目的初步探究雙氫睪酮對燒燙傷小鼠愈合過程中毛發(fā)和毛囊的影響作用篩選出合適的雙氫睪酮濃度,用免疫熒光標(biāo)記法檢測毛囊干細(xì)胞在燒燙傷愈合過程中的增殖、分化和遷移的過程。方法在體毛囊培養(yǎng),不同濃度雙氫睪酮皮下注射燒燙傷小鼠,分別取毛干電鏡掃描觀察,利用顯微外科解剖技術(shù),分離創(chuàng)口皮膚,OCT包埋,HE染色觀察不同濃度雙氫睪酮注射后毛囊數(shù)目及形態(tài),再利用EdU及CD200免疫熒光染色觀察,雙氫睪酮注射后燒燙傷小鼠皮膚愈合過程中毛囊干細(xì)胞的增殖、分化、遷移過程。結(jié)果通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),不同濃度雄激素對燒燙傷小鼠愈合過程中毛干毛小皮的影響不明顯,而對毛囊的影響作用明顯。一定濃度范圍的雄激素中,篩選出7.5 mg/kg·d雙氫睪酮對燒燙傷小鼠皮膚愈合過程中毛囊抑制作用明顯。EdU細(xì)胞增殖檢測發(fā)現(xiàn)7.5 mg/kg·d雙氫睪酮可抑制細(xì)胞的增殖,使得毛囊萎縮。干細(xì)胞標(biāo)記物CD200免疫熒光顯示,CD200陽性毛囊干細(xì)胞主要集中在毛囊外根鞘隆突部;同時(shí)7.5 mg/kg·d雙氫睪酮可抑制CD200陽性毛囊干細(xì)胞的表達(dá)。結(jié)論一定濃度的雙氫睪酮對燒燙傷小鼠愈合過程中毛囊起抑制作用,使愈合過程中生長期毛囊減少,毛囊變細(xì)萎... 

【文章來源】：塔里木大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

毛囊結(jié)構(gòu)示意圖

塔里木大學(xué)碩士學(xué)位論文第2章雄激素對燒燙傷小鼠背部毛干的影響142.2試驗(yàn)方法2.2.1獲取標(biāo)本及保存方法利用不同濃度雄激素（0mg/kg·d、5mg/kg·d、7.5mg/kg·d、10mg/kg·d）皮下注射燒燙傷雌性小鼠，分別于第1天、第7天、第14天、第21天、第28天取樣，斷頸法處死燒燙傷雌性小鼠，操作過程中嚴(yán)格遵循動(dòng)物倫理保護(hù)法，將小鼠于75%酒精溶液中消毒60s，隨即轉(zhuǎn)移至超凈工作臺(tái)中，利用顯微外科剪分離乳鼠背部燒燙傷創(chuàng)口，距離燒燙傷創(chuàng)緣約0.3㎝，并將游離創(chuàng)緣皮片轉(zhuǎn)移至外科解剖顯微鏡下，利用外科顯微鑷分離出完整的創(chuàng)緣周圍毛干，收集后編號記錄。冷凍保存于-20℃冰箱中備用。圖2-1試驗(yàn)材料獲取過程示意圖Fig2-1.Schematicdiagramofexperimentalmaterialacquisitionprocess注：圖2-1毛干及皮片獲取過程示意圖：此過程先分離皮片，再修剪毛干，分別保存?zhèn)溆�。Note:Fig2-1.Sketchofhairshaftandfollicleacquisitionprocess:Inthisprocess,theskinpiecesareseparatedfirst,andthenthehairshaftsaretrimmedandstoredseparately.2.2.2掃描電鏡觀察將保存的編號記錄的毛干取出，在塔里木大學(xué)分析測試中心室溫下晾干5min，用100%丙酮沖洗5min，然后晾干，顯微鑷取干燥后的毛干，借助導(dǎo)電膠固定到樣品臺(tái)上，后進(jìn)入離子濺射儀進(jìn)行鍍金，噴涂合適厚度的金膜導(dǎo)電層。導(dǎo)

塔里木大學(xué)碩士學(xué)位論文第3章雄激素對燒燙傷昆明小鼠背部毛囊的影響24圖3-1不同濃度雄激素皮下注射創(chuàng)傷小鼠愈合的過程Fig3-1Thehealingprocessofhypodermicandrogeninjectioninmouse注：圖3-1（A1-D1）為不同濃度雄激素（5mg/kg·d、7.5mg/kg·d、10mg/kg·d、0mg/kg·d）皮下注射燒燙傷小鼠模型；圖（A1-A5）為5mg/kg·d雄激素皮下注射燒燙傷小鼠于1、7、14、21、28d愈合情況；圖（B1-B5）為7.5mg/kg·d雄激素皮下注射燒燙傷小鼠于1、7、14、21、28d愈合情況；圖（C1-C5）為10mg/kg·d雄激素皮下注射燒燙傷小鼠于1、7、14、21、28d愈合情況；圖（D1-D5）為0mg/kg·d雄激素皮下注射燒燙傷小鼠于1、7、14、21、28d愈合情況；Note:Fig3-1A1-D1wasasubcutaneousburnandscaldmousemodelwithdifferentconcentrationsofandrogens(5mg/kg·d,7.5mg/kg·d,10mg/kg·d,0mg/kg·d)；（A1-A5）showsthehealingofburnedmicewith5mg/kg·dandrogensubcutaneousinjectionon1,7,14,21,28days；(B1-B5)showsthehealingofburnedmicewith7.5mg/kg·dandrogensubcutaneousinjectionon1,7,14,1d7d14d21d28d

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]5種鼠類針毛結(jié)構(gòu)的掃描電鏡分析[J]. 趙青,胡一中,鮑毅新,鄭榮泉,周偉.  浙江師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(01)



本文編號：3308233