發(fā)布時間：2021-02-24 15:37

　　目的:探討堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor,b FGF）、表皮生長因子（epidermal growth factor,EGF）單獨及聯(lián)合對人骨髓間充質(zhì)干細胞（human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs）向神經(jīng)細胞分化的影響,并進一步研究Wnt/β-catenin信號通路在h BMSCs向神經(jīng)細胞分化中的作用。方法:（1）將購自江陰齊氏生物科技有限公司第2代h BMSCs進行傳代、純化,取第4代h BMSCs進行流式細胞儀檢測細胞表面骨髓基質(zhì)標志CD44、CD90和造血細胞標志CD19、CD34。（2）取第4-6代干性維持較好的h BMSCs,以含1%FBS的α-MEM為基礎(chǔ)誘導培養(yǎng)基,根據(jù)誘導條件不同分為5組:空白對照組（不添加任何物質(zhì)）、EGF組（添加20 ng/m L EGF）、b FGF組（添加20 ng/m L b FGF）、EGF+b FGF組（添加20 ng/m L EGF及20 ng/m L b FGF）、EGF+b FGF+DKK-1組（添加20 ng/m L E... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞來源
        2.1.2 主要試劑及耗材
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 器材的準備
        2.2.2 hBMSCs傳代、純化
        2.2.3 流式細胞儀鑒定hBMSCs
        2.2.4 誘導分化分組
        2.2.5 細胞形態(tài)學觀察
        2.2.6 RT-PCR檢測相關(guān)mRNA表達水平
        2.2.7 免疫熒光檢測相關(guān)蛋白表達情況
        2.2.8 Western blot檢測相關(guān)蛋白表達水平
    2.3 統(tǒng)計學處理
第3章 結(jié)果
    3.1 hBMSCs流式鑒定結(jié)果
    3.2 hBMSCs誘導分化后細胞形態(tài)觀察結(jié)果
    3.3 神經(jīng)細胞標志檢測結(jié)果
        3.3.1 神經(jīng)細胞標志mRNA水平檢測結(jié)果
        3.3.2 神經(jīng)細胞標志蛋白水平檢測結(jié)果
    3.4 Wnt/β-catenin信號通路檢測結(jié)果
        3.4.1 Wnt/β-catenin信號通路關(guān)鍵組件mRNA水平檢測結(jié)果
        3.4.2 Wnt/β-catenin信號通路關(guān)鍵組件蛋白水平檢測結(jié)果
第4章 討論
    4.1 SCI的治療現(xiàn)狀
    4.2 BMSCs概述
    4.3 EGF、bFGF誘導hBMSCs成神經(jīng)分化的作用
    4.4 Wnt/β-catenin信號通路對hBMSCs成神經(jīng)分化的影響
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
[1]大鼠BMSCs自發(fā)鈣化過程中成骨相關(guān)基因表達譜的分析[J]. 焦雪峰,黃永燦,黃益洲,吳誠光,鄧力.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2014(02)
[2]Wnt/β-catenin信號通路在大鼠BMSCs神經(jīng)分化中的作用研究[J]. 何丁文,殷明,鄔亞華,周榮平,魏強強,殷嫦嫦.  中國生物工程雜志. 2013(03)
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[9]脊髓損傷的治療進展[J]. 雷德強,趙洪洋,劉如恩,鄧興力.  中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志. 2008(01)
[10]丹參誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)樣細胞分化[J]. 王勇,陸長青,王凡.  解剖學雜志. 2007(02)

碩士論文
[1]高壓氧治療脊髓損傷的療效評估及影響因素[D]. 張娟.吉林大學 2013



本文編號：3049586