目的:骨感染是一種急性或慢性的骨組織炎癥反應(yīng),以骨質(zhì)破壞、骨重建紊亂和難控性炎性反應(yīng)為表現(xiàn)。白介素37（IL-37）是機(jī)體重要的一類抗炎因子,但生理表達(dá)量很低。我們?cè)诠歉腥竞喜⒐琴|(zhì)破壞的臨床樣本中檢測(cè)到了高表達(dá)的IL-37蛋白。因此,我們的研究目的就是探究這一重要的抗炎因子在感染相關(guān)炎性骨質(zhì)破壞中發(fā)揮了何種作用,從而為骨感染的治療尋找新的靶點(diǎn)。方法:通過對(duì)骨及軟組織感染標(biāo)本的收集,檢測(cè)其中IL-37的表達(dá)量。借助細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖（LPS）構(gòu)建小鼠炎性骨質(zhì)破壞模型,研究重組人IL-37蛋白的動(dòng)物體內(nèi)活性。利用RANKL和LPS分別構(gòu)建體外生理、炎性狀態(tài)下破骨細(xì)胞分化模型,探究IL-37在體外對(duì)該生物學(xué)過程的影響,探討部分分子機(jī)制。結(jié)果:通過免疫組化在感染骨及軟組織標(biāo)本中檢測(cè)到高表達(dá)的IL-37蛋白。利用重組人IL-37蛋白（4μg/天）可以緩解LPS（100μg/天）所致小鼠顱骨和四肢骨的骨質(zhì)破壞,顱骨切片TRAP染色顯示破骨細(xì)胞的數(shù)量較對(duì)照組減少。在生理狀態(tài)和炎性狀態(tài)兩種破骨細(xì)胞體外分化的途徑中,IL-37（200 ng/mL）均表現(xiàn)出抑制效果,該作用不僅依賴于降低感染相關(guān)的炎性因子（... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

骨感染臨床樣本中高表達(dá)IL-37蛋白A.四組樣本分別來(lái)自于非感染性骨折和感染性骨髓炎

行皮下注射。每只小鼠于皮下行LPS（100 μg/day）注射，連續(xù)注射7天。所有小鼠在陸軍軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心飼養(yǎng)。手術(shù)過程如圖2。圖 2 顱部皮下注射示意圖術(shù)后處理：每隔 24h 后予以皮下給藥處理，術(shù)后給予喚醒及保持溫度等處理，操作前后給予碘伏傷口消毒。小鼠同一條件單籠飼養(yǎng)，可自由活動(dòng)、進(jìn)食、水。連續(xù) 7天每日觀察小鼠活動(dòng)情況。第 8 天，麻醉下脫頸處死小鼠，去除頸部及雙下肢毛發(fā)。小心剪開皮膚、皮下層，“工”型剪開頭頸部皮膚，小心解剖注意保護(hù)顱骨完整性，取下雙側(cè)股骨，去除骨性結(jié)構(gòu)外軟組織。沿顱骨冠狀方向取樣標(biāo)本，以 4%多聚甲醛固定 24 小時(shí)后與部分下肢骨標(biāo)本一同置于 10% EDTA 溶液中脫鈣 2-3w，另一部分下肢標(biāo)本置于 70%乙醇中保存?zhèn)溆跋駥W(xué)檢測(cè)。3.2.4.2 全顱骨 TRAP 染色將處理完畢的小鼠顱骨標(biāo)本予以 PBS 反復(fù)清洗后置于 4%多聚甲醛中，室溫固定

陸軍軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.3.1 全顱骨 TRAP 染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP，tartrate resistant acid phosphatase)是破骨細(xì)胞特也是破骨細(xì)胞重要的組織化學(xué)標(biāo)志。如下圖所示，隨著 LPS 注射天數(shù)的增加骨骨縫處的 TRAP 染色范圍逐漸增加，說(shuō)明 LPS 的局部局部注射導(dǎo)致骨縫間的形成增加。


本文編號(hào)：3271475