目的:肌肉萎縮成為一種臨床上常見的疾病。女性到一定年齡會出現(xiàn)絕經(jīng)現(xiàn)象,絕經(jīng)后人體內(nèi)雌激素水平急劇下降,肌肉質(zhì)量和強度的下降對人體生理功能產(chǎn)生一系列負面影響,增加了患多種疾病的風險。骨骼肌是運動系統(tǒng)的動力部分,在神經(jīng)驅(qū)使下,進行正常的收縮,關節(jié)作為樞紐,牽動骨活動。肌肉萎縮疾病嚴重影響絕經(jīng)女性的日常生活,而科學的體育運動則可以預防肌肉萎縮,并且對肌肉質(zhì)量、面積、肌力都有良好的改善作用,有針對性的運動方式對骨骼肌有更加積極影響,如抗阻力運動中的一種方式負重運動。低強度脈沖超聲（LIPUS）是近幾年作為一種被公認的無創(chuàng)傷、安全可靠的治療工具被廣泛運用于損傷部位和骨折愈合的治療中。作為一種機械刺激,促進細胞增殖與存活,對軟組織及骨骼肌的影響而備受關注,其探究空間和價值甚高。采用運動和低強度脈沖超聲雙重干預手段在預防和治療肌肉萎縮相關領域研究匱乏。因此本實驗建立切除大鼠雙側(cè)卵巢模型,采用負重運動和低強度脈沖超聲以及二者聯(lián)合干預手段,從基因、蛋白、組織學、病理學等角度去研究不同干預手段對切除卵巢大鼠股四頭肌的影響以及相關機制研究。在細胞層面通過研究四點彎曲力學加載儀模擬運動和低強度脈沖超聲兩種手段... 

【文章來源】：陜西師范大學陜西省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１構(gòu)建大鼠雙側(cè)卵巢切除手術(shù)模型??１５??

除模型組（０ＶＸ，ｎ＝１４）、??卵巢切除負重運動組（０＋Ｗ，ｎ＝１４）、卵巢切除超聲治療組（０＋Ｕ，?ｎ＝１４）和卵??巢切除負重運動與超聲治療聯(lián)合組（Ｏ＋Ｗ＋Ｕ，ｎ＝１４）。卵巢切除手術(shù)２ｗ雌性大??鼠傷勢均疫愈后，０＋Ｗ組和０＋Ｗ＋Ｕ組進行負重運動，雌性大鼠承受的重量約為??自身的３５％。讓大鼠進行適應性運動ｌｗ，使其習慣跑臺不對其產(chǎn)生抗拒，接著進??行正式跑臺運動，負重運動跑臺速度設置為２０?ｍ／ｍｈｉ，運動時間為３０?ｍｉｎ，每周??運動６?ｄ，負重運動總周期為１０?ｗ?（圖２）。??１０?ｗ負重運動周期結(jié)束后，假手術(shù)組、模型組和０＋Ｗ組處死８只大鼠，取其??血清和組織進行檢測。０＋Ｕ和０＋Ｗ＋Ｕ組則使用ＬＩＰＵＳ干預，０＋Ｗ＋Ｕ組中采用??的運動方案和０＋Ｗ組采用的運動方案一致。超聲波強度為３０?ｍＷ／ｃｍ２，占空比為??２０％，中心頻率為１．５?ＭＨｚ，脈沖頻率為１００?Ｈｚ，將超聲治療儀涂抹醫(yī)用耦合劑的??雙探頭放置在大鼠股四頭肌上，（大鼠股四頭肌兩側(cè)毛發(fā)每天在實驗前剔除），??每天治療２〇１＾１１，每周治療６小持續(xù)３？。??ｍｍ?－?＾??Ｍｌ／??圖２負重運動訓練裝置（Ａ）和低強度脈沖超聲治療裝置（Ｂ）??２．２．４體重和抓力的稱量和測試??大鼠重量每周一測。大鼠進食量和飲水量通過電子稱和兩筒測量，大鼠抓力??采用大小鼠抓力測試器（型號：ＹＳＬ－Ｉ３Ａ），測試前將大鼠雙腳放置在測試器的??水平網(wǎng)格上，讓其雙腳處于穩(wěn)定，測試前讓儀器處于歸零狀態(tài)，提起大鼠尾巴快??１６??

?２材料與方法??速后拉，最終脫離測試器，讀取測試器上的數(shù)據(jù)即為大鼠的抓力大小，抓力的測??試單位為ｇ，每只大鼠抓力重復３次，最后記均值（圖３）。??遂，＇層麵一．，??Ｗｍｍ??圖３大鼠抓力測試??２．２．５血清和動物組織的采集及生物化學指標檢測??將負重運動和ＬＩＰＵＳ治療結(jié)束后對大鼠進行取材，處死前一天晚上禁食，提??前冷凍數(shù)個冰盤，高壓錫箔紙、裝組織的紗布袋，待后期使用。第二天對大鼠實??行果斷脫頸、人道主義處死的方法，用無菌無酶的ＥＰ管收集血液，立即放入３７?°Ｃ??恒溫水浴鍋１５?ｍｉｎ，?３０００ｉ？離心，提取上清層置離心管，記分組，立即存放－８０°Ｃ，??后期檢測血清。將取下的股四頭肌和子宮放入預冷并有生理鹽水的培養(yǎng)皿中，隨??后剔除筋膜，待濾紙充分吸干表皮水分后，稱量做記錄。大鼠左側(cè)的股四頭肌組??織放入１０％的中性甲醛中，謹記完全淹沒浸泡到甲醛里面，待后期做形態(tài)學檢測。??右側(cè)股四頭肌用錫箔紙包裹，做好記錄后，迅速放入液氮，２４?ｈ以后取出放入－８０°Ｃ??冰箱，待后期做Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ和ＲＴ－ｑＰＣＲ實驗。訂購南京建成生化實驗試劑盒檢??測各組大鼠ＬＤＨ的血清指標、檢測各組大鼠ＣＫ的血清指標。??２．２．６Ｈ＆Ｅ?染色??（１）固定：首先將股四頭肌從４％的中性甲醛中隨機取出一塊，切成１＊１＊０．５?ｃｍ??的組織塊，放到組織固定夾里面。??（２）流水沖洗過夜。??１７??


本文編號：3090578