發(fā)布時間：2021-06-21 06:49

　　背景與目的:疼痛是癌癥患者最常見的癥狀,流行病學(xué)調(diào)查表明,近90%的癌癥患者在病程中都有疼痛的發(fā)生。盡管按照世界衛(wèi)生組織（WHO）于1982年提出的的"疼痛三階梯療法"治療癌痛,仍有約45%的癌癥患者其疼痛不能得到有效控制。骨癌痛是嚴重的難治性癌性疼痛之一,嚴重影響患者的生活質(zhì)量,因此研究其機制,尋找有效的鎮(zhèn)痛方法,具有重要理論價值和臨床意義。研究發(fā)現(xiàn),脊髓背角 N-甲基-D-天冬氨酸受體（N-methyl-D-aspartatereceptor,NMDAR）在包括骨癌痛在內(nèi)的多種疼痛中起重要作用。NMDAR激活后,鈣離子內(nèi)流,繼而激活多條細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,引起cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）絲氨酸-133 位點（Ser-133）磷酸化,啟動其下游多種疼痛相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄,從而使其信號持續(xù)發(fā)揮作用,在疼痛的中樞敏化過程中起重要作用。最近有研究發(fā)現(xiàn),cAMP調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄共激活因子1（cAMP-regulated transcriptional co-activator 1,CRTC1）是 CREB 調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄所必... 

【文章來源】：南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１細胞復(fù)蘇后１０分鐘（Ａ：ｘ１〇〇；Ｂ：ｘ２〇〇）??ＮＣＴＣ?２４７２，，

ＮＣＴＣ?２４７２纖維肉瘤細胞貼壁生長，星形，多突觸??２．１．３細胞計數(shù)??（１）按細胞傳代步驟（１）?－?（４）獲得細胞沉淀。??（２）加入少許最小必須培養(yǎng)基（ａ－ｍｉｎｉｍａｌ?ｅｓｓｅｎｃｅ?ｍｅｄｉａ，?ａ－ＭＥＭ），用滴管輕??輕吹打混勻細胞懸液。??（３）酒精棉球擦洗計數(shù)板和蓋玻片后用擦鏡紙擦干，將蓋玻片覆蓋于計數(shù)板上，??稍稍移向一側(cè)，露出計數(shù)板臺面少許。??（４）用滴管巧巧吹打細胞懸液后，立即從蓋玻片邊緣滴入細胞懸液１０叫，使之??充滿蓋玻片與計數(shù)板之間的間隙。??（５）將計數(shù)板置于光學(xué)顯微鏡下觀察，可見細胞均勻分布。??（６）計數(shù)四大格內(nèi)的細胞量，壓中線者只記左側(cè)和上方的細胞，右側(cè)和下方不??計算在內(nèi)。（見圖３）??（７）按公式計算：細胞數(shù)／毫升＝４大格細胞總數(shù)／４Ｘ１００００。??

圖３細施計數(shù)（ｘｌＯＯ）??置于計數(shù)板上的細胞??２丄４細胞活力測試??（０按細胞傳代步驟（〇?－?（４）獲得細胞沉淀（２）加入少許（Ｘ－ＭＥＭ，用滴管輕較吹打混勻。??（３）加入等體積的０．４％臺盼藍染液，染色２－３?ｍｉ（４）酒精棉球擦洗計數(shù)板和蓋玻片后用擦鏡紙稍稍移向一側(cè)，露出計數(shù)板臺面少許。??（５）用滴管輕輕吹打細胞懸液后，立即從蓋玻充滿蓋玻片和計數(shù)板之間的間隙。??（６）光學(xué)顯微鏡下計數(shù)死亡細胞（被臺盼藍染計算細胞巧力。??２丄５

【參考文獻】：
期刊論文
[1]脊髓神經(jīng)元微小RNA-132在小鼠骨癌痛中的作用[J]. 劉玥,侯百靈,劉明,夏天嬌,孫蓓,張羽,冷鑫,石林玉,顧小萍,馬正良.  中華麻醉學(xué)雜志. 2014 (06)



本文編號：3240202