研究背景:脊髓損傷（spinal cord injury,簡稱SCI）是指由外傷、炎癥、腫瘤等不同原因引起,具有相同臨床轉(zhuǎn)歸的一種高致殘率、高死亡率并且至今尚無有效方法可治愈的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,可造成脊髓橫斷性損傷,致?lián)p害平面以下的運(yùn)動(dòng)、感覺、括約肌及自主神經(jīng)功能障礙。脊髓損傷的發(fā)生發(fā)展伴隨著強(qiáng)烈和持續(xù)的炎癥反應(yīng),炎性細(xì)胞的浸潤與炎性因子的釋放可致使損傷范圍迅速擴(kuò)大,加劇周圍組織壞死。其中,作為廣泛存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system,CNS）中的小膠質(zhì)細(xì)胞（microglia,簡稱MG）,在脊髓損傷后,可被組織因子激活轉(zhuǎn)化為M1表型,通過吞噬壞死的細(xì)胞碎片激活胞內(nèi)的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng),釋放大量的促炎因子,包括IL-6（Interleukin-6,白細(xì)胞介素-6）、IL-1β（Interleukin-1β,白細(xì)胞介素-1β）、TNF-a（tumor necrosis factor-α,腫瘤壞死因子-α）、MHC-II、iNOS（nitric oxide synthase,一氧化碳合酶）和ROS（reactive oxygen species,活性氧分子）等,加劇組... 

【文章來源】：西安醫(yī)學(xué)院陜西省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)分組細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線

西安醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文28行為學(xué)改變時(shí)間（自傷后閉合起）自主排尿雙后肢肌束抽動(dòng)緩慢爬行自由活動(dòng)實(shí)驗(yàn)組術(shù)后24h術(shù)后2h術(shù)后12h術(shù)后24h對照組術(shù)后3h術(shù)后2h術(shù)后2h術(shù)后3h表1.小鼠術(shù)后行為學(xué)改變（組內(nèi)取均值）。3.2脊髓損傷后，組織S100-β蛋白呈高表達(dá)，并與小膠質(zhì)細(xì)胞活化存在一定聯(lián)系。小鼠脊髓組織的免疫熒光實(shí)驗(yàn)中，紅色熒光顯示S100-β蛋白，綠色熒光顯示IbA-1蛋白（IbA-1蛋白為巨噬細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞活化的標(biāo)志性蛋白）。熒光顯微鏡下觀察可見，S100-β蛋白于脊髓損傷后3d時(shí)出現(xiàn)明顯高表達(dá)，14d時(shí)表達(dá)降低至與NC組相似的水平；IbA-1蛋白在NC組、3d組、14d組著色無明顯差異，小膠質(zhì)細(xì)胞活化程度在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)上改變不明顯；通過圖像merge處理，S100-β蛋白與IbA-1蛋白的空間分布基本重疊，二者可能存在一定相關(guān)性。結(jié)果表明脊髓損傷早期S100-β蛋白呈現(xiàn)高表達(dá)，且可推斷其高表達(dá)與小膠質(zhì)細(xì)胞的活化之間存在一定相關(guān)性。圖1.免疫熒光標(biāo)記脊髓損傷后3d與14d的S100-β與IbA-1表達(dá)；紅色=S100-β，綠色=小膠質(zhì)細(xì)胞；50μm。

西安醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文293.3在脊髓損傷的早期，S100-β蛋白出現(xiàn)高表達(dá)。小鼠脊髓組織的Westernblot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在脊髓損傷后S100-β蛋白表達(dá)呈現(xiàn)先升后降的趨勢，于損傷后12h出現(xiàn)表達(dá)增多，3d時(shí)達(dá)到峰值，14d時(shí)回落至相較于NC組的正常水平；qRT-PCR分析顯示S100-β蛋白的上游mRNA呈現(xiàn)與S100-β蛋白表達(dá)相似的趨勢。表明在脊髓損傷早期（3d時(shí)），S100-β蛋白的上游基因出現(xiàn)高表達(dá)，調(diào)控S100-β蛋白高表達(dá)，并隨著時(shí)間推移逐漸回落至正常水平。圖2.Westernblot與PCR分析脊髓損傷后S100-β蛋白的表達(dá)。3.4在脊髓損傷的早期，小膠質(zhì)細(xì)胞M1型活化增多。小鼠脊髓組織的qRT-PCR分析顯示，脊髓損傷后組織iNOS和CD16（小膠質(zhì)細(xì)胞M1型活化標(biāo)志物）呈現(xiàn)高表達(dá)，發(fā)現(xiàn)二者在時(shí)間上均呈現(xiàn)先升后降的趨勢，于損傷后12h出現(xiàn)表達(dá)增多，于3d時(shí)達(dá)到峰值，于14d時(shí)回落至相較于NC組的正常水平。表明在脊髓損傷的早期，小膠質(zhì)細(xì)胞M1型活化程度逐漸升高，參與脊髓損傷后的病理生理

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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