目的:觀察大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖（oxygen-glucose deprivation/restoration,OGD/R）損傷后,高遷移率族蛋白B1（high mobility group box 1,HMGB1）的表達(dá)以及細(xì)胞凋亡情況,并研究HMGB1對(duì)大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞OGD/R損傷后細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)將分為三部分進(jìn)行:第一部分,觀察大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)過(guò)氧糖剝奪后,不同復(fù)氧時(shí)間處理后細(xì)胞凋亡情況,以及HMGB1的表達(dá)及釋放情況。提取培養(yǎng)新生1-2日Sprague Dawley（SD）大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞,建立氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖（OGD/R）模型,模擬脊髓損傷后大鼠脊髓缺血/再灌注損傷的病理過(guò)程。實(shí)驗(yàn)分為4組:正常組（未行氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖處理的細(xì)胞）,OGD6h/R6h組（氧糖剝奪6h,復(fù)氧復(fù)糖6h處理的細(xì)胞）,OGD6h/R12h組,OGD6h/R24h組。應(yīng)用MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞活性,免疫酶聯(lián)吸附試驗(yàn)（Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA）檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)HMGB1釋放量,Western... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

S100β和DAPI鑒定體外培養(yǎng)大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞(100)

髓星形膠質(zhì)細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖后細(xì)OGD6h/R6h、12h、24h 組細(xì)胞成活率下降，*P<0.05，OGD65。測(cè)大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞 OGD/R 后細(xì)胞培的變化的 OGD/R 后各組大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)基 HMGB1 的釋放情況。ELISA 法檢測(cè)結(jié)果顯示，GD6h/R12h 組、OGD6h/R24h 組大鼠脊髓星形膠（P<0.05），且隨著復(fù)氧時(shí)間增長(zhǎng) HMGB1 的釋放MGB1 釋放是最多的（P<0.05）。表明在 OGD/R 后D6h 后，復(fù)氧 24h 內(nèi) HMGB1 的釋放是逐漸增多的

髓星形膠質(zhì)細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖后 HMGB1OGD6h/R6h、12h、24h 組細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)釋放的 HMGB1 含量明顯培養(yǎng)基中釋放的 HMGB1 最多，#P<0.05。t 法檢測(cè)大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞 OGD/R 后細(xì)達(dá)的變化lot檢測(cè)OGD/R后大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)HMGB1，OGD6h/R6h 組、OGD6h/R12h 組、OGD6h/R24h的 HMGB1 蛋白水平明顯增多（P<0.05），在氧糖剝達(dá)水平持續(xù)增高，復(fù)氧 24h 時(shí)達(dá)到高峰（P<0.05）。細(xì)胞 OGD/R 損傷后，復(fù)氧 24h 內(nèi)，細(xì)胞 HMGB1h/R24h 時(shí)最高。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]線粒體與細(xì)胞凋亡[J]. 樊廷俊,夏蘭,韓貽仁.  生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào). 2001(01)



本文編號(hào)：3290683