研究目的巨噬細胞是固有免疫系統(tǒng)的重要組成部分,對機體的免疫和炎癥不可或缺。近年來,巨噬細胞的糖酵解與其功能之間的聯(lián)系成為人們研究的熱點。糖酵解在巨噬細胞炎性激活中發(fā)揮關(guān)鍵作用。缺氧誘導因子（HIF-1α）是巨噬細胞的代謝開關(guān),是巨噬細胞糖酵解的關(guān)鍵調(diào)控因子。右美托咪定（DEX）已被證明具有抗炎作用,然而,DEX的抗炎作用與HIF-1α依賴的糖酵解是否相關(guān)尚不清楚。本文研究了DEX在LPS誘導的巨噬細胞炎性激活中的作用及其機制。研究方法1.觀察DEX對巨噬細胞炎性反應的作用體外分離培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細胞（PM）和小鼠骨髓來源的巨噬細胞（BMDM）,用LPS和DEX分別或同時刺激細胞,6h后收集細胞和上清,ELISA法檢測炎癥因子TNF-α和IL-6的水平,Q-PCR法檢測TNF-α和IL-6的mRNA表達水平。2.探討糖酵解在DEX抗炎中的作用首先觀察DEX對糖酵解的影響。體外分離培養(yǎng)PM和BMDM,用LPS和DEX分別或同時刺激細胞,6h后收集細胞和上清,測定上清中的細胞外酸化率（ECAR）,葡萄糖和乳酸的濃度,檢測糖酵解關(guān)鍵酶GLUT1、HK2和PFKFB3的mRNA表達水平。隨后用粒... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

DEX對LPS誘導的PM釋放炎癥因子的影響

圖 2 DEX 對 LPS 誘導的 PM 釋放炎癥因子 mRNA 的影響與 LPS 組相比，** P < 0.01，*** P < 0.001（三）DEX 對 LPS 誘導的 BMDM 分泌炎癥因子的影響體外分離培養(yǎng) BMDM，LPS（100ng/μL）與 DEX（1μM）分別或同時處理，6h集上清，ELISA 法檢測上清 TNF-α 和 IL-6 的水平。結(jié)果顯示，在 BMDM 中，LPS 組的 TNF-α 和 IL-6 水平顯著增加，LPS+DEX組的 TNF-α 和 IL-6 水平較 LPS 組明顯降低（P < 0.01）（圖 3）。

圖 2 DEX 對 LPS 誘導的 PM 釋放炎癥因子 mRNA 的影響與 LPS 組相比，** P < 0.01，*** P < 0.001（三）DEX 對 LPS 誘導的 BMDM 分泌炎癥因子的影響體外分離培養(yǎng) BMDM，LPS（100ng/μL）與 DEX（1μM）分別或同時處理，6h集上清，ELISA 法檢測上清 TNF-α 和 IL-6 的水平。結(jié)果顯示，在 BMDM 中，LPS 組的 TNF-α 和 IL-6 水平顯著增加，LPS+DEX組的 TNF-α 和 IL-6 水平較 LPS 組明顯降低（P < 0.01）（圖 3）。


本文編號：3098887