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人尿源干細(xì)胞外泌體對(duì)退變髓核細(xì)胞生物學(xué)功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-08-31 11:02
  背景:下腰痛(Low Back Pain)為現(xiàn)代社會(huì)中最常見疾患之一,對(duì)患者的生活造成了嚴(yán)重的影響。流行病學(xué)研究顯示,超過80%的人在其一生中出現(xiàn)過一次或多次下腰痛的經(jīng)歷,超過15%的人疼痛程度需要住院治療才能得到緩解。目前的病因?qū)W研究顯示超過40%的下腰痛來源于椎間盤退變(Intervertebral Disc Degeneration,IDD)的繼發(fā)病變。椎間盤退變是人體的一種自然衰老過程,但它可引起腰椎間盤突出癥、腰椎管狹窄癥、腰椎滑脫癥等疾病。椎間盤退變是多層面、緩慢進(jìn)展的過程,其中由于退變椎間盤中髓核細(xì)胞(nucleus pulposus cells,NPCs)數(shù)量減少和活性降低而導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)合成減少是導(dǎo)致椎間盤退變的重要因素之一。因此,尋找減緩甚至逆轉(zhuǎn)椎間盤退變的方法,一直是該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我更新及多項(xiàng)分化潛能的成體干細(xì)胞。近年來有研究證明,可通過干細(xì)胞移植抑制髓核細(xì)胞退變及凋亡,并有研究報(bào)道間充質(zhì)干細(xì)胞可通過其分泌的外泌體(Exosome)調(diào)節(jié)NPCs中蛋白聚糖(ACAN)、Ⅱ型膠原(C... 

【文章來源】:青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

人尿源干細(xì)胞外泌體對(duì)退變髓核細(xì)胞生物學(xué)功能的影響


倒置顯微鏡下(×100)觀察a接種后第5d可見3-5個(gè)類圓形細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)b接種后第10d,細(xì)胞生長(zhǎng)增殖形成集落,達(dá)80-90%融合圖2WB檢測(cè)干細(xì)胞陽(yáng)性標(biāo)志物CD29、CD44、CD73和CD90呈高表達(dá),未檢出干細(xì)胞陰性標(biāo)志物CD34和CD45圖3倒置顯微鏡下(×200)觀察a經(jīng)3a3b3c

共聚焦顯微鏡,熒光,細(xì)胞核,紅色


青島大學(xué)碩士學(xué)位論文163.USC-Exos熒光標(biāo)記及NPCs攝取USC-Exos結(jié)果圖5a激光共聚焦顯微鏡下(×60)DAPI染色的P6NPCs細(xì)胞核bPKH26紅色熒光標(biāo)記的USC-ExoscP6NPCs攝取USC-Exos于胞內(nèi)4.繪制NPCs生長(zhǎng)曲線經(jīng)USCs外泌體刺激后實(shí)驗(yàn)組NPCs較對(duì)照組增殖速度變快。細(xì)胞在最初1d增殖速度均緩慢,在2d后增殖速度加快,3d時(shí)呈對(duì)數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài)。生長(zhǎng)至第5d時(shí),細(xì)胞密度已接近80%融合,細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期,細(xì)胞生長(zhǎng)與衰亡接近動(dòng)態(tài)平衡(圖5)。圖6CCK8法檢測(cè)兩組細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn)吸光度,以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),以NPCs在A450nm波長(zhǎng)下吸光度為縱坐標(biāo),繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線5a65b5c

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,吸光度,細(xì)胞,時(shí)間點(diǎn)


青島大學(xué)碩士學(xué)位論文163.USC-Exos熒光標(biāo)記及NPCs攝取USC-Exos結(jié)果圖5a激光共聚焦顯微鏡下(×60)DAPI染色的P6NPCs細(xì)胞核bPKH26紅色熒光標(biāo)記的USC-ExoscP6NPCs攝取USC-Exos于胞內(nèi)4.繪制NPCs生長(zhǎng)曲線經(jīng)USCs外泌體刺激后實(shí)驗(yàn)組NPCs較對(duì)照組增殖速度變快。細(xì)胞在最初1d增殖速度均緩慢,在2d后增殖速度加快,3d時(shí)呈對(duì)數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài)。生長(zhǎng)至第5d時(shí),細(xì)胞密度已接近80%融合,細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期,細(xì)胞生長(zhǎng)與衰亡接近動(dòng)態(tài)平衡(圖5)。圖6CCK8法檢測(cè)兩組細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn)吸光度,以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),以NPCs在A450nm波長(zhǎng)下吸光度為縱坐標(biāo),繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線5a65b5c

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體對(duì)退變髓核細(xì)胞的影響[J]. 蔣長(zhǎng)青,藍(lán)蔚仁,李海音,路康,李長(zhǎng)青.  中國(guó)脊柱脊髓雜志. 2019(02)
[2]人尿源干細(xì)胞及其在骨組織工程中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 高鵬,姜大朋,李昭鑄.  中華外科雜志. 2016 (04)

碩士論文
[1]非接觸式共培養(yǎng)條件下兩種間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)同源退變髓核細(xì)胞生物學(xué)影響的比較研究[D]. 姜?jiǎng)倧?qiáng).第二軍醫(yī)大學(xué) 2014



本文編號(hào):3374776

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