脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷,可導(dǎo)致嚴重的運動、感覺和自主功能障礙。由于受損的神經(jīng)元難以再生和修復(fù),尚無有效治療脊髓損傷的方法。隨著科學(xué)技術(shù)及臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展,細胞移植成為促進脊髓損傷修復(fù)的潛在方法。移植后的細胞能夠通過多種機制發(fā)揮功效,包括神經(jīng)保護、免疫調(diào)節(jié)、促進軸突萌發(fā)和/或再生以及促進髓鞘再生等。然而,受到損傷部位惡劣微環(huán)境的影響,移植細胞的存活及功能的發(fā)揮成為臨床治療脊髓損傷的亟待解決的難題。支架和細胞是組織工程的兩大構(gòu)成要素。近年來,生物材料被廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù),以改善微環(huán)境,促進移植細胞的存活。因此,為移植細胞提供結(jié)構(gòu)和功能支持的生物支架有利于神經(jīng)損傷的有效修復(fù)。有研究表明,絲素蛋白纖維移植到損傷部位可改善受損微環(huán)境,促進神經(jīng)纖維再生,而不引起炎癥反應(yīng),是神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)組織工程的理想選擇。本實驗室前期研究表明,絲素蛋白纖維對神經(jīng)類細胞具有良好的生物相容性,為細胞提供豐富的粘附位點。將其設(shè)計成更接近體內(nèi)環(huán)境的多孔三維結(jié)構(gòu)有助于神經(jīng)細胞遷移、增殖、分化以及損傷部位的神經(jīng)纖維再生。本實驗中使用的三維絲纖維（three-dime... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
序言
材料與方法
    1. 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 基本試劑
        1.3 實驗儀器
        1.4 主要試劑配制
    2. 實驗方法
        2.1 大鼠皮膚成纖維細胞的原代培養(yǎng)、傳代及凍存
        2.2 3D-SF支架的制備
        2.3 化學(xué)誘導(dǎo)RDFs重編程為神經(jīng)元
        2.4 細胞免疫熒光染色(以Tubb3為例)
        2.5 CCK-8檢測細胞增殖
        2.6 細胞凋亡檢測
        2.7 大鼠脊髓損傷模型制備以及神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的移植
        2.8 脊髓組織準備
        2.9 組織免疫熒光染色
        2.10 H&E染色
        2.11 Masson三色法染色
        2.12 BBB評分及45°網(wǎng)格攀爬實驗
        2.13 統(tǒng)計學(xué)分析
實驗結(jié)果
    1. 大鼠皮膚成纖維細胞(RDFs)的培養(yǎng)及鑒定
    2. 3D-SF與RDFs的生物相容性分析
        2.1 RDFs在3D-SF支架上的形貌分析
        2.2 3D-SF對RDFs增殖的影響
        2.3 3D-SF對RDFs調(diào)亡的影響
    3. 化學(xué)誘導(dǎo)RDFs重編程為神經(jīng)元
    4. 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(3D-SF-CiNs)的構(gòu)建
    5. 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)促進大鼠脊髓損傷修復(fù)
        5.1 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對SCI的組織學(xué)水平修復(fù)
        5.2 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對SCI大鼠運動功能的修復(fù)
討論
參考文獻
結(jié)論
綜述
    參考文獻
本研究所獲基金資助
縮略詞表
致謝



本文編號：3188048