AMD3100阻斷CXCR4/β-catenin通路抑制脊髓損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-23 02:38
目的:探討SDF-1/CXCR4趨化軸抑制劑AMD3100在脊髓損傷后對(duì)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖、分化的作用及其分子機(jī)制。方法:36只雌性SD成年大鼠,隨機(jī)分成假手術(shù)組(A組,n=12)、對(duì)照組(B組,n=12)、實(shí)驗(yàn)組(C組,n=12)。B、C組均給予Allen’s打擊,C組術(shù)后給予AMD3100。術(shù)后行雙下肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分(參照BBB評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)),均于造模后7天取材,所有標(biāo)本取行HE染色及免疫組化檢測,檢測神經(jīng)干細(xì)胞、SDF-1/CXCR4軸及Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)表達(dá)變化,統(tǒng)計(jì)分析各組之間的相關(guān)性。結(jié)果:B、C組大鼠出現(xiàn)明顯的雙下肢運(yùn)動(dòng)功能障礙,BBB評(píng)分與A組相比顯著降低;雙下肢功能隨著時(shí)間而緩慢恢復(fù),但恢復(fù)程度非常有限。qRT-PCR及免疫組化檢測:損傷脊髓組織損傷區(qū)域SDF-1蛋白表達(dá)明顯增加,損傷區(qū)域內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)記物Nestin、Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)基因、蛋白顯著增加,β-tubulin陽性細(xì)胞數(shù)量明顯增多,出現(xiàn)明顯增殖分化等表現(xiàn),應(yīng)用CXCR4抑制劑后nestin、β-catenin相關(guān)表達(dá)明顯降低,β-tubulin陽性新生神經(jīng)元數(shù)量減少。...
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:40 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 主要試劑與藥品
2.1.3 主要器材
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境
2.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
2.2.3 動(dòng)物模型建立
2.2.4 標(biāo)本取材及處理
2.3 檢測方法
2.3.1 雙下肢神經(jīng)功能
2.3.2 HE染色
2.3.3 免疫組織化學(xué)
2.3.4 qRT-PCR 檢測損傷區(qū)域細(xì)胞 Nestin、β-catenin、β-tubulin 的 mRNA表達(dá)
2.4 統(tǒng)計(jì)方法
第3章 結(jié)果
3.1 大鼠脊髓損傷模型建立及雙下肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分
3.2 HE染色
3.3 免疫組織化學(xué)
3.3.1 檢測各組大鼠脊髓損傷后損傷區(qū)域SDF-1 的表達(dá)
3.3.2 檢測各組損傷區(qū)域Nestin的表達(dá)
3.3.3 檢測各組損傷區(qū)域 β-tubulin的表達(dá)
3.3.4 檢測各組損傷區(qū)域Wnt/β-catenin通路相關(guān)表達(dá)
3.4 qRT-PCR驗(yàn)證差異基因表達(dá)量
第4章 討論
第5章 結(jié)論和展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Stem cells for spine surgery[J]. Joshua Schroeder,Janina Kueper,Kaplan Leon,Meir Liebergall. World Journal of Stem Cells. 2015(01)
[2]神經(jīng)干細(xì)胞遷移的研究進(jìn)展[J]. 劉靖,曲靜,徐曉靜,張煥相. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2012(03)
[3]神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定方法[J]. 顧恩妍,哈福,李林鳳,張艷艷,呂春榮,關(guān)偉軍,馬月輝. 中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(10)
本文編號(hào):3202123
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:40 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 主要試劑與藥品
2.1.3 主要器材
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境
2.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
2.2.3 動(dòng)物模型建立
2.2.4 標(biāo)本取材及處理
2.3 檢測方法
2.3.1 雙下肢神經(jīng)功能
2.3.2 HE染色
2.3.3 免疫組織化學(xué)
2.3.4 qRT-PCR 檢測損傷區(qū)域細(xì)胞 Nestin、β-catenin、β-tubulin 的 mRNA表達(dá)
2.4 統(tǒng)計(jì)方法
第3章 結(jié)果
3.1 大鼠脊髓損傷模型建立及雙下肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分
3.2 HE染色
3.3 免疫組織化學(xué)
3.3.1 檢測各組大鼠脊髓損傷后損傷區(qū)域SDF-1 的表達(dá)
3.3.2 檢測各組損傷區(qū)域Nestin的表達(dá)
3.3.3 檢測各組損傷區(qū)域 β-tubulin的表達(dá)
3.3.4 檢測各組損傷區(qū)域Wnt/β-catenin通路相關(guān)表達(dá)
3.4 qRT-PCR驗(yàn)證差異基因表達(dá)量
第4章 討論
第5章 結(jié)論和展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Stem cells for spine surgery[J]. Joshua Schroeder,Janina Kueper,Kaplan Leon,Meir Liebergall. World Journal of Stem Cells. 2015(01)
[2]神經(jīng)干細(xì)胞遷移的研究進(jìn)展[J]. 劉靖,曲靜,徐曉靜,張煥相. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2012(03)
[3]神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定方法[J]. 顧恩妍,哈福,李林鳳,張艷艷,呂春榮,關(guān)偉軍,馬月輝. 中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(10)
本文編號(hào):3202123
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