發(fā)布時(shí)間：2021-04-11 21:37

　　研究目的骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis,OA）是一種軟骨磨損破壞和滑膜炎癥為主的慢性退行性疾病。因關(guān)節(jié)軟骨沒有血管,軟骨細(xì)胞再生能力較弱,受損的軟骨很難修復(fù)。OA發(fā)病與年齡、肥胖、職業(yè)、基因多態(tài)性、激素水平等多種因素有關(guān),其發(fā)病過程復(fù)雜,具體機(jī)制尚不明確。目前治療OA常用方法有非藥物輔助治療、藥物治療、手術(shù)治療和新型的再生治療法。但前三者均以緩解病情,改善功能為主,而再生治療法有希望修復(fù)受損的軟骨。再生治療法包括關(guān)節(jié)腔注射干細(xì)胞法、軟骨組織工程法和為骨折術(shù),但后兩者還需要手術(shù)來完成。關(guān)節(jié)腔注射干細(xì)胞是最為便捷的方法。關(guān)節(jié)腔注射所用的干細(xì)胞一般都是間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）。在較多種干細(xì)胞中脂肪組織來源干細(xì)胞（adipose tissue derived stem cells,ADSCs）由于其來源豐富、取材方便、含量高等優(yōu)點(diǎn),已成為研究最多的干細(xì)胞。多項(xiàng)研究證實(shí)關(guān)節(jié)腔注射ADSCs治療OA的有效性,但目前還是在研究階段,并沒有在臨床上廣泛應(yīng)用,仍有較多問題需要解決。已有的動物實(shí)驗(yàn)和臨床研究主要集中于自體來源ADSCs,同種異體體外擴(kuò)增的ADSCs治療OA的研究并不多。ADSCs不... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：161 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１?ＡＤＳＣｓ提取分離步驟??

４８?ｈ；?Ｄ．?ＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｆｏｒ?７２?ｈ；?Ｅ．?ＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｆｏｒ?９６?ｈ；?Ｂａｒ：?１００?（ｘｍ?（見實(shí)驗(yàn)??記錄Ｉ－ｐｌｌ）??傳代培養(yǎng)的ＡＤＳＣｓ如圖２－３所示。Ａ圖為ＰＩ?ＡＤＳＣｓ，Ｂ圖為Ｐ?２?ＡＤＳＣｓ，??Ｃ圖為ｐ?３?ＡＤＳＣｓ，均為１００倍照片。各代數(shù)的ＡＤＳＣｓ均呈長梭型并有較多正??在分裂著的細(xì)胞，說明生長比較旺盛。傳代培養(yǎng)的ＡＤＳＣｓ具有良好的生長活性，??仍保持長梭型形態(tài)，生長速度比原代細(xì)胞快，３？４?ｄ能達(dá)到８０％融合度。本實(shí)驗(yàn)??所用的細(xì)胞為第三代的細(xì)胞。??３６??

Ａ．?ＰＩ?ＡＤＳＣｓ；Ｂ．?Ｐ２ＡＤＳＣｓ；Ｃ．Ｐ３ＡＤＳＣｓ；Ｂａｒ：１０〇Ｈｍ．（見實(shí)驗(yàn)記錄?Ｉ－ｐｌ２）??３．２?ＡＤＳＣｓ表面標(biāo)志物表達(dá)??流式細(xì)胞儀檢測Ｐ３代ＡＤＳＣｓ表面抗原，結(jié)果如圖２－４所示。ＡＤＳＣｓ高表??達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞（ＭＳＣｓ）特異性表面抗原ＣＤ９０和ＣＤ４４，而不表達(dá)造血細(xì)胞表??面抗原ＣＤ４５和ＣＤｌｌｂ。結(jié)果證明本實(shí)驗(yàn)分離培養(yǎng)的ＡＤＳＣｓ具有ＭＳＣｓ的明顯??特征。??２１１?Ｔ１?３８８｜—ｊ??３６８ｉ—ｊ１?規(guī)????Ｍ?；：：?１?５７２％?；ｉｉ?２，３％??ｕ?５３ｉ＾－ＡＩ?：ｌｌｔｉ?：ｉａ??１０°?１０１?１０２?１０５?１〇ｘ?１０°?１０１?１〇２?１０３?１０Ｘ?１０°?１０１?１０：?１０３?１０４?１０Ｌ?１０１?１０‘?１０。１（Ｔ??ＣＤ９０?ＣＤ４４?ＣＤ４５?ＣＤｌｌｂ??圖２－４用流式細(xì)胞儀分析大鼠Ｐ３?ＡＤＳＣｓＣＤ４５、ＣＤｌｌｂ、ＣＤ９０和ＣＤ４４的??表達(dá)量??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４．?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＤ４５，?ＣＤｌｌｂ，?ＣＤ９０?ａｎｄ?ＣＤ４４?ｏｎ?ｒａｔ?Ｐ３??ＡＤＳＣｓ?ａｎａｌｙｚｅｄ?ｂｙ?ｆｌｏｗ?ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．（見實(shí)驗(yàn)記錄?Ｉ－ｐ５７?）??３．３?ＡＤＳＣｓ多項(xiàng)分化潛能??大鼠ＡＤＳＣｓ向脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)果如圖２－５所示。大鼠ＡＤＳＣｓ向脂肪細(xì)??胞誘導(dǎo)培養(yǎng)后，細(xì)胞生長速度變緩慢，細(xì)胞形態(tài)開始變短而偏圓形，４?ｄ左右開??始出現(xiàn)小脂滴。隨著誘導(dǎo)時(shí)間延長，脂滴越來越多并融合形成大脂滴。誘導(dǎo)１４ｄ??后

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]早期兔骨關(guān)節(jié)炎軟骨CD105+/CD166+細(xì)胞及其軟骨分化潛能的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 王敏,Peter Chen,劉超,郝勇,張瑗,張峽.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2013(07)



本文編號：3131999