目的:臂叢神經(jīng)根性撕脫傷是一種嚴(yán)重的外周神經(jīng)損傷,會(huì)造成上肢功能的嚴(yán)重受損,健側(cè)頸7移位術(shù)為患者帶來(lái)了希望,為了進(jìn)一步提高手術(shù)療效,需要攻克的一個(gè)難題是切斷頸7神經(jīng)后造成的脊髓中樞神經(jīng)元的逆行性退變（Neuronal Retrograde Degeneration,NRD）。在眾多中樞神經(jīng)系統(tǒng)退變的疾病中,均有Tau蛋白的異常磷酸化發(fā)生,而外周神經(jīng)損傷后的中樞神經(jīng)逆行性退變的發(fā)生過(guò)程中是否有Tau蛋白的過(guò)度磷酸化尚未報(bào)道。本文旨在研究Tau蛋白的過(guò)磷酸化修飾在該退變中的變化。方法:構(gòu)造SD大鼠頸7神經(jīng)切斷的模型,飼養(yǎng)至2周、4周、6周及8周后取大鼠頸7節(jié)段的脊髓組織,通過(guò)HE染色,流式細(xì)胞學(xué),Western Blot,免疫組化來(lái)分析神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況及Tau蛋白的磷酸化水平;給予氯化鋰藥物試圖阻斷神經(jīng)元凋亡的中間過(guò)程,相同的方法分析干預(yù)后的神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況及Tau蛋白的磷酸化水平,比較差異。結(jié)果:HE染色及流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)顯示2周時(shí)的細(xì)胞凋亡程度小于4周時(shí)的凋亡程度;Western Blot及免疫組化結(jié)果提示隨著周數(shù)的增加,總Tau蛋白的量因頸7神經(jīng)的切斷而下降,磷酸化的Tau蛋白的量... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?２周時(shí)切斷雙側(cè)臂叢頸７神經(jīng)后的大鼠Ｃ７節(jié)段脊髓組織的神經(jīng)元細(xì)胞的形??態(tài)變化

結(jié)果?Ｔａｕ蛋白的過(guò)磷酸化修飾在臂叢神經(jīng)損傷后神經(jīng)元逆行性退變中的研究??星號(hào)表示萎縮退變的神經(jīng)元細(xì)胞。??在４周時(shí)，假手術(shù)組的切片與２周時(shí)的組織無(wú)明顯病理學(xué)變化，神經(jīng)元細(xì)胞的胞??體與突起之間聯(lián)系緊密；切斷組的脊髓中樞神經(jīng)元細(xì)胞發(fā)生了同２周切斷組相似的明??顯退變，與２周切斷組組織有差別的是，４周切斷組切片內(nèi)的萎縮神經(jīng)元細(xì)胞周圍的??空泡化比率及空泡范圍都較前者小，周圍的膠質(zhì)瘢痕化程度高，組織結(jié)構(gòu)排列紊亂，??局限性致密度增高；氯化鋰藥物干預(yù)組的頸髓組織的退變程度較假手術(shù)組重，但比切??斷組輕，組織細(xì)胞分布特點(diǎn)同２周干預(yù)組，但細(xì)胞分布密度較２周干預(yù)組低（圖２）。??藝＿?＿??瞧??＇■二．入，…：??干預(yù)組??干預(yù)??１００Ｘ?４００?Ｘ??圖２．?４周時(shí)切斷雙側(cè)臂叢頸７神經(jīng)后的大鼠Ｃ７節(jié)段脊髓組織的神經(jīng)元細(xì)胞的形??態(tài)變化。在放大倍數(shù)為４００ｘ的圖像中，紅色箭頭表示正常形態(tài)的神經(jīng)元細(xì)胞，紅色??星號(hào)表示萎縮退變的神經(jīng)元細(xì)胞。??總結(jié)２周及４周的ＨＥ染色結(jié)果，兩批次的假手術(shù)組的頸髓神經(jīng)元細(xì)胞均無(wú)明顯??的自發(fā)性退變情況發(fā)生，為正常生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程，能夠在實(shí)驗(yàn)中起到良好??的參照作用。兩批次的切斷雙側(cè)頸７神經(jīng)組，大鼠的頸髓組織均發(fā)生了形態(tài)學(xué)上可見(jiàn)??的神經(jīng)元細(xì)胞退變，證明切斷周圍神經(jīng)后會(huì)發(fā)生中樞神經(jīng)元的逆行性退變；４周組的??膠質(zhì)細(xì)胞增生替代原生神經(jīng)元細(xì)胞退變后的組織架構(gòu)的現(xiàn)象在２周組的頸髓組織內(nèi)??表現(xiàn)不明顯，既與退變的嚴(yán)重程度有關(guān)，也與生理上發(fā)生膠質(zhì)瘢痕化過(guò)程的時(shí)間有關(guān)。??兩批次的雙側(cè)頸７神經(jīng)切斷組大鼠在經(jīng)氯化鋰藥物干預(yù)后，頸髓組織的退變程度都較??１２??

