背景:術(shù)后認(rèn)知功能障礙（POCD）是指病人在麻醉手術(shù)后其認(rèn)知功能出現(xiàn)了明顯的破壞,可嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量甚至?xí)l(fā)展為不可逆的認(rèn)知損傷。腫瘤發(fā)病率逐年增加,需要手術(shù)治療的腫瘤病人也日益增多。中樞炎癥被認(rèn)為是POCD的主要發(fā)病原因;同時(shí),腫瘤與炎癥的關(guān)系密切復(fù)雜。那么,腫瘤是否影響患者POCD的發(fā)生,其機(jī)制如何?這些問(wèn)題尚不清楚。目的:明確荷瘤小鼠與正常小鼠相比,是否更容易發(fā)生POCD。探討其機(jī)制是否與手術(shù)激活腫瘤募集在外周血和脾臟中的骨髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）進(jìn)而分泌大量炎癥因子造成中樞炎癥有關(guān)。通過(guò)本研究,為荷瘤個(gè)體POCD的防治提供靶點(diǎn),為POCD的發(fā)病機(jī)制研究提供新的思路。方法:第一部分:將2月齡成年雄性C57/B6（23-25g）小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、手術(shù)組、腫瘤組及腫瘤+手術(shù)組。在小鼠右側(cè)腋下接種小鼠來(lái)源的MC38或LLC腫瘤細(xì)胞懸液構(gòu)建腫瘤模型。待腫瘤直徑達(dá)0.8-1.0cm,需手術(shù)的兩組小鼠在氟芬合劑麻醉下行脛骨骨折內(nèi)固定手術(shù)。應(yīng)用Morris水迷宮和新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠術(shù)后學(xué)習(xí)記憶能力。使用Western blot檢測(cè)海馬內(nèi)PSD-95蛋白相對(duì)表達(dá)水平。第二部分:選... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2016級(jí)碩士畢業(yè)論文-26-驗(yàn)第5天，腫瘤+手術(shù)組小鼠找到水下平臺(tái)所用的時(shí)間（逃避潛伏期）明顯長(zhǎng)于對(duì)照組（圖2C，P<0.05）�？臻g探索實(shí)驗(yàn)階段，平臺(tái)撤掉后，對(duì)照組小鼠（P<0.01）、手術(shù)組小鼠（P<0.05）和腫瘤組小鼠（P<0.05）都在目標(biāo)象限花費(fèi)更多時(shí)間尋找記憶中的平臺(tái)位置，而腫瘤+手術(shù)組小鼠（P>0.05）在時(shí)間的象限分布上沒(méi)有明顯的趨向性(圖2D&E)。這一現(xiàn)象說(shuō)明，在經(jīng)歷了5天的定位航行訓(xùn)練后，腫瘤+手術(shù)組小鼠未能對(duì)水下平臺(tái)的空間位置形成很好的記憶，而其他組小鼠都已對(duì)平臺(tái)的空間位置形成了很好的記憶。圖2：MC38細(xì)胞系荷瘤模型中，水迷宮實(shí)驗(yàn)證明荷瘤小鼠手術(shù)后空間參考記憶能力降低。Figure2:Morriswatermaze(MWM)behavioraltestindicatesimpairedreferencememoryaftersurgeryinMC38tumor-bearingmice.A.Morris水迷宮時(shí)間軸線。B.各組小鼠的游泳速度無(wú)顯著差異具有可比性。C.定位航行實(shí)驗(yàn)第5天（day5），腫瘤+手術(shù)組小鼠平均逃避潛伏期長(zhǎng)于對(duì)照組小鼠，手術(shù)組和腫瘤組與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異。D.空間探索實(shí)驗(yàn)階段（day6），各組小鼠在各個(gè)象限的游泳時(shí)間分布。對(duì)照組、單純手術(shù)組和腫瘤組小鼠在第3象限（目標(biāo)象限）的游泳時(shí)間明顯長(zhǎng)于其他象限，

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2016級(jí)碩士畢業(yè)論文-27-然而腫瘤+手術(shù)組小鼠4個(gè)象限的時(shí)間分布沒(méi)有明顯的差異（對(duì)目標(biāo)象限無(wú)顯著趨向性）。E.各組小鼠在空間探索實(shí)驗(yàn)階段有代表性的運(yùn)動(dòng)軌跡。TQ：目標(biāo)象限。圖中數(shù)值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（x±sem）表示。B-D，Naiven=12，Surgeryn=11，Tumorn=8，Tumor+Surgeryn=12。圖C中，*表示與對(duì)照組（Naive）相比，P<0.05。圖D中，*和**分別表示與第1象限（相反象限）相比，P<0.05和P<0.01。接著，我們使用新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)（NOR）評(píng)估MC38細(xì)胞系荷瘤模型下各組小鼠脛骨骨折手術(shù)后物體識(shí)別記憶的情況。NOR時(shí)間軸線如圖3A所示。識(shí)別系數(shù)是指在測(cè)試階段，小鼠探索新物體所花費(fèi)的時(shí)間占探索新舊物體時(shí)間總和的百分比。識(shí)別系數(shù)代表了小鼠識(shí)別、分辨新物體的能力。如圖3B，測(cè)試階段小鼠探索新舊物體總時(shí)間在各組之間沒(méi)有顯著差異（P>0.05），證明各組小鼠探索事物的基本能力處于同一水平。有趣的是，如圖3C所示，對(duì)照組、單純手術(shù)組和腫瘤組小鼠都表現(xiàn)出對(duì)新奇事物的趨向性（花費(fèi)更多時(shí)間接觸探索新物體），而腫瘤+手術(shù)組小鼠卻沒(méi)有表現(xiàn)出對(duì)新物體的偏愛(ài)性（探索新舊物體的時(shí)間幾乎相等）（P<0.05）。這一現(xiàn)象提示，在模型中，脛骨骨折手術(shù)可損傷MC38細(xì)胞系荷瘤小鼠的物體識(shí)別記憶。使用MC38細(xì)胞系荷瘤小鼠，兩種海馬依賴性的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均提示，相比于普通成年小鼠，脛骨骨折手術(shù)更容易使同齡荷瘤小鼠發(fā)生POCD。圖3:MC38細(xì)胞系荷瘤模型中，新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)（NOR）提示荷瘤小鼠手術(shù)后物體識(shí)別記憶能力降低。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]突觸后致密蛋白95（PSD95）和突觸小泡蛋白在神經(jīng)元成熟過(guò)程中的分布[J]. 柴繼俠,王元元,李徽徽,賀文欣,鄒維艷,周艷梅,胡小冬,柴強(qiáng).  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(12)



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