目的:研究Sigma-1受體在小鼠肝缺血再灌注損傷中的表達、功能及可能的作用機制。方法:1、將C57BL/6小鼠隨機分為對照組和肝缺血再灌注組,建立小鼠肝缺血再灌注模型。分別采用RT-PCR和Western blot分別檢測小鼠正常肝組織和缺血1小時再灌注6小時、12小時、24小時小鼠肝組織中Sigma-1受體mRNA表達水平和蛋白表達水平變化。2、C57BL/6小鼠隨機分為對照組、肝缺血再灌注組、Sigma-1受體激動劑組及Sigma-1受體激動劑和抑制劑聯(lián)合組。使用Sigma-1受體激動劑4-PPBP和Sigma-1受體抑制劑NE-100預處理C57BL/6小鼠,對照組和肝缺血再灌注組小鼠注射等體積生理鹽水。Western-blot檢測各組小鼠肝組織Sigma-1受體的蛋白表達水平變化。3、通過檢測對照組、肝缺血再灌注組、Sigma-1受體激動劑組及Sigma-1受體激動劑和抑制劑聯(lián)合預處理小鼠血清AST和ALT水平和肝組織病理學變化評估肝損傷情況變化。4、通過RT-PCR檢測各組小鼠肝組織細胞因子TNF-α、IL-6和IL-10的mRNA表達水平變化,Elisa實驗檢測小鼠血清T... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
材料與方法
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗試劑和耗材
        1.3 實驗主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 藥物配制
        2.2 小鼠肝缺血再灌注模型
            2.2.1 實驗分組
            2.2.2 小鼠肝缺血再灌注模型的構建
        2.3 實驗標本采集處理
            2.3.1 小鼠血液標本采集處理
            2.3.2 小鼠肝組織標本采集處理
        2.4 Real-time PCR操作步驟
            2.4.1 小鼠肝組織總RNA的提取
            2.4.2 RNA純度及濃度測定
            2.4.3 逆轉錄反應
            2.4.4 Real-Time PCR
        2.5 蛋白免疫印跡實驗
            2.5.1 小鼠肝組織蛋白的提取
            2.5.2 小鼠肝組織蛋白濃度測定
            2.5.3 聚丙烯酰胺凝膠制備
            2.5.4 電泳
            2.5.5 轉膜
            2.5.6 封閉
            2.5.7 抗體孵育
            2.5.8 顯影
        2.6 小鼠血清AST和 ALT水平檢測
        2.7 小鼠肝組織病理學檢測
        2.8 Elisa實驗步驟
    3 統(tǒng)計學處理
結果
    1 Sigma-1 受體在小鼠肝缺血再灌注損傷后肝組織的表達水平變化
    2 Sigma-1 受體對小鼠肝缺血再灌注損傷的影響
    3 Sigma-1 受體對小鼠肝組織和血清細胞因子表達的影響
    4 Sigma-1 受體調控肝缺血再灌注損傷的作用機制
討論
結論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
致謝



本文編號：3063446