發(fā)布時(shí)間：2021-06-23 15:03

　　血清淀粉樣蛋白A是一種急性相蛋白,其在血清中的水平在炎性環(huán)境下會(huì)上升。在許多疾病中,血清淀粉樣蛋白A的水平更是與炎癥的進(jìn)程息息相關(guān)。然而,關(guān)于血清淀粉樣蛋白A和股骨頭壞死之間的研究至今仍然是一片空白。本研究通過對(duì)股骨頭壞死病人進(jìn)行血清蛋白組學(xué)研究,結(jié)合對(duì)照組分析蛋白差異點(diǎn)發(fā)現(xiàn)血清淀粉樣蛋白A是一種在股骨頭壞死病人血清中明顯上升的蛋白。通過對(duì)酒精性、激素性和創(chuàng)傷性股骨頭壞死各20例病人血清的ELISA分析,結(jié)合對(duì)照組進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)SAA在各種病因的股骨頭壞死病人的血清中均有不同程度的升高。體外研究發(fā)現(xiàn),血清淀粉樣蛋白A能夠明顯促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的過程中加入血清淀粉樣蛋白A可以引起p-GSK3β、β-catenin、p-Erk1/2蛋白和ALP、OCN、Runx2、COL-1基因表達(dá)的下調(diào),同時(shí)引起PPARγ蛋白和aP2、Adipoq、PPARγ基因表達(dá)的上調(diào)。二者協(xié)同作用致使在加入血清淀粉樣蛋白A后大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化被抑制而成脂分化被促進(jìn)。故我們認(rèn)為,血清淀粉樣蛋白A作為一種重要的急性相炎癥蛋白能夠影響骨代謝并在股骨頭壞死... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

一組典型的雙向電泳凝膠對(duì)比圖，圖a是來自11個(gè)健康對(duì)照的人血清而圖b來自11個(gè)激素性股骨頭壞死患者

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文-15-ofHomosapiens97.3838766.4140IPI00011264CFHR1ComplementfactorH-relatedprotein1107.3838766.4232IPI00011264CFHR1ComplementfactorH-relatedprotein1117.3838766.4326IPI00011264CFHR1ComplementfactorH-relatedprotein1136.89194170.178IPI00418163C4BcomplementC4-Bpreproprotein145.6471474.7404IPI00019568F2Prothrombin(Fragment)154.8678174.4242IPI00017696C1SComplementC1ssubcomponent176.1345860.8237IPI00641737HPRHaptoglobin186.1345860.8268IPI00641737HPRHaptoglobin196.1345860.8227IPI00641737HPRHaptoglobin206.1338940.5467IPI00478493HPRhaptoglobinisoform2preproprotein216.2813580.5292IPI00552578SAA1;SAA2SerumamyloidAprotein2.3討論自從股骨頭壞死被發(fā)現(xiàn)和定義以來，該疾病的潛在分子機(jī)制一直是一個(gè)謎。盡管磁共振成像對(duì)股骨頭壞死的早期診斷做出了巨大貢獻(xiàn)，但未能及時(shí)評(píng)估疾病的活動(dòng)狀態(tài)和預(yù)后導(dǎo)致許許多多患者錯(cuò)失了最佳的治療時(shí)機(jī)�，F(xiàn)今蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)已被用于分析股骨頭壞死患者蛋白水平的變化，從而來探索和發(fā)現(xiàn)股骨頭壞死的生物標(biāo)志物[36]。既往的研究已經(jīng)確定了基質(zhì)蛋白，血管生成因子與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型中股骨頭壞死發(fā)生之間的關(guān)系[37,38]。然而，在研究股骨頭壞死患者中血清蛋白圖1-2對(duì)照組、激素性股骨頭壞死組、酒精性股骨頭壞死組、創(chuàng)傷性股骨頭壞死組病人的血清SAA水平。Figure1-2SAAserumlevelofsteroid-induced,alcohol-induced,trauma-inducedONFHpatientsandhealthyvolunteers.

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文-31-3.1.9統(tǒng)計(jì)分析使用IBMSPSSStatistics20軟件分析數(shù)據(jù)，用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（S.D.）表示所有數(shù)據(jù)。通過單因素方差分析（ANOVA）評(píng)估不同組之間的比較。P<0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.2結(jié)果3.2.1血清淀粉樣蛋白A促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖為了檢驗(yàn)血清淀粉樣蛋白A對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響，我們進(jìn)行了CCK-8實(shí)驗(yàn)，在1天、3天和7天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞活力進(jìn)行檢測(cè)。通過比較在450nm處測(cè)量的吸光度，血清淀粉樣蛋白A促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的能力如圖2-1所示。與不同濃度的血清淀粉樣蛋白A共同孵育3天后，1μg/ml和0.1μg/ml兩個(gè)濃度組血清淀粉樣蛋白A共培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與正常培養(yǎng)基培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比，細(xì)胞增殖明顯增加。不止如此，所有濃度組血清淀粉樣蛋白A共培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞增殖效果在第7天時(shí)都呈現(xiàn)出了明顯的增強(qiáng)。有趣的是，通過各個(gè)濃度組之間比較不難發(fā)現(xiàn)，0.1μg/ml濃度組血清淀粉樣蛋白A共培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，在第1天，第3天和第7天的細(xì)胞增殖效果均達(dá)到了峰值。圖2-1大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與0μg/ml，1μg/ml，0.1μg/ml或0.01μg/ml血清淀粉樣蛋白A共培養(yǎng)后測(cè)定的細(xì)胞活力。*表示p<0.05，所有實(shí)驗(yàn)都進(jìn)行了三重復(fù)。Figure1-2CellviabilityofrBMSCsco-culturedwith0μg/ml,1μg/ml,0.1μg/mlor0.01μg/mlSAA.*p<0.05,allexperimentswereperformedintriplicate.


本文編號(hào)：3245157