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炎癥通過(guò)GCN2調(diào)節(jié)小鼠延遲性肌肉損傷及修復(fù)的探討

發(fā)布時(shí)間:2021-02-26 09:46
  研究目的延遲性肌肉損傷通常能夠引起延遲性肌肉酸痛,主要表現(xiàn)為肌肉僵硬,壓痛和活動(dòng)時(shí)疼痛,從而影響訓(xùn)練及賽事進(jìn)程。研究表明,延遲性肌肉損傷與修復(fù)皆與炎癥相關(guān),且GCN2在調(diào)節(jié)炎癥中發(fā)揮重要作用,對(duì)于尋找骨骼肌損傷的有效治療方法具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)一次性急性下坡跑運(yùn)動(dòng)建立延遲性肌肉損傷模型,并通過(guò)GCN2敲除來(lái)探討GCN2在延遲性肌肉損傷與修復(fù)中的作用及調(diào)節(jié)機(jī)制,為訓(xùn)練中預(yù)防損傷,促進(jìn)延遲性肌肉損傷修復(fù)提供理論依據(jù)。研究方法8周齡雄性野生型(WT)小鼠和GCN2基因敲除(KO)小鼠進(jìn)行一次性急性下坡跑運(yùn)動(dòng)來(lái)建立延遲性肌肉損傷模型。根據(jù)安靜對(duì)照,運(yùn)動(dòng)后48小時(shí)取材和運(yùn)動(dòng)后120小時(shí)取材,將WT小鼠隨機(jī)分為C0組、C48組、C120組,GCN2 KO小鼠隨機(jī)分為G0組、G48組、G120組。通過(guò)血常規(guī)檢測(cè)分析小鼠下坡跑運(yùn)動(dòng)引起的血液指標(biāo)變化。觀察股四頭肌HE染色分析組織形態(tài)學(xué)。運(yùn)用改良后的阿姆斯特朗肌肉損傷標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)定肌肉損傷程度。血常規(guī)檢測(cè)指標(biāo)主要包括:中性粒細(xì)胞絕對(duì)值與百分比,淋巴細(xì)胞絕對(duì)值與百分比,單核細(xì)胞絕對(duì)值與百分比,嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值與百分比,嗜堿性粒細(xì)胞絕對(duì)值與百分比,白細(xì)胞數(shù)... 

【文章來(lái)源】:上海體育學(xué)院上海市

【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
1 前言
2 綜述
    2.1 延遲性肌肉損傷
        2.1.1 延遲性肌肉損傷概述
        2.1.2 延遲性肌肉損傷運(yùn)動(dòng)模型
    2.2 下坡跑誘導(dǎo)的延遲性肌肉損傷及恢復(fù)與炎癥
        2.2.1 下坡跑引起的延遲性肌肉損傷機(jī)制
        2.2.2 下坡跑引起的延遲性肌肉損傷與炎癥反應(yīng)
        2.2.3 下坡跑誘導(dǎo)的延遲性肌肉損傷損傷恢復(fù)機(jī)制
        2.2.4 延遲性肌肉損傷恢復(fù)與炎癥
    2.3 GCN2與炎癥
        2.3.1 GCN2概述
        2.3.2 GCN2與炎癥
        2.3.3 GCN2參與炎癥修復(fù)機(jī)制
3 材料與方法
    3.1 儀器與試劑
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.2 相關(guān)試劑
        3.1.3 主要試劑配方
        3.1.4 相關(guān)耗材
    3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及運(yùn)動(dòng)方案
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
        3.2.2 運(yùn)動(dòng)方案
    3.3 體重紀(jì)錄
    3.4 取血,取材,稱重
    3.5 HE染色
        3.5.1 組織包埋及切片
        3.5.2 HE染色
    3.6 Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)水平
        3.6.1 股四頭肌蛋白提取
        3.6.2 BCA法蛋白濃度測(cè)定
        3.6.3 配膠
        3.6.4 電泳
        3.6.5 轉(zhuǎn)膜
        3.6.6 封閉及孵育
    3.7 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析
    3.8 實(shí)驗(yàn)技術(shù)流程圖
4 結(jié)果
    4.1 一次性急性下坡跑運(yùn)動(dòng)后,小鼠骨骼肌形態(tài)結(jié)構(gòu)變化
        4.1.1 HE染色觀察小鼠下坡跑運(yùn)動(dòng)后骨骼肌形態(tài)
        4.1.2 骨骼肌損傷評(píng)定
    4.2 一次性急性下坡跑后小鼠血液指標(biāo)變化
        4.2.1 野生型小鼠血液指標(biāo)變化
        4.2.2 GCN2 KO小鼠血液指標(biāo)變化
        4.2.3 下坡跑后48小時(shí),GCN2缺乏對(duì)小鼠血液指標(biāo)影響
        4.2.4 下坡跑后120小時(shí),GCN2缺乏對(duì)小鼠血液指標(biāo)的影響
    4.3 下坡跑對(duì)野生型小鼠相關(guān)炎癥因子蛋白表達(dá)水平的影響
    4.4 下坡跑對(duì)GCN2 KO小鼠相關(guān)炎癥因子蛋白表達(dá)水平的影響
    4.5 下坡跑引起GCN2/P-eIF2α/ATF4蛋白表達(dá)水平變化
    4.6 GCN2缺乏對(duì)下坡跑引起P-eIF2a/ATF4蛋白表達(dá)水平變化的影響
5 分析與討論
    5.1 GCN2在延遲性肌肉損傷中的作用
    5.2 GCN2在延遲性肌肉損傷后修復(fù)過(guò)程中的作用
    5.3 GCN2通過(guò)炎癥調(diào)節(jié)延遲性肌肉損傷
    5.4 GCN2通過(guò)炎癥調(diào)節(jié)延遲性肌肉損傷的修復(fù)
    5.5 GCN2在炎癥中的作用
6 研究結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào):3052413

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