骨形成過(guò)程中Wnt/β-catenin信號(hào)通路的作用與機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2021-03-17 12:54
目的使用不同方法以激活Wnt/β-catenin通路,觀(guān)察其對(duì)骨形成和骨愈合的影響,并探討其機(jī)制。方法1.制作大鼠股骨骨折模型,將SB-415286注射于骨折端。采用western blotting方法檢測(cè)骨痂內(nèi)β-連環(huán)蛋白(β-catenin)、核增殖抗原(PCNA)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)的蛋白表達(dá);免疫組化檢測(cè)成骨細(xì)胞增殖和成骨作用;使用Micro-CT測(cè)量骨痂骨量和骨密度;術(shù)后3周,骨折標(biāo)本行生物力學(xué)測(cè)試。2.構(gòu)建表達(dá)mi R-199a基因的慢病毒載體,體外預(yù)感染MC3T3-E1細(xì)胞,檢測(cè)其感染效率。將慢病毒注射于萎縮性骨不連骨折端,采用實(shí)時(shí)定量RT-PCR的方法檢測(cè)其對(duì)骨痂內(nèi)β-catenin基因表達(dá)的影響。使用組織學(xué)、免疫組化、MicroCT、放射學(xué)方法檢測(cè)其對(duì)萎縮性骨不連愈合的影響。3.建立大鼠卵巢切除骨質(zhì)疏松模型,經(jīng)尾靜脈注射慢病毒載體,取股骨做相應(yīng)檢測(cè)。使用Micro-CT檢測(cè)右股骨頸的骨微結(jié)構(gòu)和骨量變化;檢測(cè)右股骨干生物力學(xué)變化。4.制作大鼠右股骨開(kāi)放骨折模型,術(shù)后注射Sclerostin單克隆抗體(Scl-Ab)。觀(guān)察其對(duì)骨折愈合的影響;并觀(guān)察其對(duì)左側(cè)完...
【文章來(lái)源】:上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:134 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
術(shù)中照片,顯示手術(shù)切口、克氏針的插入和股骨骨折線(xiàn)
Westernblotting分析β-連環(huán)蛋白(β-catenin)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)的表達(dá)
免疫組化分析增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)(A)術(shù)后1周(a,b)和2周(c,d),PCNA標(biāo)記對(duì)照組(a,c)和SB-415286組(b,d)骨痂內(nèi)增殖細(xì)胞(B)外骨痂內(nèi)PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)分析數(shù)據(jù)為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差Figure3.Immunohistochemicalanalysisofproliferatingcellnuclearantigen
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]miR-199a在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系[J]. 司彤,劉春曉,許凱,桂耀庭. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(11)
本文編號(hào):3087174
【文章來(lái)源】:上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:134 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
術(shù)中照片,顯示手術(shù)切口、克氏針的插入和股骨骨折線(xiàn)
Westernblotting分析β-連環(huán)蛋白(β-catenin)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)的表達(dá)
免疫組化分析增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)(A)術(shù)后1周(a,b)和2周(c,d),PCNA標(biāo)記對(duì)照組(a,c)和SB-415286組(b,d)骨痂內(nèi)增殖細(xì)胞(B)外骨痂內(nèi)PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)分析數(shù)據(jù)為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差Figure3.Immunohistochemicalanalysisofproliferatingcellnuclearantigen
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]miR-199a在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系[J]. 司彤,劉春曉,許凱,桂耀庭. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(11)
本文編號(hào):3087174
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