第一部分:p38MAPK介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)鈣超載與凋亡參與原代大鼠心肌細(xì)胞氧糖剝奪-復(fù)氧損傷目的 探討原代大鼠心肌細(xì)胞氧糖剝奪-復(fù)氧損傷中p38MAPK與鈣超載及凋亡的關(guān)系方法 取出生1～3d的SD大鼠,分離培養(yǎng)心肌細(xì)胞,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為3組:對照組（C組）、氧糖剝奪-復(fù)氧組（OGD/R組）、SB203580預(yù)處理組（OGD/R+SB組）。OGD/R組采用缺氧小室對細(xì)胞進(jìn)行氧糖剝奪6h復(fù)氧2h。OGD/R+SB組氧糖剝奪前采用10μmol/L的p38MAPK抑制劑SB203580孵育1h。倒置顯微鏡下觀察心肌細(xì)胞形態(tài),采用CCK-8法檢測細(xì)胞活力,2,4-二硝基苯肼顯色法測定培養(yǎng)基上清液乳酸脫氫酶釋放率,流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度,TUNEL染色法檢測心肌細(xì)胞凋亡率,western blot法檢測心肌細(xì)胞內(nèi)p-p38MAPK,p-STAT3、SERCA2以及Cleaved-caspase 3蛋白表達(dá),熒光定量PCR法檢測細(xì)胞內(nèi)IL-6、IL-1β、SERCA2 mRNA表達(dá)。結(jié)果 與C組比較,OGD/R組心肌細(xì)胞胞質(zhì)回縮、細(xì)胞膜折光率降低、細(xì)胞壞死,細(xì)胞活力明顯降低（P<0.01... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?ＯＧＤ／Ｒ損傷中心肌細(xì)胞活力的變化??？“＃

Ｈｓｐ７０通過調(diào)控ｐ３８ＭＡＰＫ■信號介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)鈣超載與凋亡參與原代大鼠心肌細(xì)胞氧糖剝奪－復(fù)氧損傷?第一部分??３．０ＧＤ／Ｒ損傷各時(shí)間點(diǎn)培養(yǎng)基上清中ＬＤＨ釋放率的變化??與Ｃ組比較，ＯＧＤ／Ｒ各組培養(yǎng)基上清中ＬＤＨ釋放率顯著升高（Ｐ＜０．０１）。與??ＯＧＤ６／Ｒ２組相比，隨著復(fù)氧時(shí)間的延長ＬＤＨ釋放率有所下降（Ｐ＜０．０１），見圖３，提??示ＯＧＤ６／Ｒ２組時(shí)間點(diǎn)為氧糖剝奪－復(fù)氧損傷最嚴(yán)重的時(shí)間點(diǎn)。??〇?２．５ｎ??ｘ??Ｓ）?２．０－?Ｖ??ｓ?－／＃＃??２?１．５－?ｙ?丄??＃??〇?１．０－?ｒ??（Ｄ??＞?０．５－??圣?ｏ．ｏ－ｌ?．?？?．?．???°，??ｙ，??圖３?ＯＧＤ／Ｒ損傷中心肌細(xì)胞ＬＤＨ釋放率的變化??注：與?Ｃ?組比較，＞＜０．０５，?”Ｐ＜０．０ｌ；與?ＯＧＤ６／Ｒ２?組比較，＃Ｐ＜０．０５，ｗＰ＜０．０ｌ??４．０ＧＤ／Ｒ損傷各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化??與Ｃ組比較，ＯＧＤ／Ｒ各組細(xì)胞內(nèi)相對鈣離子熒光強(qiáng)度顯著升高（Ｐ＜０．０ｌ）。與??ＯＧＤ６／Ｒ２組相比，隨著復(fù)氧時(shí)間的延長細(xì)咆內(nèi)鈣離子熒光強(qiáng)度有所下降（Ｐ＜０．０１），??表明ＯＧＤ／Ｒ損傷導(dǎo)致的鈣超載在復(fù)氧２ｈ達(dá)到高峰，見圖４。??＾?３－１?＊＊??Ｅ?ｔ??３匚?Ｔ??｜｜２．?入，??巾?〇）?／??▼??Ｉ?＾?／??１?ｓ?１．?Ｚ??２?〇??Ｕ．??￡?０??￣?〇Ｊ?１?１?１?１???。夕／?／??圖４?ＯＧＤ／Ｒ損傷中心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化??注：與?Ｃ?組比較，汐＜０．０５，”Ｐ＜０．０１；與?ＯＧＤ６／Ｒ２?組比較，＃Ｐ＜０．０５，

ｏ－ｌ?．?？?．?．???°，??ｙ，??圖３?ＯＧＤ／Ｒ損傷中心肌細(xì)胞ＬＤＨ釋放率的變化??注：與?Ｃ?組比較，＞＜０．０５，?”Ｐ＜０．０ｌ；與?ＯＧＤ６／Ｒ２?組比較，＃Ｐ＜０．０５，ｗＰ＜０．０ｌ??４．０ＧＤ／Ｒ損傷各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化??與Ｃ組比較，ＯＧＤ／Ｒ各組細(xì)胞內(nèi)相對鈣離子熒光強(qiáng)度顯著升高（Ｐ＜０．０ｌ）。與??ＯＧＤ６／Ｒ２組相比，隨著復(fù)氧時(shí)間的延長細(xì)咆內(nèi)鈣離子熒光強(qiáng)度有所下降（Ｐ＜０．０１），??表明ＯＧＤ／Ｒ損傷導(dǎo)致的鈣超載在復(fù)氧２ｈ達(dá)到高峰，見圖４。??＾?３－１?＊＊??Ｅ?ｔ??３匚?Ｔ??｜｜２．?入，??巾?〇）?／??▼??Ｉ?＾?／??１?ｓ?１．?Ｚ??２?〇??Ｕ．??￡?０??￣?〇Ｊ?１?１?１?１???。夕／?／??圖４?ＯＧＤ／Ｒ損傷中心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化??注：與?Ｃ?組比較，汐＜０．０５，”Ｐ＜０．０１；與?ＯＧＤ６／Ｒ２?組比較，＃Ｐ＜０．０５，＊＂Ｐ＜０．０ｌ??２１??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]艾塞那肽預(yù)處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J]. 白羽,王雄.  中國臨床藥理學(xué)雜志. 2017(21)
[2]心肌缺血再灌注損傷誘發(fā)細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J]. 劉靜,李樹青.  中國心血管病研究雜志. 2005(12)
[3]心肌缺血再灌注損傷與鈣超載[J]. 鮮玉瓊.  四川生理科學(xué)雜志. 1998(02)



本文編號：3292188