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高表達(dá)Satb2在骨組織再生中促進(jìn)神經(jīng)再生的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-28 03:43
  背景和目的近年來(lái),組織工程學(xué)理論和技術(shù)的迅速發(fā)展,為骨結(jié)構(gòu)的重塑和功能的恢復(fù)提供了新的可能。但頜面部組織工程骨尚未實(shí)現(xiàn)血管和神經(jīng)的同步再生,不能達(dá)到生理意義上的機(jī)械強(qiáng)度和可塑性,導(dǎo)致組織工程難于從基礎(chǔ)研究過(guò)渡到臨床應(yīng)用[1]。特異性AT序列結(jié)合蛋白2(special AT-rich sequence binding protein 2,SATB2)是一種組織特異性表達(dá)的核基質(zhì)結(jié)合蛋白。SATB2在頜面部發(fā)育和骨骼塑型中充當(dāng)分子節(jié)點(diǎn),調(diào)控成骨細(xì)胞分化和成熟,促進(jìn)牙周組織再生[2]。并且,SATB2還參與大腦皮層胼胝體投射神經(jīng)元的形成[3]。盡管目前的研究提示SATB2在骨組織再生過(guò)程中發(fā)揮重要作用,但就其在骨組織再生中對(duì)神經(jīng)再生的作用及其機(jī)制的研究甚少。如果SATB2在骨修復(fù)過(guò)程調(diào)控神經(jīng)分化作用及機(jī)制的研究有所突破,就能為Satb2基因治療應(yīng)用于臨床奠定基礎(chǔ),為功能性骨的重建帶來(lái)新的希望和可能。我們近期的體外研究已經(jīng)證實(shí),高表達(dá)Satb2能夠誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化,并促進(jìn)神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(ne... 

【文章來(lái)源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

高表達(dá)Satb2在骨組織再生中促進(jìn)神經(jīng)再生的實(shí)驗(yàn)研究


圖1-2?rBMSCs克隆形成能力檢測(cè)??

細(xì)胞形態(tài)學(xué),能力檢測(cè),雜細(xì)胞,克隆形成


A:原代細(xì)胞呈簇生長(zhǎng),此時(shí)有較多圓形雜細(xì)胞(X40)。??B:傳代后細(xì)胞狀態(tài)較穩(wěn)定、分布較一致,呈渦旋狀生長(zhǎng),細(xì)胞集落互相連接(xlOO)?^??圖1-2?rBMSCs克隆形成能力檢測(cè)??單個(gè)細(xì)胞克隆復(fù)制,呈放射狀向四周增殖,形成細(xì)胞集落(40)。??A???B???C??????10k-?A?I?1W_??n??800?-?I?800?-?800:??r-?:?rl?。剑?r:?:?1??:LJls??10°?102?m4?10??10°?10?104?10??10?10?10-4?10???CD29?PE?CD44?PE?CD90?PE??D???E??:???800-?j?咖-??寫?600-?I?FTC-A*?§??〇-?^?PE-A*??〇?I?0.24%?°?I?0*2%??匚::j|??to0?to2?,o4?.0??,0°?,〇2?,〇4?,0#??

誘導(dǎo)分化,潛能,多向


??圖1-3流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)rBMSCs表面抗原??間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)志物CD29、CD44和CD90呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá);??造血干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD45、CD1?lb的陽(yáng)性表達(dá)率僅為0.?24%和0.42%。??ALP染色?茜素紅染色?油紅0染色??■■?mmm?psit??圖1-4?rBMSCs多向誘導(dǎo)分化潛能鑒定??rBMSCs定向誘導(dǎo)染色后鏡下觀:??與對(duì)照組(A,C,E)相比,誘導(dǎo)組(B.D.F)呈陽(yáng)性表達(dá)。??五、討論??骨髓N充質(zhì)I'?細(xì)胞(bone?mesenchymal?stem?cells,?BMSCs)是成體骨髓中的??非造血十細(xì)胞,具有向骨細(xì)胞I2°U軟骨細(xì)胞l2|l、脂肪細(xì)胞Pi、祌經(jīng)元細(xì)胞和祌經(jīng)??膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)等神經(jīng)外胚層和中胚層來(lái)源的組織細(xì)胞分化的潛能。作為骨組織工程??領(lǐng)域理想的種子細(xì)胞,早在1998年就有學(xué)者將體外分離提純的小鼠骨髓間充質(zhì)??干細(xì)胞負(fù)載于明膠海綿,用于修復(fù)裸鼠顱骨缺損并取得滿意的效果%。另有學(xué)者??證實(shí)BMSCs參與拔牙窩愈合過(guò)程中骨、上皮和血管組織的再生間。近年來(lái),??BMSCs在神經(jīng)組織工程領(lǐng)域的應(yīng)用成為研究熱點(diǎn)。Satake?K等_發(fā)現(xiàn)在BMSCs??被用于脊髓損傷的修復(fù)過(guò)程中可以促進(jìn)神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和軸突的再生。??Ma?K等m學(xué)者證實(shí),骨髓來(lái)源的間允質(zhì)干細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化為多潛能神經(jīng)干細(xì)??胞樣細(xì)胞。并可以進(jìn)一步分化為神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞


本文編號(hào):3104816

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