目的:本實驗旨在探究KLD-12多肽/TGF-β1納米纖維凝膠在體外實驗中對兔纖維環(huán)細胞增殖、表型及功能的影響,尋找修復椎間盤退變的理想種子細胞、細胞支架及生長因子。方法:胰蛋白酶消化法提取6月齡新西蘭大白兔腰椎纖維環(huán)內層細胞,體外培養(yǎng)至第3代,與KLD-12多肽納米纖維凝膠及TGF-β1復合,制備KLD-12多肽/TGF-β1/纖維環(huán)細胞納米纖維凝膠（實驗組）和KLD-12多肽/纖維環(huán)細胞納米纖維凝膠（對照組）,體外培養(yǎng)14 d。倒置顯微鏡觀察凝膠內細胞形態(tài)變化;細胞計數試劑盒（cell count kit 8,CCK-8）法檢測細胞增殖活性;鈣黃綠素（Calcein-AM）/碘化丙啶（PI）雙熒光染色觀察凝膠內活細胞與死亡細胞,并計算活細胞比率;阿爾新藍法檢測培養(yǎng)基中葡萄糖胺聚糖（Glycosaminoglycan,GAG）含量;免疫熒光染色觀察Ⅱ型膠原分泌情況;實時熒光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-q PCR）檢測纖維環(huán)細胞中Ⅱ型膠原及聚蛋白多糖（Aggrecan）基因表達情況。結果:（1）倒置顯微鏡觀察復合于凝膠中的纖維環(huán)細胞呈圓形,少... 

【文章來源】：石河子大學新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數】：50 頁

【學位級別】：碩士

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結果
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綜述
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期刊論文
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本文編號：3225028