研究目的:探討抑制細胞調亡的B細胞淋巴瘤/白血病-xl基因（Bcl-xL）對人臍帶血干細胞定向誘導分化的影響,觀察Bcl-xL基因修飾的人臍帶血干細胞定向誘導分化以后修復兔關節(jié)軟骨損傷的療效。研究內容:（1）人臍帶血干細胞的獲取,分離培養(yǎng)、定向誘導分化成軟骨細胞;（2）慢病毒編碼的抑制細胞凋亡基因Bcl-xL轉染人臍帶血干細胞;（3）檢測Bcl-xL基因過表達對干細胞凋亡的影響;（4）檢測Bcl-xL基因過表達對干細胞分泌II型膠原蛋白、半胱氨酸蛋白酶-3和基質金屬蛋白酶3等蛋白的影響;（5）制造兔膝關節(jié)軟骨損傷模型;（6）海藻酸鈉鹽支架包被Bcl-xL基因修飾的人臍帶血干細胞,植入并修復兔軟骨損傷;（7）檢測植入的人臍帶血干細胞是否能在異種動物體內存活;（8）HE、MASSON和改良蕃紅O-固綠等染色方法觀察軟骨缺損的修復;（9）免疫組化、實時PCR、WB等方法檢測Bcl-xL基因的表達對動物體內軟骨細胞分泌II型膠原、半胱氨酸蛋白酶-3以及基質金屬蛋白酶3等蛋白影響。材料與方法:（1）在正常分娩過程中獲得人臍帶血,體外分離獲取干細胞,貼壁培養(yǎng)。取P2代細胞用TGF-β1因子聯合使用... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數】：143 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

接種24h，僅見少量梭形貼壁細胞，近似圓形或短梭形；

5d后可見分散的干

安徽醫(yī)科大學博士學位論文-24-三角形。圖1a：接種24h，僅見少量梭形貼壁細胞，近似圓形或短梭形；圖1b：5d后可見分散的干細胞小集落，集落細胞呈放射狀生長Fig1a:Onlyasmallnumberoffusiformadherentcells,similartoroundorshortfusiformcells,wereobservedat24hours.Fig1b:After5days,Scatteredstemcellcoloniescanbeseen,andcolonycellsgrowradially.圖1c：10d細胞呈長梭形，可見細胞集落；圖1d：21d后細胞形態(tài)逐漸變?yōu)槎噙呅位蛄⒎叫巍⑷切蜦ig1c：After10days,thecellswerelongfusiformandcolonycouldbeseen.Fig1d：After21days,themorphologyofthecellsgraduallychangedintopolygonsorcubes,triangles.4．2甲苯胺藍染色結果：


本文編號：3243597