目的研究連續(xù)血液濾過對(duì)膿毒癥的治療作用及GEF-H1/Rho A信號(hào)通路在血液濾過中對(duì)膿毒癥內(nèi)皮細(xì)胞的影響方法1、根據(jù)臨床膿毒癥患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)（2.1.1）,收集膿毒癥患者血清,并進(jìn)行連續(xù)血液濾過處理。應(yīng)用濃度為10%的濾過前后血清分別干預(yù)肺血管內(nèi)皮細(xì)胞（PVECs）0h、2h、4h、6h、8h,然后采用細(xì)胞單層細(xì)胞阻抗性實(shí)驗(yàn)和通透性實(shí)驗(yàn)比較分析濾過前后血清對(duì)細(xì)胞阻抗性和通透性的影響;2、應(yīng)用濃度為10%的濾過前后血清干預(yù)PVECs24h,采用Real-time PCR和Western Blot方法分別檢測ICAM-1和VCAM-1的m RNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平變化,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;3、應(yīng)用Real-time PCR和Western Blot方法分別檢測濾過前后血清中GEF-H1m RNA和蛋白表達(dá)水平的改變,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;4、構(gòu)建GEF-H1干擾載體,使用脂質(zhì)體3000（Lipofectamine 3000）進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染24h,應(yīng)用Real-time PCR和Western Blot分別檢測GEF-H1 m RNA和蛋白表達(dá)水平,選取干擾效率最高的載體進(jìn)行穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株篩選。應(yīng)用濃度為1... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

GEF-H1干擾載體

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文-21-圖4GEF-H1-shRNA3測序結(jié)果Fig4GEF-H1-shRNA3sequencingresults圖5真核表達(dá)載體Fig5Eukaryoticexpressionvecto

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本文編號(hào)：3339340