目的研究高滲透壓條件培養(yǎng)大鼠髓核細(xì)胞（rat nucleus pulposus）時(shí),水通道蛋白3（aquaporin-3,AQP-3）的表達(dá)情況,闡明高滲環(huán)境誘導(dǎo)髓核細(xì)胞凋亡過(guò)程中AQP-3的作用,同時(shí)探究ERK1/2信號(hào)通路的機(jī)制。方法分離提取大鼠髓核細(xì)胞,并進(jìn)行體外培養(yǎng),按330、550mOsm/kg的滲透壓分組,采用CCK-8法檢測(cè)髓核細(xì)胞增殖活性,Annexin V-APC/PI流式細(xì)胞分析檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,Western blot和實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax和caspase3表達(dá)情況,同時(shí),采用免疫細(xì)胞化學(xué)、Western blot和定量PCR檢測(cè)不同滲透壓條件的AQP-3表達(dá)情況。然后,利用過(guò)表達(dá)慢病毒提高髓核細(xì)胞AQP-3的表達(dá),進(jìn)一步觀察AQP-3對(duì)高滲環(huán)境誘導(dǎo)髓核細(xì)胞凋亡的作用,采用流式細(xì)胞分析檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,Western blot和定量PCR檢測(cè)凋亡相關(guān)分子Bcl-2、Bax和caspase3表達(dá)情況,并借助Western blot檢測(cè)ERK1/2通路活性的變化。最后,加入U(xiǎn)0126抑制ERK1/2活性,觀察過(guò)表達(dá)AQP-3髓核細(xì)胞在高滲環(huán)境中... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
英文摘要
中文摘要
1.前言
2.材料與儀器
3.實(shí)驗(yàn)方法
4.結(jié)果
5.討論
6.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 椎間盤(pán)退行性改變和髓核細(xì)胞凋亡
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3197526