發(fā)布時間：2021-08-12 16:07

　　目的研究瘢痕疙瘩形成中腫瘤壞死因子α刺激基因6（TSG-6）調(diào)控3-磷酸肌醇激酶/絲/蘇氨酸蛋白激酶-B淋巴細胞瘤-2基因（PI3K/Akt-Bcl-2）信號通路對成纖維細胞表達和凋亡的關(guān)聯(lián)性。方法構(gòu)建p LVX-puro-TSG-6、p LVX-shRNA1-TSG-6及其對應(yīng)空質(zhì)粒重組慢病毒載體轉(zhuǎn)入人瘢痕疙瘩成纖維（HKF）細胞,建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的過表達細胞株、干擾細胞株、過表達對照細胞株、干擾對照細胞株,用流式細胞術(shù)和CCK-8法分別檢測相應(yīng)細胞株與HKF細胞凋亡與增殖。應(yīng)用RT-PCR及Western blot分別檢測TSG-6過表達細胞株、TSG-6干擾組細胞株及前兩組對應(yīng)對照組細胞株、HKF細胞株中PI3K、Akt、鼠雙微基因2（MDM2）、P53基因、Bcl-2的信使核糖核酸及蛋白表達變化。結(jié)果與HKF組對比,TSG-6過表達組細胞增殖減緩,凋亡顯著增加（t=-4.443,P=0.011）;TSG-6干擾組則相反（t=3.827,P=0.019）;其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。RT-PCR、Western blot檢測結(jié)果顯示TSG-6過表達組抑制PI3K、Akt、MDM2、B... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2018,53(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 主要試劑
    1.3 實驗方法
        1.3.1 HKF的原代培養(yǎng)及鑒定
        1.3.2 構(gòu)建重組慢病毒表達載體p LVX-pour-TSG-6及干擾載體p LVX-shRNA1-TSG-6
        1.3.3 慢病毒包裝及轉(zhuǎn)染、細胞分組
        1.3.4 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
        1.3.5 CCK-8法檢測各組細胞增殖能力
        1.3.6 RT-PCR
        1.3.7 Western blot
    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 TSG-6對HKF細胞凋亡的影響
    2.2 TSG-6對HKF細胞增殖能力的影響
    2.3 TSG-6對HKF細胞PI3K/Akt-Bcl-2信號通路的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]TSG-6促進瘢痕疙瘩成纖維細胞凋亡及其NF-κB信號通路影響的實驗研究[J]. 王佳妮,李小靜,李濤,王瑜.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2017(09)
[2]下調(diào)miR-21通過PDCD4抑制人增生性瘢痕成纖維細胞增殖并抑制PI3K/Akt信號通路[J]. 慕生枝,孫要文,王國棟.  中國美容醫(yī)學(xué). 2015(23)
[3]TSG-6在病理性瘢痕中的表達及意義[J]. 洪學(xué)哲,李小靜,寧金龍.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2013(06)
[4]PI3K/PKB信號通路參與結(jié)締組織生長因子促人增生性瘢痕纖維化[J]. 劉劍毅,李世榮.  重慶醫(yī)學(xué). 2008(09)



本文編號：3338634