發(fā)布時間：2021-07-27 11:11

　　[研究目的]探索丙泊酚用于預防肝臟缺血再灌注損傷的可行性及其機制,探索一種新型有效副作用小的肝臟缺血再灌注損傷保護藥物。臨床肝臟手術(shù)常需要暫時阻斷肝臟供血,當供血恢復,大量自由基生成及脂質(zhì)過氧化等病理過程導致的肝臟I/R損傷是肝臟外科手術(shù)和肝臟移植術(shù)中面臨的一個亟待解決的問題。肝臟I/R損傷是導致肝移植失敗及多器官衰竭的主要原因之一,它是由于肝臟短暫缺血后恢復血流供應,大量有毒代謝產(chǎn)物及炎性介質(zhì)釋放導致嚴重的代謝紊亂,從而加重肝臟損傷及功能障礙的過程。肝臟I/R損傷是多種機制共同作用的結(jié)果,與ROS產(chǎn)生、炎癥反應及細胞凋亡等機制密切相關(guān)。因此,合理選擇用藥,干預自由基產(chǎn)生、抑制炎癥反應及細胞凋亡或可減輕肝臟I/R損傷。丙泊酚是臨床常用靜脈麻醉藥物,因其化學結(jié)構(gòu)與維生素E相似,被報道具有廣泛的抗氧化、抗炎及抗凋亡的效應。大量文獻報道,丙泊酚預處理能通過多種分子機制,作用于多條信號通路而有效減輕1/R誘導的多器官損傷。然而,盡管有少數(shù)文獻報道,丙泊酚在肝臟I/R損傷中的作用及其確切機制尚不明確,其保護效應尚缺乏臨床試驗佐證�；诖�,本研究在前期文獻報道的基礎(chǔ)上,結(jié)合體外實驗、動物及臨床試驗... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２丙泊酚預處理對細胞凋亡的影響，Ｆｌｏｗｊｏ?６．０軟件分析細胞總凋亡率；＞＜０．０５／＞＜０．０１，??

為進一步研究丙泊酚預處理對缺氧再灌注細胞凋亡的影響，我們采用??Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ細胞促凋亡蛋白Ｃａｓｐａｓｅ－３及抗凋亡基因Ｂｃｌ－２蛋白表達水平。結(jié)果??如圖３所示，缺氧后８ｈ再灌注能顯著誘導細胞促凋亡蛋白Ｃａｓｐａｓｅ－３的表達（２．４５??倍）而抑制抗凋亡蛋白Ｂｃｌ－２的表達（２．７倍），而丙泊酚預處理能顯著抑制促??凋亡蛋Ｇ?Ｃａｓｐａｓｅ－３的表達而逆轉(zhuǎn)丨／Ｒ對抗凋亡蛋白Ｂｃｌ－２表達的抑制作用（與??１／Ｒ組比較分別降低３１％及增高１．６７倍）。結(jié)果表明丙泊酚預處理可通過調(diào)控缺??氧再灌注誘導細胞調(diào)亡相關(guān)蛋白的表達而發(fā)揮一定的抗凋亡作用。??３?－??ＯＢＣＩ－２??ｔ?＼?Ｃａｓｐａｓｅ－３?．?｜??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｌ／Ｒ?ｐｒｏｐ—?Ｃ２?Ｓ??〇??：??Ｓ???Ｔ??…?Ｒｒｌ．？?Ｉ?，?＝??Ｕ?ＶＩ?Ｃｍ?Ｋ??０???＝＝??０?．：：：三二：?．三三三??細?一?Ｃａｓｐａｓｅ－３?Ｂ?Ｂ??ｐｉ－ｉ??麟？?＿趟?ＧＡＰＤＨ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｌ／Ｒ?Ｐｒｏｐｏｆｏｌ??圖３?ｍ常對照組，Ｉ／Ｒ組及丙泊酚組中促凋亡蛋白ｃａｓｐａｓｅ－３及抗凋Ｉ＇」蛋白Ｂｄ－２的表達情況，??內(nèi)參蛋白使叫ＧＡＰＤＨ。??１．２．３丙泊酚降低缺氧／再灌注誘導的肝細胞線粒體損傷??（１）線粒體膜電位測定??為研究丙泊酚對缺氧／再灌注誘導的肝細胞線粒體功能的影響，我們采用??ＪＣ－Ｉ熒光探針對處理細胞進行染色，并采用熒光酶標儀測定ｊｃ－ｌ單體的熒光強??度。結(jié)果顯示（圖４）

為研究丙泊酚對缺氧／再灌注誘導的肝細胞線粒體功能的影響，我們采用??ＪＣ－Ｉ熒光探針對處理細胞進行染色，并采用熒光酶標儀測定ｊｃ－ｌ單體的熒光強??度。結(jié)果顯示（圖４），Ｉ／Ｒ組細胞熒光強度顯著低于對照組細胞，提示線粒體??膜電位的Ｉ、＇降，線粒體損傷。而不同濃度（５、１０、２０、４０Ｍｍｏｌ／Ｌ）的丙泊酚預??處理，能顯著升高細胞線粒體膜電位（ｐ＜０．０１），提示丙泊酚能顯著減弱缺氧／??再灌注引起的肝細胞線粒體損傷，且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。??２７??

【參考文獻】：
期刊論文
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