組的神經(jīng)元退變程度發(fā)生了好轉(zhuǎn)，但相對(duì)假手術(shù)組而言并沒(méi)有發(fā)生退變的停??滯，即氯化鋰能夠改善退變程度，但不能逆轉(zhuǎn)退變的方向，且隨著時(shí)間的推移，退變??程度亦逐漸增加。??２．流式細(xì)胞學(xué)結(jié)果??在對(duì)頸髓內(nèi)中樞神經(jīng)元細(xì)胞的退變研宄中，我們使用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)來(lái)分析大鼠??臂叢頸７神經(jīng)切斷術(shù)后的脊髓神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡量。結(jié)果顯示：２周時(shí)，假手術(shù)組的??組織細(xì)胞凋亡率為５．４５±０．２８％，切斷組的組織細(xì)胞凋亡率為１０．７６±０．２３％，干預(yù)組的??組織細(xì)胞凋亡率為６．５８±０．２６％?（表１，圖３）。???表１．各組大鼠２周時(shí)Ｃ７脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況（％，Ｍｅａｎ土ＳＤ）??ｍ＼?Ｍ?Ｃ７脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡占比??假手術(shù)組?６?５．４５士?０．２８??切斷組?６?１０．７６±０．２３?＊??干預(yù)組?６?６．５８±０．２６?＃??注：與假手術(shù)組比較，＊?Ｐ＜〇．?〇５；與切斷組比較，＃?Ｐ＜〇．?０５??Ｋ００２．Ｐ１?ＴｕｔｗＪ３Ｗ．Ｐｌ?了敘．．》５，??ＶＬ?｜?ｉｍ?Ｕｔ?ＵＲ?ＵＬ?ＵＲ??Ｉ?９．９９?ｒｆｂ．３４?０．１７?卿?Ｂ?０．１４??ｉｔ?１?次??１＇＾ｉ??ｔｋ?Ａ?，｜?Ａ?Ｉ??：隊(duì)―麵廠―??９４．４６?＞１６?ｊ?ｔｄ．ｍ?ｗｉｎ?６．？ｓ??＾?＾?＾?－ｉ＊?Ｗ?Ｗ?ｍ?＾??獅?ｒ?ｔｃ?－ａ?ｎｔｃ－Ａ?Ｆｉｒｅ－－ａ??ＡＢＣ??圖３．２周時(shí)大鼠Ｃ７節(jié)段脊髓組織內(nèi)細(xì)胞的凋亡率。（Ａ）假手術(shù)組；（Ｂ）切斷??組；（Ｃ）干預(yù)組。??４周時(shí)，假手術(shù)組的組織細(xì)胞凋亡率為５．３９±０．２８％，切斷組的組織

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]利多卡因?qū)\(yùn)動(dòng)及感覺(jué)神經(jīng)元保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 糜菁熠,徐建光,徐文東,林森,李繼峰.  中華手外科雜志. 2004(04)



本文編號(hào)：3373551