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成骨細(xì)胞靶向敲除Wnt5a對(duì)小鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨及軟骨下骨的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-06-07 00:54
  目的 通過(guò)在Cre-LOXP系統(tǒng)靶向敲除成骨細(xì)胞Wnt5a的小鼠,建立型膠原酶Ⅶ誘導(dǎo)的骨關(guān)節(jié)炎模型,觀察Wnt5a在成骨細(xì)胞敲除后在該模型中對(duì)軟骨和軟骨下骨的影響。方法 通過(guò)OCN-Cre、Wnt5afl/fl小鼠交配,經(jīng)PCR測(cè)其基因型,獲得OCN-Cre+;Wnt5afl/fl(KO)基因型和Wnt5afl/fl(WT)基因型小鼠。取3月齡SPF級(jí)KO和同批生產(chǎn)的WT雄性小鼠各12只,隨機(jī)分為vehicle+WT組、vehicle+KO組、collagenase+WT 組和 collagenase+KO 組 四 組。collagenase+WT 組和collagenase+KO組小鼠右側(cè)膝關(guān)節(jié)于實(shí)驗(yàn)開始的0,2天分別注射1U Ⅶ型膠原酶((Sigma-Aldrich)),左側(cè)膝關(guān)節(jié)注射等劑量生理鹽水處理。所有小鼠6周后處死,通過(guò)免疫組化觀察成骨細(xì)胞表達(dá)Wnt5a情況(再次確定基因型)。經(jīng)大體觀察、甲苯胺藍(lán)染色觀察膝關(guān)節(jié)軟骨組織學(xué)改變并進(jìn)行評(píng)分。經(jīng)HE染色觀察軟骨組織學(xué)改變。用微計(jì)算機(jī)斷層掃描技術(shù)測(cè)定軟骨下骨骨量和微觀結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果 大體觀察及評(píng)分顯示:vehicle+WT組和veh... 

【文章來(lái)源】:華北理工大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

成骨細(xì)胞靶向敲除Wnt5a對(duì)小鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨及軟骨下骨的影響


Wnt5a免疫組織化學(xué)染色

脛骨,軟骨


華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文-16-發(fā)生改變(如圖5)。根據(jù)甲苯胺藍(lán)染色進(jìn)行脛骨軟骨OARSI評(píng)分,評(píng)分結(jié)果顯示:與vehicle+WT組相比,collagenase+WT組評(píng)分顯著增高(p<0.05);與vehicle+KO組相比,collagenase+KO組評(píng)分顯著增高(p<0.05),與collagenase+WT組相比,collagenase+KO組評(píng)分無(wú)顯著差異(如圖6)。A.vehicle+WT組;B.vehicle+KO組C.collagenase+WT組D.collagenase+KO組圖3脛骨軟骨損傷大體觀察圖4脛骨軟骨損傷大體評(píng)分

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本文編號(hào):3215504

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