目的研究連續(xù)血液濾過對膿毒癥的治療作用及GEF-H1/Rho A信號通路在血液濾過中對膿毒癥內(nèi)皮細胞的影響方法1、根據(jù)臨床膿毒癥患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)（2.1.1）,收集膿毒癥患者血清,并進行連續(xù)血液濾過處理。應(yīng)用濃度為10%的濾過前后血清分別干預(yù)肺血管內(nèi)皮細胞（PVECs）0h、2h、4h、6h、8h,然后采用細胞單層細胞阻抗性實驗和通透性實驗比較分析濾過前后血清對細胞阻抗性和通透性的影響;2、應(yīng)用濃度為10%的濾過前后血清干預(yù)PVECs24h,采用Real-time PCR和Western Blot方法分別檢測ICAM-1和VCAM-1的m RNA及蛋白質(zhì)表達水平變化,并進行統(tǒng)計分析;3、應(yīng)用Real-time PCR和Western Blot方法分別檢測濾過前后血清中GEF-H1m RNA和蛋白表達水平的改變,并進行統(tǒng)計分析;4、構(gòu)建GEF-H1干擾載體,使用脂質(zhì)體3000（Lipofectamine 3000）進行細胞轉(zhuǎn)染24h,應(yīng)用Real-time PCR和Western Blot分別檢測GEF-H1 m RNA和蛋白表達水平,選取干擾效率最高的載體進行穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株篩選。應(yīng)用濃度為1... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

GEF-H1干擾載體

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文-21-圖4GEF-H1-shRNA3測序結(jié)果Fig4GEF-H1-shRNA3sequencingresults圖5真核表達載體Fig5Eukaryoticexpressionvecto

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本文編號：3339340