背景:SPARC蛋白（Secreted Protien Acidic and Rich in Cysteine）是由內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等分泌的具有抑制細(xì)胞黏附、調(diào)控細(xì)胞周期并促進(jìn)組織纖維化等功能的小分子糖蛋白。文獻(xiàn)報(bào)道其與細(xì)胞增殖、血管新生、創(chuàng)傷修復(fù)及更新密切相關(guān),SPARC蛋白可以通過(guò)調(diào)節(jié)血管生成、抑制細(xì)胞黏附、促進(jìn)細(xì)胞增殖來(lái)促進(jìn)腫瘤組織的生長(zhǎng)及侵襲和轉(zhuǎn)移。隨著研究的深入,已經(jīng)有大量實(shí)驗(yàn)證明SPARC蛋白在心臟、肺、腎臟、肝臟、真皮、腸、眼睛等纖維化病變組織中呈現(xiàn)高表達(dá),在各種乳腺癌、胃癌等腫瘤性疾病里也有著特定的作用。在小鼠肝纖維化模型中,SPARC蛋白基因敲除的小鼠膠原含量較低、炎癥反應(yīng)減輕、MMP-2表達(dá)增加,肝臟纖維化程度明顯改善。更有學(xué)者提出外源性si RNA干擾SPARC蛋白的小鼠模型中可有效抑制皮膚成纖維細(xì)胞及小鼠SPARC蛋白基因表達(dá),試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞膠原合成明顯減低,經(jīng)博來(lái)霉素誘導(dǎo)的缺失SPARC基因的小鼠模型中小鼠的皮膚及肺纖維化病變也能得以抑制。皮膚瘢痕的發(fā)生是成纖維細(xì)胞過(guò)度增生、膠原蛋白過(guò)度沉積及TGF-β1、MMPs家族、TSG-6等多種細(xì)胞因子相互作... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表(Abbreviation)
摘要
Abstract
第一部分 SPARC蛋白在正常皮膚組織及皮膚瘢痕組織中的表達(dá)
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 研究對(duì)象的一般資料
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2.3 試劑
        1.2.4 主要試劑配制(按說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行配制)
        1.2.5 實(shí)驗(yàn)步驟
            1.2.5.1 組織標(biāo)本處理
            1.2.5.2 Ki67 免疫組化染色
    1.3 結(jié)果
    1.4 討論
第二部分 SPARC蛋白對(duì)人成纖維細(xì)胞增殖和TGF-β1、MMPs瘢痕相關(guān)因子的影響作用
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 組織標(biāo)本
        2.2.2 主要試劑與儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 皮膚和瘢痕成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        2.3.2 正常皮膚成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        2.3.3 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖與SPARC蛋白對(duì)KFs的細(xì)胞作用..
        2.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期
        2.3.5 利用流式細(xì)胞儀來(lái)檢測(cè)正常成纖維細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組SPARC蛋白作用后的成纖維細(xì)胞的凋亡
        2.3.6 蛋白印跡(Western blot)法檢測(cè)細(xì)胞因子TGFβ-1/MMP-2/MMP-9 的表達(dá)
        2.3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    2.4 .結(jié)果
        2.4.1 SPARC蛋白促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞的增殖
        2.4.2 SPARC蛋白對(duì)成纖維細(xì)胞周期的影響
        2.4.3 SPARC蛋白抑制NFs/KFs凋亡
        2.4.4 SPARC蛋白對(duì)各組細(xì)胞中TGFβ-1、MMP-2、MMP-9 表達(dá)的影響及相關(guān)性
    2.5 討論
    2.6 結(jié)論
第三部分 SPARC蛋白對(duì)兔耳瘢痕模型增生的影響和TGF-β1/MMPs瘢痕相關(guān)因子的變化
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 主要試劑與儀器
        3.2.2 兔耳瘢痕模型的建立及給藥
        3.2.3 HE染色
        3.2.4 Ki67 免疫組化染色
        3.2.5 天狼星紅染色
        3.2.6 Western Blot檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組于對(duì)照組中TGF-β1、MMP-2、MMP-9 的表達(dá)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 肉眼大體觀察及瘢痕指數(shù)的檢測(cè)結(jié)果
        3.3.2 SPARC蛋白對(duì)兔耳瘢痕組織中成纖維細(xì)胞增生和膠原沉積的影響
        3.3.3 SPARC蛋白對(duì)各組標(biāo)本中TGFβ-1/MMP-2/MMP-9 表達(dá)的影響及相關(guān)性
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
第四部分 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 SPARC 調(diào)節(jié)組織器官纖維化中的作用及研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3166417