當(dāng)歸多糖/羥基磷灰石骨組織工程支架的制備及特性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-02-22 11:02
骨組織工程支架在臨床治療骨缺損和骨疾病有著很重要的應(yīng)用。羥基磷灰石是人體骨組織主要的鈣磷化合物,也是骨組織工程最常用的材料之一。然而單純的羥基磷灰石無法滿足造血,促進(jìn)成骨的生物學(xué)性能,也不能促進(jìn)組織工程血管化,以及抑制免疫排斥反應(yīng),不能滿足人體骨組織的要求。研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)歸多糖有促進(jìn)細(xì)胞增殖、促血管生成、抗炎等活性。所以本文將兩者結(jié)合起來,制備骨組織工程支架,研究其用于骨組織工程研究的可行性。本文先是通過傳統(tǒng)的水提醇沉法制備得到當(dāng)歸多糖(APS),分離純化出其組分,進(jìn)行抗氧化研究。再通過沉淀法制備羥基磷灰石以及反相乳液法制備當(dāng)歸多糖/殼聚糖/羥基磷灰石復(fù)合微球,借助復(fù)合微球來緩釋其中的當(dāng)歸多糖成分;將復(fù)合微球與羥基磷灰石結(jié)合,制成磷酸鈣骨水泥,優(yōu)化其制備工藝,并進(jìn)行表征。最后建立皮質(zhì)口袋缺損和脛骨骨缺損動(dòng)物模型,通過組織病理學(xué)觀察骨水泥的組織相容性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,當(dāng)歸多糖提取率為12.6%,經(jīng)DEAE-cellulose 52纖維素柱和Sephadex G-50色譜柱分離出APS1a,APS1b和APS2c。在0.5 mg/mL多糖濃度下,APS2c對(duì)羥基自由基和DPPH自由基的清除率分...
【文章來源】:蘭州理工大學(xué)甘肅省
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫詞(Abbreviations)
第1章 緒論
1.1 骨組織工程的研究概況
1.1.1 影響成骨的種子細(xì)胞和生長因子
1.1.2 現(xiàn)代骨組織工程應(yīng)用較廣的材料
1.1.3 骨水泥
1.1.4 骨組織工程面臨的問題
1.2 骨組織工程促血管研究進(jìn)展
1.2.1 血管形成的基本過程
1.2.2 骨組織工程促血管化的有關(guān)細(xì)胞和生長因子
1.2.3 促組織工程化骨血管化的技術(shù)
1.3 當(dāng)歸多糖的研究概況
1.4 課題研究內(nèi)容、目的和意義
第2章 當(dāng)歸多糖的制備及其抗氧化研究
2.1 前言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料
2.2.1 儀器
2.2.2 藥品與試劑
2.3 試驗(yàn)方法
2.3.1 當(dāng)歸多糖的制備
2.3.2 當(dāng)歸多糖的含量測定
2.3.2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的配制
2.3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
2.3.2.3 多糖含量的測定
2.3.3 DEAE-cellulose 52纖維素柱分離純化多糖
2.3.3.1 預(yù)處理
2.3.3.2 裝柱與平衡
2.3.3.3 上樣
2.3.3.4 苯酚-硫酸法測分離多糖的吸光度
2.3.4 Sephadex G-50柱分離純化當(dāng)歸多糖
2.3.5 抗氧化活性的測定
2.3.5.1 當(dāng)歸多糖清除羥基自由基的測定
2.3.5.2 當(dāng)歸多糖清除DPPH自由基的測定
2.3.5.3 當(dāng)歸多糖總還原力的測定
2.4 結(jié)果與分析
2.4.1 當(dāng)歸多糖含量
2.4.2 當(dāng)歸多糖洗脫過程
2.4.3 當(dāng)歸多糖抗氧化活性測定
2.4.3.1 當(dāng)歸多糖對(duì)羥基自由基清除測定
2.4.3.2 當(dāng)歸多糖對(duì)DPPH自由基清除測定
2.4.3.3 當(dāng)歸多糖對(duì)總還原力清除測定
2.5 討論
第3章 當(dāng)歸多糖和羥基磷灰石復(fù)合支架的制備工藝及表征
3.1 前言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料
3.2.1 儀器
3.2.2 藥品與試劑
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 羥基磷灰石的制備
3.3.2 羥基磷灰石/殼聚糖/當(dāng)歸多糖復(fù)合微球的制備
3.3.3 交聯(lián)速度攪拌
3.3.4 載藥量和包埋率測定
3.3.5 復(fù)合微球中當(dāng)歸多糖體外釋放測定
3.3.6 復(fù)合材料支架的制備
3.3.7 復(fù)合支架固化時(shí)間
3.3.8 復(fù)合材料抗壓強(qiáng)度
3.3.9 復(fù)合材料降解
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 制得羥基磷灰石
3.4.2 復(fù)合微球最佳工藝
3.4.3 復(fù)合微球的載藥量和包埋率測定
3.4.4 復(fù)合微球APS體外釋放
3.4.5 復(fù)合材料的制備
3.4.6 測定復(fù)合支架最佳固化時(shí)間
3.4.7 復(fù)合支架體外降解
3.5 討論
第4章 當(dāng)歸多糖/羥基磷灰石骨組織工程支架的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
4.1 前言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料
4.2.1 材料
4.2.2 儀器
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 材料的消毒與預(yù)處理
4.3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
4.3.2.1 復(fù)合材料植入
4.3.2.2 掃描電鏡前處理
4.3.2.3 組織切片制作過程
4.3.2.4 骨組織切片
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 復(fù)合材料植入前后的掃描電鏡觀察
4.4.2 組織學(xué)檢查
