發(fā)布時(shí)間：2017-04-24 06:05

  本文關(guān)鍵詞：異氟醚后處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷保護(hù)中P38絲裂原活化蛋白激酶作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本研究旨在探討p38絲裂原活化蛋白激酶是否參與了異氟醚后處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。方法:應(yīng)用60只成年雄性SD大鼠,體重在280g~320g之間,隨機(jī)分為5組(n=12):即假手術(shù)組(C組)、缺血再灌注組(IR組)、異氟醚后處理組(IPO組)、p38MAPK抑制劑處理組(S組)、異氟醚后處理+p38MAPK抑制劑處理組(IPOS組)。各組大鼠分別按如下處理:C組只用線穿過(guò)冠狀動(dòng)脈左前降支但不進(jìn)行結(jié)扎,時(shí)間持續(xù)150min;IR組進(jìn)行缺血再灌注處理,其中缺血30min,再灌注150min;IPO組在再灌注即刻吸入1.0MAC異氟醚30min,其余同IR組;S組在缺血前尾靜脈給予1.5mg/kg的p38MAPK抑制劑SB203580,其余同IR組;IPOS組處理方法是IPO組和S組的結(jié)合。通過(guò)觀察心電圖和心肌顏色在缺血再灌注前后的變化來(lái)確定心肌缺血和再灌注的成功與否。于實(shí)驗(yàn)結(jié)束后打開(kāi)大鼠腹腔抽取腹主動(dòng)脈血,然后快速?gòu)男牡撞考粝滦呐K。血液標(biāo)本采用酶標(biāo)記免疫吸附法(Elisa)檢測(cè)炎性因子IL-6和TNF-α。取下的心肌標(biāo)本每組為12個(gè):其中8個(gè)分別用于Western-blot檢測(cè)p38MAPK和Caspase的蛋白表達(dá),用RT-PCR檢測(cè)p38MAPK的m RMA的表達(dá);其余4個(gè)標(biāo)本采用蘇木素-伊紅染色(HE染色),在光鏡下觀察心肌結(jié)構(gòu)并測(cè)定心肌梗死面積(MI)。結(jié)果:與IR組相比,其余組IL-6和TNF-α的表達(dá)均顯著降低(P0.01);與IPOS組相比,IPO組和S組IL-6和TNF-α的表達(dá)顯著升高(P0.01);S組與IPO組相比,IL-6和TNF-α表達(dá)顯著降低(P0.01);IPOS組IL-6和TNF-α表達(dá)水平最低。與IR組比較,其余各組Caspase-3蛋白表達(dá)均顯著降低(P0.01);與IPOS組相比,IPO組和S組Caspase-3蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01),IPO組與S組無(wú)差異。與IR相比,其余各組心肌梗死面積均明顯減少(P0.01);IPO組和S組與IPOS組相比,心肌梗死面積顯著增大(P0.01);而S組心肌梗死面積較IPO組小。光鏡下觀察C組心肌病理形態(tài)基本正常;IPO組、S組、IPOS組心肌病理?yè)p傷都較IR組輕;而IPOS組的損傷較IPO和S組輕。與IR組比較,其余各組p38MAPK的m RNA和蛋白表達(dá)均明顯降低(P0.01);與IPOS組比較,IPO組和S組p38MAPK的m RNA和蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01);S組p38MAPK的m RNA和蛋白表達(dá)低于IPO組(P0.01)。結(jié)論:p38MAPK的激活可以加劇心肌缺血再灌注損傷,抑制p38MAPK可以達(dá)到心肌保護(hù)作用;心肌缺血再灌注損傷過(guò)程中異氟醚能通過(guò)抑制p38MAPK信號(hào)通路而發(fā)揮心肌保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：缺血再灌注損傷 心肌保護(hù) p38MAPK 異氟醚
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R614
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-9
• 中文摘要9-11
• 英文摘要11-13
• 前言13-17
• 材料與方法17-30
• 1. 研究材料17-18
• 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物17
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品17
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備17-18
• 2. 研究方法18-30
• 2.1 動(dòng)物選擇18-19
• 2.2 大鼠心肌缺血再灌注模型制備19
• 2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組19-20
• 2.4 標(biāo)本采集20
• 2.5 標(biāo)本檢測(cè)方法20-29
• 2.5.1 ELISA法檢測(cè)IL-6 和TNF-α的表達(dá)20-22
• 2.5.2 蘇木素-伊紅染色(HE染色)光鏡下觀察大鼠心肌結(jié)構(gòu)及測(cè)定心肌梗死（MI）面積22-23
• 2.5.3 蛋白質(zhì)免疫印跡（Western-blot）分析P38MAPK和Caspase-3 蛋白的表達(dá)23-26
• 2.5.4 Real-Time PCR檢測(cè)P38MAPKm RNA的的表達(dá)26-29
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析29-30
• 結(jié)果30-37
• 討論37-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-51
• 綜述 吸入麻醉藥后處理心肌保護(hù)作用機(jī)制的研究進(jìn)展51-67
• 參考文獻(xiàn)60-67
• 附錄67-70
• 作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果70-71
• 致謝71

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