背景:SPARC蛋白（Secreted Protien Acidic and Rich in Cysteine）是由內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等分泌的具有抑制細(xì)胞黏附、調(diào)控細(xì)胞周期并促進(jìn)組織纖維化等功能的小分子糖蛋白。文獻(xiàn)報道其與細(xì)胞增殖、血管新生、創(chuàng)傷修復(fù)及更新密切相關(guān),SPARC蛋白可以通過調(diào)節(jié)血管生成、抑制細(xì)胞黏附、促進(jìn)細(xì)胞增殖來促進(jìn)腫瘤組織的生長及侵襲和轉(zhuǎn)移。隨著研究的深入,已經(jīng)有大量實(shí)驗(yàn)證明SPARC蛋白在心臟、肺、腎臟、肝臟、真皮、腸、眼睛等纖維化病變組織中呈現(xiàn)高表達(dá),在各種乳腺癌、胃癌等腫瘤性疾病里也有著特定的作用。在小鼠肝纖維化模型中,SPARC蛋白基因敲除的小鼠膠原含量較低、炎癥反應(yīng)減輕、MMP-2表達(dá)增加,肝臟纖維化程度明顯改善。更有學(xué)者提出外源性si RNA干擾SPARC蛋白的小鼠模型中可有效抑制皮膚成纖維細(xì)胞及小鼠SPARC蛋白基因表達(dá),試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞膠原合成明顯減低,經(jīng)博來霉素誘導(dǎo)的缺失SPARC基因的小鼠模型中小鼠的皮膚及肺纖維化病變也能得以抑制。皮膚瘢痕的發(fā)生是成纖維細(xì)胞過度增生、膠原蛋白過度沉積及TGF-β1、MMPs家族、TSG-6等多種細(xì)胞因子相互作... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表(Abbreviation)
摘要
Abstract
第一部分 SPARC蛋白在正常皮膚組織及皮膚瘢痕組織中的表達(dá)
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 研究對象的一般資料
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2.3 試劑
        1.2.4 主要試劑配制(按說明書要求進(jìn)行配制)
        1.2.5 實(shí)驗(yàn)步驟
            1.2.5.1 組織標(biāo)本處理
            1.2.5.2 Ki67 免疫組化染色
    1.3 結(jié)果
    1.4 討論
第二部分 SPARC蛋白對人成纖維細(xì)胞增殖和TGF-β1、MMPs瘢痕相關(guān)因子的影響作用
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 組織標(biāo)本
        2.2.2 主要試劑與儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 皮膚和瘢痕成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        2.3.2 正常皮膚成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        2.3.3 MTT法檢測細(xì)胞增殖與SPARC蛋白對KFs的細(xì)胞作用..
        2.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期
        2.3.5 利用流式細(xì)胞儀來檢測正常成纖維細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組SPARC蛋白作用后的成纖維細(xì)胞的凋亡
        2.3.6 蛋白印跡(Western blot)法檢測細(xì)胞因子TGFβ-1/MMP-2/MMP-9 的表達(dá)
        2.3.7 統(tǒng)計學(xué)處理
    2.4 .結(jié)果
        2.4.1 SPARC蛋白促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞的增殖
        2.4.2 SPARC蛋白對成纖維細(xì)胞周期的影響
        2.4.3 SPARC蛋白抑制NFs/KFs凋亡
        2.4.4 SPARC蛋白對各組細(xì)胞中TGFβ-1、MMP-2、MMP-9 表達(dá)的影響及相關(guān)性
    2.5 討論
    2.6 結(jié)論
第三部分 SPARC蛋白對兔耳瘢痕模型增生的影響和TGF-β1/MMPs瘢痕相關(guān)因子的變化
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 主要試劑與儀器
        3.2.2 兔耳瘢痕模型的建立及給藥
        3.2.3 HE染色
        3.2.4 Ki67 免疫組化染色
        3.2.5 天狼星紅染色
        3.2.6 Western Blot檢測實(shí)驗(yàn)組于對照組中TGF-β1、MMP-2、MMP-9 的表達(dá)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 肉眼大體觀察及瘢痕指數(shù)的檢測結(jié)果
        3.3.2 SPARC蛋白對兔耳瘢痕組織中成纖維細(xì)胞增生和膠原沉積的影響
        3.3.3 SPARC蛋白對各組標(biāo)本中TGFβ-1/MMP-2/MMP-9 表達(dá)的影響及相關(guān)性
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
第四部分 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 SPARC 調(diào)節(jié)組織器官纖維化中的作用及研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3166417