發(fā)布時(shí)間：2021-05-26 17:59

　　目的:新生兒缺血缺氧性腦損傷（hypoxic-ischemic brain injury,HIBI）發(fā)病率為2.5/1000,相當(dāng)于全球約400-900萬嬰兒,是由于子宮內(nèi)胎兒窘迫、宮內(nèi)感染、分娩期或分娩后胎兒窒息引起的圍產(chǎn)期新生兒腦損傷。HIBI死亡率高,可引起長期神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥,如認(rèn)知障礙,行為障礙或記憶障礙等。目前對(duì)于HI引起的認(rèn)知功能障礙、學(xué)習(xí)記憶能力降低臨床上仍缺乏有效治療措施。本研究從七氟醚后處理對(duì)新生大鼠缺血缺氧腦損傷的保護(hù)作用出發(fā),為明確七氟醚后處理對(duì)新生大鼠缺血缺氧腦損傷的保護(hù)作用機(jī)制實(shí)現(xiàn)以下實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、缺血缺氧后24h新生大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元、小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量變化,各類細(xì)胞24h自噬、溶酶體蛋白酶水平變化,及七氟醚后處理對(duì)其影響;2、七氟醚調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞溶酶體蛋白酶水平變化,影響海馬區(qū)神經(jīng)元死亡率與自噬的關(guān)系;3、七氟醚調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞自噬及溶酶體蛋白酶水平變化,改善遠(yuǎn)期預(yù)后與Ezh2/Pten/mTOR關(guān)系。明確七氟醚后處理的保護(hù)作用機(jī)制將為臨床改善新生兒缺血缺氧性腦病的預(yù)后提供新靶點(diǎn)、新思路。研究方法:1、新生大鼠HIBI模型制備:對(duì)7日齡Sprague... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:缺血缺氧及七氟醚后處理對(duì)新生大鼠海馬區(qū)各類細(xì)胞數(shù)量、自噬、溶酶體蛋白酶水平變化的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與模型制備
            2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
            2.2.2 新生大鼠HIBI模型制備
        2.3 七氟醚后處理
        2.4 各組死亡率及體重
        2.5 腦組織蛋白提取與Western Blot蛋白分析
        2.6 免疫熒光雙染
        2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 HI后各組死亡率及體重
        3.2 Western Blot檢測分析
        3.3 免疫熒光雙染結(jié)果
            3.3.1 缺血缺氧后及七氟醚后處理后各類細(xì)胞數(shù)及自噬水平變化
            3.3.2 缺血缺氧后及七氟醚后處理后溶酶體蛋白酶cathepsinB于海馬區(qū)表達(dá)分布及細(xì)胞溶酶體蛋白酶cathepsinB水平變化
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分:七氟醚調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞溶酶體蛋白酶cathepsinB水平變化,影響海馬區(qū)神經(jīng)元死亡率與自噬的關(guān)系
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 新生大鼠腦缺血缺氧模型制備
        2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、七氟醚后處理與給藥
        2.4 各組死亡率及體重
        2.5 腦組織蛋白提取與Western Blot蛋白分析
        2.6 免疫熒光分析
        2.7 大鼠左右腦質(zhì)量比
        2.8 腦組織病理組織學(xué)檢測
        2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 一般指標(biāo)
        3.2 Western Blot檢測
            3.2.1 在HI處理后24h,七氟醚后處理對(duì)HI所致自噬的影響
            3.2.2 在HI處理后24h,七氟醚后處理及自噬激動(dòng)劑對(duì)HI所致溶酶體蛋白酶cathepsinB、炎癥因子升高的影響
        3.3 免疫熒光結(jié)果分析
            3.3.1 在HI處理后24h,七氟醚后處理對(duì)缺血缺氧引起的小膠質(zhì)自噬水平變化的影響
            3.3.2 在HI處理后24h,七氟醚后處理對(duì)缺血缺氧引起的小膠質(zhì)溶酶體蛋白酶cathepsinB水平變化的影響
        3.4 HI后7 天左右腦質(zhì)量比
        3.5 Nissl染色檢測結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分:七氟醚調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞自噬及溶酶體蛋白酶水平變化,改善遠(yuǎn)期預(yù)后與Ezh2表觀調(diào)控的Pten/Akt/mTOR信號(hào)通路關(guān)系
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 新生大鼠腦缺血缺氧模型制備
        2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、七氟醚后處理與給藥
        2.4 各組死亡率及體重
        2.5 腦組織蛋白提取與Western Blot蛋白分析
        2.6 免疫熒光分析
        2.7 大鼠左右腦質(zhì)量比
        2.8 懸吊實(shí)驗(yàn)
        2.9 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)
        2.10 腦組織病理組織學(xué)檢測
        2.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 一般指標(biāo)
        3.2 Western Blot檢測
            3.2.1 在HI處理后24h,在新生大鼠HIBI模型中七氟醚后處理對(duì)Ezh2 表觀調(diào)控的Pten/Akt/mTOR通路的影響
            3.2.2 在HI處理后24h,在新生大鼠HIBI模型中七氟醚后處理及GSK126對(duì)HI所致自噬及溶酶體蛋白酶cathepsinB的影響
        3.3 免疫熒光結(jié)果分析
            3.3.1 在HI后24h,在新生大鼠缺血缺氧及七氟醚后處理后,GSK126 對(duì)小膠質(zhì)自噬水平變化的影響
            3.3.2 在HI后24h,在新生大鼠缺血缺氧及七氟醚后處理及GSK126 對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞cathepsinB水平變化的影響
        3.4 HI后7 天左右腦質(zhì)量比
        3.5 HI后遠(yuǎn)期行為學(xué)測試
            3.5.1 懸吊實(shí)驗(yàn)
            3.5.2 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.6 Nissl染色檢測結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：3206808