外源性硫化氫對于燒傷血清干預(yù)表皮細(xì)胞內(nèi)鈣離子及鈣調(diào)蛋白濃度影響的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-15 17:40
目的探討外源性H2S對于燒傷血清干預(yù)表皮細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度及CAM蛋白表達(dá)的影響。方法選取350g-400g健康SD雄性大鼠,建立30%Ⅲ度燒傷大鼠模型。分別對正常大鼠和燒傷大鼠行腹主動(dòng)脈采血,制備正常血清和燒傷血清。采用體外培養(yǎng)第三代大鼠表皮細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。分別用正常血清、燒傷血清及燒傷血清+Na SH干預(yù)表皮細(xì)胞。收集各組細(xì)胞,采用Fluo-4,AM對胞漿內(nèi)Ca2+進(jìn)行熒光染色,并用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)Ca2+平均熒光強(qiáng)度;采用Western-blot檢測細(xì)胞內(nèi)CAM的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果(1)正常血清組Ca2+平均熒光強(qiáng)度(12177.11±478.77)明顯低于燒傷血清組Ca2+平均熒光強(qiáng)度(14852.33±313.60),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);(2)燒傷血清組Ca2+平均熒光強(qiáng)度(14852.33±313.60)明顯高于燒傷血清+Na SH組(1.0h)Ca2+平均熒光強(qiáng)度(12325.00±286.36),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);(3)燒傷血清+Na SH組(1.0h)Ca2+平均熒光強(qiáng)度(12325.00±286.36)明顯低于燒傷血清...
【文章來源】:青海大學(xué)青海省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
主要符號對照表
第一章 引言
1.1 鈣離子及鈣調(diào)蛋白的生理功能
1.2 鈣離子在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用
1.3 硫化氫的生理功能
1.4 硫化氫與鈣離子的關(guān)系
1.5 本研究的設(shè)想
第二章 材料與方法
2.1 技術(shù)路線圖
2.2 實(shí)驗(yàn)場所及動(dòng)物
2.3 主要儀器
2.4 主要試劑和耗材
2.5 主要配置溶液
2.6 實(shí)驗(yàn)方法及其步驟
2.6.1 燒傷大鼠造模
2.6.2 提取大鼠血清的方法
2.6.3 培養(yǎng)表皮細(xì)胞常用的方法
2.6.4 實(shí)驗(yàn)大鼠、表皮細(xì)胞分組及干預(yù)措施
2.6.5 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化
2.6.6 Western-blot檢測細(xì)胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白的濃度
2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 造模后的燒傷大鼠皮膚病理切片
3.2 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度
3.3 Western-blot檢測細(xì)胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白濃度
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
參考文獻(xiàn)
作者簡歷
本文編號:3188066
【文章來源】:青海大學(xué)青海省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
主要符號對照表
第一章 引言
1.1 鈣離子及鈣調(diào)蛋白的生理功能
1.2 鈣離子在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用
1.3 硫化氫的生理功能
1.4 硫化氫與鈣離子的關(guān)系
1.5 本研究的設(shè)想
第二章 材料與方法
2.1 技術(shù)路線圖
2.2 實(shí)驗(yàn)場所及動(dòng)物
2.3 主要儀器
2.4 主要試劑和耗材
2.5 主要配置溶液
2.6 實(shí)驗(yàn)方法及其步驟
2.6.1 燒傷大鼠造模
2.6.2 提取大鼠血清的方法
2.6.3 培養(yǎng)表皮細(xì)胞常用的方法
2.6.4 實(shí)驗(yàn)大鼠、表皮細(xì)胞分組及干預(yù)措施
2.6.5 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化
2.6.6 Western-blot檢測細(xì)胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白的濃度
2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 造模后的燒傷大鼠皮膚病理切片
3.2 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度
3.3 Western-blot檢測細(xì)胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白濃度
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
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本文編號:3188066
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