研究目的巨噬細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)的重要組成部分,對(duì)機(jī)體的免疫和炎癥不可或缺。近年來,巨噬細(xì)胞的糖酵解與其功能之間的聯(lián)系成為人們研究的熱點(diǎn)。糖酵解在巨噬細(xì)胞炎性激活中發(fā)揮關(guān)鍵作用。缺氧誘導(dǎo)因子（HIF-1α）是巨噬細(xì)胞的代謝開關(guān),是巨噬細(xì)胞糖酵解的關(guān)鍵調(diào)控因子。右美托咪定（DEX）已被證明具有抗炎作用,然而,DEX的抗炎作用與HIF-1α依賴的糖酵解是否相關(guān)尚不清楚。本文研究了DEX在LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎性激活中的作用及其機(jī)制。研究方法1.觀察DEX對(duì)巨噬細(xì)胞炎性反應(yīng)的作用體外分離培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞（PM）和小鼠骨髓來源的巨噬細(xì)胞（BMDM）,用LPS和DEX分別或同時(shí)刺激細(xì)胞,6h后收集細(xì)胞和上清,ELISA法檢測(cè)炎癥因子TNF-α和IL-6的水平,Q-PCR法檢測(cè)TNF-α和IL-6的mRNA表達(dá)水平。2.探討糖酵解在DEX抗炎中的作用首先觀察DEX對(duì)糖酵解的影響。體外分離培養(yǎng)PM和BMDM,用LPS和DEX分別或同時(shí)刺激細(xì)胞,6h后收集細(xì)胞和上清,測(cè)定上清中的細(xì)胞外酸化率（ECAR）,葡萄糖和乳酸的濃度,檢測(cè)糖酵解關(guān)鍵酶GLUT1、HK2和PFKFB3的mRNA表達(dá)水平。隨后用粒... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

DEX對(duì)LPS誘導(dǎo)的PM釋放炎癥因子的影響

圖 2 DEX 對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 PM 釋放炎癥因子 mRNA 的影響與 LPS 組相比，** P < 0.01，*** P < 0.001（三）DEX 對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 BMDM 分泌炎癥因子的影響體外分離培養(yǎng) BMDM，LPS（100ng/μL）與 DEX（1μM）分別或同時(shí)處理，6h集上清，ELISA 法檢測(cè)上清 TNF-α 和 IL-6 的水平。結(jié)果顯示，在 BMDM 中，LPS 組的 TNF-α 和 IL-6 水平顯著增加，LPS+DEX組的 TNF-α 和 IL-6 水平較 LPS 組明顯降低（P < 0.01）（圖 3）。

圖 2 DEX 對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 PM 釋放炎癥因子 mRNA 的影響與 LPS 組相比，** P < 0.01，*** P < 0.001（三）DEX 對(duì) LPS 誘導(dǎo)的 BMDM 分泌炎癥因子的影響體外分離培養(yǎng) BMDM，LPS（100ng/μL）與 DEX（1μM）分別或同時(shí)處理，6h集上清，ELISA 法檢測(cè)上清 TNF-α 和 IL-6 的水平。結(jié)果顯示，在 BMDM 中，LPS 組的 TNF-α 和 IL-6 水平顯著增加，LPS+DEX組的 TNF-α 和 IL-6 水平較 LPS 組明顯降低（P < 0.01）（圖 3）。


本文編號(hào)：3098887