μ/δ阿片受體異聚體活化小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)嗎啡耐受的分子機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-23 14:02
目的:脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞促炎M1型活化狀態(tài)及促炎因子的釋放可能與嗎啡耐受發(fā)展機(jī)制相關(guān)。μ/δ阿片受體異聚體參與調(diào)控痛覺(jué)缺失,我們前期預(yù)實(shí)驗(yàn)提示其與嗎啡耐受過(guò)程存在關(guān)聯(lián)。本研究提取大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,初步探討在嗎啡刺激下,μ/δ阿片受體異聚體在調(diào)節(jié)體外小膠質(zhì)細(xì)胞激活狀態(tài)、P2X4R(P2X4 receptor,P2X4R)及促炎因子IL-1β中的作用,探究μ/δ阿片受體異聚體干擾多肽(MORTM1-TAT)在嗎啡耐受大鼠痛覺(jué)過(guò)敏及脊髓M1型活化標(biāo)志物CD86、P2X4R的表達(dá)中的作用,為防治嗎啡耐受提供有潛力的理論依據(jù),探索可能存在的細(xì)胞分子機(jī)理。方法:實(shí)驗(yàn)分為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn):1.探究在嗎啡刺激下,μ/δ阿片受體異聚體對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞激活類型、P2X4R表達(dá)情況的影響;2.探究在嗎啡刺激下,μ/δ阿片受體異聚體和P2X4R對(duì)小膠質(zhì)炎癥因子IL-1β合成釋放的影響。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)主要有三部分,將提取好的大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞種于6孔板,采用隨機(jī)數(shù)字表法分組。第一部分分為4組(n=6),對(duì)照組(Control組)、嗎啡組(Morphine組)、μ/δ阿片受體異聚體激動(dòng)劑組(MA組)...
【文章來(lái)源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:46 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料與方法
1、實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
2、實(shí)驗(yàn)方法
2.1 神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取與培養(yǎng)
2.2 實(shí)驗(yàn)分組
2.3 μ/δ阿片受體異聚體免疫共沉淀步驟
2.4 Western Blot步驟
2.5 小膠質(zhì)細(xì)胞免疫雙熒光測(cè)定
2.6 熒光定量PCR法測(cè)定mRNA表達(dá)量
2.7 IL-1βELISA測(cè)定
3、統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
1、μ/δ阿片受體異聚體參與嗎啡介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞促M(fèi)1型激活
2、μ/δ阿片受體異聚體參與嗎啡介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞P2X4R的表達(dá)
3、μ/δ阿片受體異聚體在小膠質(zhì)細(xì)胞的炎癥因子IL-1β中的作用
4、嗎啡通過(guò)P2X4R增強(qiáng)IL-1β的釋放
TM1-TAT對(duì)嗎啡耐受大鼠的機(jī)械縮足反應(yīng)閾值的影響"> 5、鞘內(nèi)注射MORTM1-TAT對(duì)嗎啡耐受大鼠的機(jī)械縮足反應(yīng)閾值的影響
TM1-TAT對(duì)脊髓中CD86及P2X4R表達(dá)的影響"> 6、鞘內(nèi)注射MORTM1-TAT對(duì)脊髓中CD86及P2X4R表達(dá)的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]電針對(duì)骨癌痛-嗎啡耐受大鼠藍(lán)斑核μ阿片受體表達(dá)的干預(yù)[J]. 付桃芳,王玲玲,杜俊英,陳峰,房軍帆,梁宜,方劍喬. 中國(guó)針灸. 2017(05)
[2]嗎啡耐受機(jī)制研究新進(jìn)展[J]. 宋揚(yáng),趙昱,李軼聰,曾凡榮. 微量元素與健康研究. 2017(02)
本文編號(hào):3155461
【文章來(lái)源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:46 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料與方法
1、實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
2、實(shí)驗(yàn)方法
2.1 神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取與培養(yǎng)
2.2 實(shí)驗(yàn)分組
2.3 μ/δ阿片受體異聚體免疫共沉淀步驟
2.4 Western Blot步驟
2.5 小膠質(zhì)細(xì)胞免疫雙熒光測(cè)定
2.6 熒光定量PCR法測(cè)定mRNA表達(dá)量
2.7 IL-1βELISA測(cè)定
3、統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
1、μ/δ阿片受體異聚體參與嗎啡介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞促M(fèi)1型激活
2、μ/δ阿片受體異聚體參與嗎啡介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞P2X4R的表達(dá)
3、μ/δ阿片受體異聚體在小膠質(zhì)細(xì)胞的炎癥因子IL-1β中的作用
4、嗎啡通過(guò)P2X4R增強(qiáng)IL-1β的釋放
TM1-TAT對(duì)嗎啡耐受大鼠的機(jī)械縮足反應(yīng)閾值的影響"> 5、鞘內(nèi)注射MORTM1-TAT對(duì)嗎啡耐受大鼠的機(jī)械縮足反應(yīng)閾值的影響
TM1-TAT對(duì)脊髓中CD86及P2X4R表達(dá)的影響"> 6、鞘內(nèi)注射MORTM1-TAT對(duì)脊髓中CD86及P2X4R表達(dá)的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]電針對(duì)骨癌痛-嗎啡耐受大鼠藍(lán)斑核μ阿片受體表達(dá)的干預(yù)[J]. 付桃芳,王玲玲,杜俊英,陳峰,房軍帆,梁宜,方劍喬. 中國(guó)針灸. 2017(05)
[2]嗎啡耐受機(jī)制研究新進(jìn)展[J]. 宋揚(yáng),趙昱,李軼聰,曾凡榮. 微量元素與健康研究. 2017(02)
本文編號(hào):3155461
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