鋅酞菁（ZnPc）作為第二代人工合成的光敏劑已經(jīng)廣泛應(yīng)用到光動(dòng)力治療之中。但由于鋅酞菁極易在水中析出沉淀而導(dǎo)致藥物輸送效率降低,進(jìn)而降低了其誘導(dǎo)腫瘤光動(dòng)力治療的效果。因此,我們利用新型嵌段聚合物聚乙二醇-聚煙酸酯（PEG-PMAN）載體搭載鋅酞菁,合成鋅酞菁納米顆粒,并利用MTS檢測(cè),膜聯(lián)蛋白V（AnnexinV）-藻紅蛋白（PE）/7-氨基放線(xiàn)菌素D（7-aad）標(biāo)記的流式細(xì)胞儀凋亡檢測(cè)等技術(shù)檢測(cè)納米化的鋅酞菁誘導(dǎo)光動(dòng)力治療殺傷骨肉瘤效果。通過(guò)流式及蛋白免疫印跡等技術(shù)檢測(cè)檢測(cè)納米酞菁顆粒光動(dòng)力治療介導(dǎo)的細(xì)胞周期改變,驗(yàn)證其誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞凋亡的機(jī)制。同時(shí)通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證納米鋅酞菁顆粒光動(dòng)力治療體內(nèi)腫瘤效果。我們結(jié)果表明,相比鋅酞菁單體,納米化的鋅酞菁能夠極大地加強(qiáng)對(duì)骨肉瘤的光動(dòng)力殺傷效果,并通過(guò)促進(jìn)了細(xì)胞G2/M期阻滯介導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞的凋亡。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,納米酞菁顆粒無(wú)明顯的毒副作用,并顯著抑制了腫瘤的生長(zhǎng)。該發(fā)現(xiàn)表明了新型嵌段聚合物聚乙二醇-聚煙酸酯搭載的酞菁納米顆粒具臨床應(yīng)用的廣闊前景。 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?ＰＰＺ納米顆粒的結(jié)構(gòu)示意圖、水溶液中的穩(wěn)定性和紅光光區(qū)的吸收光譜

以往的文獻(xiàn)表明，ＺｎＰｃ的吸收峰在６６０ｎｍ左右，其焚光強(qiáng)度與ＺｎＰｃ的含量??有關(guān)［１６］。我們應(yīng)用細(xì)胞流式檢測(cè)的方法來(lái)明確ＰＰＺ與ＺｎＰｃ單體在細(xì)胞內(nèi)部吸收情??況（圖２Ａ和Ｂ）�？梢�(jiàn)細(xì)胞內(nèi)部ＰＰＺ攝取量隨著ＰＰＺ濃度及作用時(shí)間的上升而增??加，然而在ＺｎＰｃ單體作用組我們未見(jiàn)到顯著的細(xì)胞攝取，這體現(xiàn)了骨肉瘤細(xì)胞對(duì)??ＰＰＺ納米顆粒的高攝取性及細(xì)胞對(duì)ＰＰＺ納米顆粒的劑量相關(guān)性及時(shí)間相關(guān)性攝取。??我們進(jìn)而通過(guò)熒光顯微鏡觀察細(xì)胞攝取藥物情況，結(jié)果與細(xì)胞流式檢測(cè)的相符。??兩者結(jié)果共同提示了?ＰＰＺ納米顆粒增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞對(duì)ＺｎＰｃ的攝取。??Ａ?ＺｎＰｃ?ＰＰＺ??＾?＂?□?Ｃｏｎｔｒｏｌ?〇＿?□?Ｃｏｎｔｒｏｌ??〇?＿?ｊ?Ｃ?〇．２５ｕＭ?Ｉ?□?０．２５ｕＭ??Ｎ?！?０．５｜ｊＭ?ｊ?０．５ｍＭ??ｃ?？：?１?１ＭＭ?幺：，?二?１ｐＭ??〇?〇?，?２ｐＭ?Ｓ＇?２ｍＭ?Ｃ?＾ＰＢＳ?ＰＥ＾ＭＡＮ＾ＺｎＰｃ?ＰＰＺ??ｉ?由幽＿｜幽＿｜??－１０３?０?１０３?１０４?１０５?－１０３?０?１０３?１０４?１０５?｜?－?－?—??Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ?至■?｜＼?｜｜?一

在ＲＬ照射后下無(wú)論是ＺｎＰｃ單體或者是ＰＰＺ均產(chǎn)生了明顯的細(xì)胞殺傷效果??（Ｐ０．００１）。更引人關(guān)注的是，相比于ＺｎＰｃ單體或者是順鉑，ＰＰＺ介導(dǎo)的光動(dòng)力??治療有著更為強(qiáng)大的細(xì)胞殺傷能力（Ｐ＜〇．〇〇ｌ）（圖３Ａ、Ｂ、Ｃ和Ｄ）。其對(duì)ＭＮＮＧ／ＨＯＳ、??Ｕ２０Ｓ、ＳＡ０Ｓ－２?及?ＭＧ－６３?半數(shù)致死量（ＩＣ５０）分別為?０．３６，?１．４６，?０．６４?和?０．９７ｐＭ。??而先前的實(shí)驗(yàn)證明ＰＰＺ納米顆粒載體ＰＥＧ－ＰＭＡＮ對(duì)四種細(xì)胞系均無(wú)毒性，排除了??載體對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響［１３］。而ＰＰＺ光動(dòng)力殺傷效果較ＺｎＰｃ單體提高的原因是ＺｎＰｃ??單體在溶液中大量結(jié)晶，影響了細(xì)胞對(duì)其的吸收攝取，這可以從ＺｎＰｃ單體組的顯??微鏡圖片中證明（圖３Ｅ）。??１１??


本文編號(hào)：3392134