骨肉瘤是青少年最常見的原發(fā)惡性骨腫瘤。骨肉瘤的標(biāo)準(zhǔn)治療包括新輔助治療、手術(shù)和術(shù)后化療。目前患者的5年生存率已經(jīng)達(dá)到70%左右,但是對(duì)復(fù)發(fā)或發(fā)生肺轉(zhuǎn)移的患者來說,治療效果仍不理想。近年來,免疫療法在治療腫瘤中表現(xiàn)出令人滿意的結(jié)果。過繼細(xì)胞治療（adoptive cell therapy,ACT）,作為免疫療法的主要手段之一,在癌癥治療中得到了廣泛的研究。γδT細(xì)胞是ACT理想的候選細(xì)胞,因?yàn)樗菀撰@得并可以在體外無限數(shù)量地?cái)U(kuò)增。但是,針對(duì)骨肉瘤的過繼γδT細(xì)胞治療效果不佳。盡管在隨后的臨床前試驗(yàn)中使用了幾種輔助方法來增強(qiáng)γδT細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用,但結(jié)果并不令人滿意。因此迫切需要找到一種新的安全的方法來解決這一問題。地西他濱（Decitabine,DAC）是一種FDA批準(zhǔn)的去甲基化藥物,不僅可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡,而且具有免疫調(diào)節(jié)功能。重要的是,它增加了NKG2D配體（NKG2D ligands,NKG2DLs）在腫瘤上的表達(dá),從而增強(qiáng)了NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用。在本次實(shí)驗(yàn)中我們探究聯(lián)合γδT細(xì)胞和地西他濱治療骨肉瘤的可能性。地西他濱通過增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞表面NKG2D配體的表達(dá),包括主要組織... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度DAC處理對(duì)人γδT細(xì)胞凋亡的影響

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文地西他濱對(duì)人γδT細(xì)胞凋亡和表型的影響6圖1.1不同濃度DAC處理對(duì)人γδT細(xì)胞凋亡的影響圖1.25uMDAC對(duì)人γδT細(xì)胞表型的影響

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文地西他濱去甲基化作用對(duì)骨肉瘤NKG2DLs表達(dá)及γδT細(xì)胞免疫應(yīng)答的作用133.3結(jié)果3.3.1DAC預(yù)處理腫瘤可以提高γδT細(xì)胞對(duì)腫瘤的殺傷能力從圖2.1可以看出，DAC或γδT細(xì)胞單獨(dú)作用抑制HOS和U2OS生長的效果并不明顯。而當(dāng)DAC預(yù)處理腫瘤1天、2天、或者3天，可以顯著提高γδT細(xì)胞殺傷效果。這說明DAC可以提高骨肉瘤細(xì)胞對(duì)γδT細(xì)胞介導(dǎo)的免疫殺傷的敏感性。圖2.1檢測(cè)γδT細(xì)胞殺傷DAC預(yù)處理腫瘤細(xì)胞效果的MTS細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)3.3.2DAC可以提高HOS和U2OS細(xì)胞MICB和ULBP1表達(dá)先前的研究報(bào)道了NKG2DL-NKG2D軸在NK細(xì)胞和γδT細(xì)胞裂解腫瘤細(xì)胞中的作用[6,18]。此外，DAC治療顯著增加了急性髓細(xì)胞白血病患者中NKG2DLs的表達(dá)[14]。DAC是否也能增加骨肉瘤細(xì)胞中NKG2DLs的表達(dá)尚未研究。用5uMDAC處理骨肉瘤細(xì)胞（HOS和U2OS細(xì)胞）3天后，我們通過PCR和流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估了骨肉瘤細(xì)胞NKG2DLs的表達(dá)。與PBS預(yù)處理的骨肉瘤細(xì)胞相比，MICB和ULBP1在DAC預(yù)處理的骨肉瘤細(xì)胞的表達(dá)提高了10倍以上，而其他NKG2DLs（MICA,ULBP2/3）的表達(dá)沒有顯著變化（圖2.2B）。此外，PCR的結(jié)果與流式結(jié)果保持一致，說明DAC處理提高了骨肉瘤細(xì)胞MICB和ULBP1基因的轉(zhuǎn)錄（圖2.2A）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Specific Antitumor Effects of Tumor Vaccine Produced by Electrofusion between Osteosarcoma Cell and Dendritic Cell in Rats[J]. Zhe Yu~(1,2) Qingyu Fan~1 Xinbao Hao~1 Hua Long~1 1 Center of Orthopedic Surgery,Orthopedics Oncology Institute of Chinese PLA,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University,China..  Cellular & Molecular Immunology. 2004(06)



本文編號(hào)：3210027