背景:肌腱病是骨科臨床診療中常見的疼痛性和退變性疾病,目前常用的治療方法有抑制炎癥的糖皮質(zhì)激素（GC s）注射和促進(jìn)修復(fù)的自體富血小板血漿（PRP）注射,然而,激素注射容易導(dǎo)致肌腱退變斷裂,而PRP療效報(bào)道不一致。我們提出假設(shè):針對(duì)炎癥型肌腱病需要抗炎和修復(fù)的“序貫療法”,即先糖皮質(zhì)激素處理調(diào)控肌腱病的炎癥病理微環(huán)境,然后再用PRP處理啟動(dòng)退變基質(zhì)的修復(fù)再生。我們?cè)谘芯恐袑⒈容^糖皮質(zhì)激素與PRP“序貫治療”與單獨(dú)PRP治療方案在早期炎癥型肌腱病模型中的治療效果。方法:采集新西蘭兔肌腱組織,用酶消化法提取肌腱干細(xì)胞（TSPCs）,于耳中動(dòng)脈采集血液通過梯度離心法制備PRP。TSPCs分別在普通完全培養(yǎng)基以及添加10%PRP的完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)后進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,獲得PRP處理后TSPCs的基因表達(dá)譜變化情況。為了探究“序貫療法”的可行性,TSPCs在經(jīng)IL-1β誘導(dǎo)炎癥后分別添加生理鹽水,曲安奈德（TA）,PRP以及序貫添加TA和PRP,最后檢測(cè)細(xì)胞增殖,衰老及凋亡情況。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,在跟腱局部注射膠原酶1周后,新西蘭兔被分為四組:（1）生理鹽水治療組;（2）TA治療組;（3）PRP治療組;... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１體外治療模塑的處理流．程示意圖

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文?實(shí)驗(yàn)結(jié)果??２．實(shí)驗(yàn)結(jié)果??２．１?ＰＲＰ的制備與質(zhì)量控制??我們的示意圖展示了制備實(shí)驗(yàn)所用ＰＲＰ的大概流程，通過低速離心看到明顯??的白細(xì)胞層與紅細(xì)胞層后去除，上清液再次進(jìn)行高速離心可以看到沉降的血小板，??少量上清液重懸血小扳沉淀即可得ＰＲＰ。通過檢測(cè)血小板、白細(xì)胞和紅細(xì)胞的濃??度，對(duì)制備的去除白細(xì)胞的ＰＲＰ進(jìn)行了全面的質(zhì)量控制（圖２）。與全血樣本相比，??我們的結(jié)果顯示ＰＲＰ與全血的血小板計(jì)數(shù)比值約為６．６倍。而ＰＲＰ中的紅細(xì)胞和??白細(xì)胞濃度則顯著降低，濃度低于０．１Ｘ１０３個(gè)�。薄Ｋ羞@些結(jié)果證實(shí)了我們的去??除白細(xì)胞的ＰＲＰ的制備方法的可靠性。??５．４ｍｌ?ｂｌｏｏｄ?ｉｎ?０，６ｍ！?ＡＣＤ?Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ：２００ｇｘ?１０?ｍｉｎ??ｓｕｐｅｍａｔｅ?—?Ｔｌｉ－?ＪＢｓｕｐｅｒｎａｔｅ?—?Ｐｌａｔｅｌｅｔ??—？?＾?—？??ｚ＿?ｄｆｌＢｆ?－?Ｓ?ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ?■??ｖ?ｗ?■?ｔＬＪｔ??Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ；１８０ｇｘ?１０?ｍｉｎ?Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ：６００ｇｘ?８?ｍｉｎ?Ｌｐ－ＰＲＰ??Ｂ．?？?ＷＢＣ／ＲＢＣ?ｔ?？?Ｂｌｏｏｄ?Ｃ．?Ｐｌａｔｅｌｅｔ?＊?Ｂｌｏｏｄ??■?Ｌｐ－ＰＲＰ?２０００?．?？?Ｌｐ－ＰＲＰ??＝？?８＇?屯?１８００－????？３?６－?？?３?１６００－?＿??ｓ?去?？??ｔ－?２＊?■?ｏ?１２００－?—■?＊Ｔ＂＂??ｆ?〇?？Ｔ?ｔ?Ｗ??ｇ?０?０８－?ｇ?４００．??—０．０６?■?＾?３００－??Ｓ?０．０４．?＾Ｌ．?ｓ?２

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文?實(shí)驗(yàn)結(jié)果??：＊？?Ｂｉ?Ｊ３－半乳糖衰老染色顯泰每組ＴＳＰＣｓ的衰老，Ｃ．逋過ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ／Ｈｏｅｃｈｓｔ??３３３４２染色—光觀置盛徽鏡觀睿（ａ－ｅ＞和Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ漉式細(xì)＝胞米（ｆ－ｊ）ｆｔ測(cè)各組中ＴＳＰＣｓ??的凋亡情況。Ｄ－Ｆ．細(xì)胞增殖（ＣＣＫ－８楂測(cè)）、衰老和凋亡的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。斑銷１尺：２００ｕｍ。數(shù)據(jù)以??平均數(shù)．土標(biāo)準(zhǔn)差最示。．＊Ｐ?＜０?＋?０５。．．??２．４體內(nèi)肌腱病模型的構(gòu)建??新西蘭兔跟腱接受膠原酶注射１周后對(duì)實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行安樂死，收獲肌腱樣本進(jìn)行??ＨＥ和Ｍａｓｓｏｎ染色（圖５）。在肌腱的組織學(xué)切片中觀察到明顯的肌腱病表現(xiàn)，包??括纖維．?dāng)嗔�、纖維組：纟只紊亂、新生血管生成＿以及．大量的炎癥細(xì)胞浸＿＿。??Ａ．?ａ．?ｂ，???ｃ．??■■■??圖５膠原酶注射肌腱病造模后１周的組織學(xué)結(jié)果。Ａ．正常肌腱的ＨＥ和Ｍａｓｓｏｎ染色。Ｂ．膠??原酶注射肌腱病造模后的ＨＥ和Ｍａｓｓｏｎ染色。比例尺：５００?ｕｍ?（Ａ．ａ，Ｂ．ａ），２００?ｕｍ?（Ａ．ｂ－ｃ，??Ｂ．ｂ－ｃ?）〇??２．５肌腱病治療后的磁共振（ＭＲＩ）影像評(píng)估??ＭＲＩ影像（圖６）可以用來評(píng)估肌腱病的修復(fù)情況。在跟腱矢狀位圖像上進(jìn)行??測(cè)量可以發(fā)現(xiàn)，肌腱厚度證明了?ＴＡ和ＴＡ＋ＰＲＰ治療對(duì)消除肌腱病腫脹有一定的作??用。但從另一方面來說，單純的ＴＡ治療并不能改善ＭＲＩＴ２異常高信號(hào)情況。與??ＮＳ組、ＴＡ組和ＰＲＰ組相比，ＴＡ＋ＰＲＰ組Ｔ２高信號(hào)區(qū)的面積占比和平均信號(hào)強(qiáng)度??均較小，表明病變部位的水腫和炎癥程度較輕。雖然ＰＲＰ在降低ＭＲＩＴ２異常信??１８??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]血小板富集血漿治療肌腱病的研究進(jìn)展[J]. 鄭澤峰,樂輝輝,陳維善,沈煒亮,歐陽(yáng)宏偉.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016 (02)



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