目的:G蛋白耦聯(lián)受體（GPR30）是一種雌激素膜受體,存在于多種細(xì)胞系中,能介導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)行快速的信號(hào)傳導(dǎo)。PI3K/Akt是一種重要的信號(hào)傳導(dǎo)通路,參與多種細(xì)胞生理調(diào)節(jié),與細(xì)胞自噬相關(guān)。線粒體自噬存在于多種細(xì)胞中,通常對(duì)細(xì)胞起保護(hù)作用。關(guān)節(jié)軟骨破壞是骨性關(guān)節(jié)炎（OA）的主要特點(diǎn),軟骨細(xì)胞線粒體自噬與OA發(fā)病密切相關(guān)。通過(guò)體外小鼠ATDC5軟骨細(xì)胞培養(yǎng),檢測(cè)GPR30表達(dá),觀察雌激素對(duì)GPR30表達(dá)的影響。分析對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組中LC-3、TOM20、Hsp60、Akt、mTOR、P38和JNK的表達(dá),觀察ATDC5軟骨細(xì)胞的活力和增殖情況。使用GPR30阻滯劑或PI3K阻滯劑對(duì)ATDC5軟骨細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),研究17β-雌二醇對(duì)線粒體自噬的影響。研究報(bào)道OA的發(fā)病率逐年上升,嚴(yán)重妨礙患者生活質(zhì)量,給社會(huì)造成了嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。雖然雌激素在治療骨質(zhì)疏松以及OA方面得到了證實(shí),但作用機(jī)制尚不明確。通過(guò)體外小鼠軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)研究,探討17β-雌二醇通過(guò)GPR30/PI3K/Akt途徑介導(dǎo),抑制ATDC5軟骨細(xì)胞線粒體自噬的作用機(jī)制,為保護(hù)和改善軟骨細(xì)胞功能、OA的治療提供理論基礎(chǔ)。方法:小鼠軟骨原代細(xì)胞系... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：43 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

117β-雌二醇對(duì)ATDC5軟骨細(xì)胞GPR30表達(dá)的影響

.1.2 17β-雌二醇對(duì) ATDC5 軟骨細(xì)胞 GPR30 表達(dá)的影響，GPR30 分布含有 17β-雌二醇（10- 7mol/L）處理細(xì)胞 24 h，運(yùn)用 IF 檢測(cè)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組 GPR30 的布水平。與對(duì)照比較，*p<0.05，有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。（GPR30 紅色，胞核藍(lán)色） 17β-雌二醇使 ATDC5 細(xì)胞 LC-3 的表達(dá)減少、TOM20 和 Hsp60多為了解 17β-雌二醇對(duì)線粒體自噬相關(guān)蛋白活性的影響，本研究通過(guò) wester了 LC-3、TOM20 和 Hsp60 蛋白的表達(dá)。與對(duì)照組相比，用 17β-雌二醇處C5 軟骨細(xì)胞中 LC-3 的表達(dá)水平顯著降低；而應(yīng)用 17β-雌二醇和（或）GKi 對(duì) ATDC5 細(xì)胞 LC-3 的表達(dá)沒(méi)有顯著改變（圖 3.2.1A）。與對(duì)照組相比-雌二醇處理的 ATDC5 軟骨細(xì)胞 TOM20 和 Hsp60 的表達(dá)水平升高；而 17β（或）G15 或 PI3Ki 對(duì) TOM20 和 Hsp60 的表達(dá)沒(méi)有明顯影響（圖 3.2.1B、

17β-雌二醇處理的 ATDC5 軟骨細(xì)胞 TOM20 和 Hsp60 的表達(dá)水平升高；而 17β-雌二醇和（或）G15 或 PI3Ki 對(duì) TOM20 和 Hsp60 的表達(dá)沒(méi)有明顯影響（圖 3.2.1B、C）。圖3.2.1 17β-雌二醇、G15和PI3Ki對(duì)LC-3、TOM20和Hsp60自噬相關(guān)蛋白的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雌激素與骨關(guān)節(jié)炎[J]. 盧敏強(qiáng),鐘慶,賈兆鋒,徐曉,段莉,王大平.  國(guó)際骨科學(xué)雜志. 2018(01)
[2]線粒體自噬對(duì)新生大鼠缺氧缺血腦損傷的影響[J]. 李明熹,屈藝,母得志.  中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2017(02)
[3]雌激素的來(lái)源及其在骨代謝中的作用[J]. 王俊玲,黃思敏,梁?jiǎn)?魏秋實(shí),譚新,鄧偉民.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2015(06)



本文編號(hào)：3253058