目的:通過體外構(gòu)建終板軟骨細(xì)胞牽張力誘導(dǎo)退變模型,探討力學(xué)敏感MicroRNA-199a-5p在牽張力條件下誘導(dǎo)終板軟骨細(xì)胞退變中的調(diào)控機(jī)制。方法:收集因年輕頸椎骨折患者在我科接受頸椎手術(shù)的終板軟骨組織,通過FX-5000細(xì)胞應(yīng)變加載系統(tǒng)應(yīng)用在體外構(gòu)建體終板軟骨細(xì)胞牽張力模型（10%伸長率、0.5Hz、12h/d）;采用MicroRNA芯片檢測技術(shù)檢測牽張力作用后差異MicroRNAs表達(dá)情況,并通過Realtime RT-PCR驗(yàn)證芯片結(jié)果;采用Targetscan、Miranda、miRbase、mirdb四種生物學(xué)軟件分別預(yù)測差異表達(dá)MicroRNAs靶基因;選取目標(biāo)MicroRNA-199a-5p進(jìn)行動物體外實(shí)驗(yàn),細(xì)胞染色觀察牽張力刺激前后軟骨細(xì)胞的表型;鬼筆環(huán)肽染色用于檢測牽張力刺激后細(xì)胞骨架的改變情況,細(xì)胞增殖和凋亡情況分別采用AlamarBlue法、流式細(xì)胞術(shù)方式檢測;雙熒光素酶報(bào)告基因方法驗(yàn)證MicroRNA-199a-5p對IKBKB靶基因的直接作用;分別通過采用Realtime RT-PCR和western blot方法檢測過表達(dá)（mimic）和抑制（inhibit... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
研究材料（資料、內(nèi)容）與方法
    1.研究內(nèi)容
    2.材料與方法
    3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-140-5P參與調(diào)控頸椎軟骨終板退變[J]. 程細(xì)高,賈驚宇,吳添龍,李健,張磊磊,殷明.  南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014(05)
[2]兔椎體軟骨終板血管芽增齡性變化[J]. 徐宏光,陳小虎,王弘,王凌挺,陳學(xué)武.  中華骨科雜志. 2011 (04)
[3]阻斷軟骨終板營養(yǎng)對終板軟骨細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 徐宏光,陳學(xué)武,盧林明,劉平,夏良政.  皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2008(01)



本文編號：3159375