發(fā)布時間：2021-03-29 00:12

　　研究背景：嚴重創(chuàng)傷、骨腫瘤的切除造成的骨或軟骨缺損是臨床常見的外科疾病。局部大量或節(jié)段性骨缺損造成骨骼力學支撐功能喪失,繼而嚴重影響患者的正常生活。軟骨的缺損會導致關節(jié)功能下降,同樣會嚴重影響患者的生活質(zhì)量。目前常用的自體骨、軟骨移植,異體骨移植以及骨材料填充,和軟骨外科技術修復,都各有優(yōu)缺點,不能真正滿足臨床實際的要求。如何更好地修復骨缺損和軟骨缺損一直是外科領域,生物材料領域,組織工程領域?qū)＜谊P注的熱點。本研究主要圍繞骨,軟骨的組織工程修復來開展,針對骨,軟骨領域中不同的問題采用了不同的解決策略。在利用骨組織工程構建移植體時,必須充分考慮移植體的多級結構和血管化的問題才能實現(xiàn)模擬天然骨結構的目的。傳統(tǒng)骨組織工程主要包括支架材料、種子細胞和生物信號分子（生長因子等）。研究主要從優(yōu)化支架材料的設計,添加使用促進骨修復的生長因子等角度來嘗試解決上述問題。但目前這兩類措施都未能實現(xiàn)構建有效的血管系統(tǒng),也無法對骨組織的多級結構和血管化進行調(diào)控。因此如何能夠?qū)崿F(xiàn)與骨結構層級關系對應的修復效果,實現(xiàn)血管化,在結構和功能上達到一致,還急需創(chuàng)新組織工程研究方法。近年來隨著納米材料的發(fā)展,和微納米加工... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２．６脂肪干細胞在ｎＨＡ復合納米纖維膜上的生長情況

????尺＝２〇４ｍ）??Ｆ＂ｉｇ．２．６?ＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｎ?ｎＨＡ／ＰＣＬ／ｇｅｌａｔｉｎ?ｎａｎｏｆｉｂ巧?ｍｅｓｈｅｓ?化ｒ?２４ｈ?ａｎｄ?３ｄａｙｓ．?Ａ，２４ｈ，Ｂ??３化?ｄａｙｓ，?Ｃ，２４ｈ?ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ?化ｓａｙｓ?Ｄ，?２４ｈ?ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ?ａｓｓａｙｓ，Ｅ?Ｐａｒｔｉａｌ?ｅｎｌａｒｇｅｄ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?也ｅ?ｓｅｖｅｎ化??ｄａｙ?ｏｆ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ．??２３．５．３細胞掃描電鏡結果??在細胞種植２４ｈ，３天和誘導培養(yǎng)１４天后，樣品戊二酵固定處理，梯度酒??精脫水，至１００％叔了醇冷凍干燥后，噴金掃描。如圖２．７Ａ所示細胞種植２４ｈ，??在納米纖維表面基本呈梭形，納米纖維互相交叉，形成微納米孔，與內(nèi)部連通，??第一天，細胞基本是在纖維表面粘附。第Ｈ天觀察細胞如圖２．７?Ｂ顯示細胞數(shù)目??增多，部分細胞伸出偽足至纖維膜內(nèi)部，是因為納米纖維膜表面的微納米巧撲??結構，形成局部的Ｈ維空間，有利細胞的粘附和生長。在成骨誘導１４天后，如??圖２．７?Ｃ所示，出現(xiàn)大片細胞，在納米纖維表面形成近似膜結構，紡絲表面出現(xiàn)??大量巧結節(jié)沉巧，放大至局部如圖２．７?Ｄ所示，細胞周兩可見大量巧結節(jié)岀現(xiàn)。??

?第二章成骨性納米纖維結構單元制備與檢測???巧細胞種植后第Ｈ天，Ｃ）細胞成骨誘導培養(yǎng)１４天，Ｄ）細胞成骨誘導Ｍ天后局部放大。??Ｆｉｇ．?２．７?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ＡＤＳＣｓ?０打?ｔｈｅ?ｎＨＡ／ＰＣＬ／ｇｅｌａｔｉｎ?ｆｉｌｍ．?Ａ）?ａｆｔｅｒ?２仙，Ｂ）?ａｆｔｅｒ?３ｄａｙｓ，?Ｃ）??ａｆｔｅｒ?１４ｄａｙｓ，?Ｄ）?Ｅｎｌａｒｇｅｄ?ｉｍａｇｅ?ａｆｔｅｒ?１４ｄａｙｓ?．??２．３．５．４茜素紅染色分析??與種植第Ｈ天的細胞染色對比，經(jīng)過１４天成骨誘導培養(yǎng)，茜素紅染色結果??如圖２．８Ｂ所示，整個膜片呈深紅色，站微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有大量巧結節(jié)出現(xiàn)。ｎＨＡ??具有良好的骨誘導能力，加之誘導培養(yǎng)促進脂肪干細胞的分化，有利于巧結節(jié)??形成。??

【參考文獻】：
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本文編號：3106511