáng)度的生物力學(xué)分布規(guī)律及相關(guān)因素的研究[D];浙江大學(xué);2014年

10 范小良;頸椎椎間盤(pán)與終板退變的MRI研究[D];浙江大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：AKT信號(hào)通路在機(jī)械循環(huán)壓力作用下對(duì)終板軟骨退變的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：339953