4.5 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄A 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]羥基磷灰石復(fù)合材料制備技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 張琦,浦益瓊,王冰,張彤,吳佩穎. 中成藥. 2015(12)
[2]促血管生成物質(zhì)在組織工程中的研究進(jìn)展[J]. 張瑩雪,王蔚,袁直. 高分子通報(bào). 2015(09)
[3]骨缺損動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J]. 岳飛翔,隋海明. 中國民族民間醫(yī)藥. 2015(16)
[4]骨組織工程支架的研究進(jìn)展[J]. 袁景,甄平. 醫(yī)學(xué)綜述. 2015(12)
[5]骨組織工程中支架材料的研究進(jìn)展[J]. 朱立家,杜大江. 醫(yī)學(xué)臨床研究. 2015 (05)
[6]骨組織工程中促進(jìn)血管化策略的研究進(jìn)展[J]. 陳凱,張超,王路,毛雨彥,盧建熙,陳雷. 中國骨傷. 2015(04)
[7]當(dāng)歸多糖對(duì)造血功能的影響及其機(jī)制的研究[J]. 毛宇,徐芳,鄒云,徐曉娟,賀建華. 食品研究與開發(fā). 2015(08)
[8]組織工程骨的快速血管化[J]. 鮑小剛,許國華. 中國組織工程研究. 2015(07)
[9]改良混合脫鈣液在骨髓活檢組織中的應(yīng)用[J]. 黃蓉飛,江亮,龍小藝,張國賓. 成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014(06)
[10]天然活性多糖提取及分離純化技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 楊麗華,林楚慧,黃佳鑾,姚松君,高新開,李丹,胡燁敏,孟平,焦紅,陳驍熠. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(23)
本文編號(hào):3045890
【文章來源】:蘭州理工大學(xué)甘肅省
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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摘要
Abstract
縮寫詞(Abbreviations)
第1章 緒論
1.1 骨組織工程的研究概況
1.1.1 影響成骨的種子細(xì)胞和生長因子
1.1.2 現(xiàn)代骨組織工程應(yīng)用較廣的材料
1.1.3 骨水泥
1.1.4 骨組織工程面臨的問題
1.2 骨組織工程促血管研究進(jìn)展
1.2.1 血管形成的基本過程
1.2.2 骨組織工程促血管化的有關(guān)細(xì)胞和生長因子
1.2.3 促組織工程化骨血管化的技術(shù)
1.3 當(dāng)歸多糖的研究概況
1.4 課題研究內(nèi)容、目的和意義
第2章 當(dāng)歸多糖的制備及其抗氧化研究
2.1 前言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料
2.2.1 儀器
2.2.2 藥品與試劑
2.3 試驗(yàn)方法
2.3.1 當(dāng)歸多糖的制備
2.3.2 當(dāng)歸多糖的含量測定
2.3.2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的配制
2.3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
2.3.2.3 多糖含量的測定
2.3.3 DEAE-cellulose 52纖維素柱分離純化多糖
2.3.3.1 預(yù)處理
2.3.3.2 裝柱與平衡
2.3.3.3 上樣
2.3.3.4 苯酚-硫酸法測分離多糖的吸光度
2.3.4 Sephadex G-50柱分離純化當(dāng)歸多糖
2.3.5 抗氧化活性的測定
2.3.5.1 當(dāng)歸多糖清除羥基自由基的測定
2.3.5.2 當(dāng)歸多糖清除DPPH自由基的測定
2.3.5.3 當(dāng)歸多糖總還原力的測定
2.4 結(jié)果與分析
2.4.1 當(dāng)歸多糖含量
2.4.2 當(dāng)歸多糖洗脫過程
2.4.3 當(dāng)歸多糖抗氧化活性測定
2.4.3.1 當(dāng)歸多糖對(duì)羥基自由基清除測定
2.4.3.2 當(dāng)歸多糖對(duì)DPPH自由基清除測定
2.4.3.3 當(dāng)歸多糖對(duì)總還原力清除測定
2.5 討論
第3章 當(dāng)歸多糖和羥基磷灰石復(fù)合支架的制備工藝及表征
3.1 前言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料
3.2.1 儀器
3.2.2 藥品與試劑
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 羥基磷灰石的制備
3.3.2 羥基磷灰石/殼聚糖/當(dāng)歸多糖復(fù)合微球的制備
3.3.3 交聯(lián)速度攪拌
3.3.4 載藥量和包埋率測定
3.3.5 復(fù)合微球中當(dāng)歸多糖體外釋放測定
3.3.6 復(fù)合材料支架的制備
3.3.7 復(fù)合支架固化時(shí)間
3.3.8 復(fù)合材料抗壓強(qiáng)度
3.3.9 復(fù)合材料降解
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 制得羥基磷灰石
3.4.2 復(fù)合微球最佳工藝
3.4.3 復(fù)合微球的載藥量和包埋率測定
3.4.4 復(fù)合微球APS體外釋放
3.4.5 復(fù)合材料的制備
3.4.6 測定復(fù)合支架最佳固化時(shí)間
3.4.7 復(fù)合支架體外降解
3.5 討論
第4章 當(dāng)歸多糖/羥基磷灰石骨組織工程支架的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
4.1 前言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料
4.2.1 材料
4.2.2 儀器
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 材料的消毒與預(yù)處理
4.3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
4.3.2.1 復(fù)合材料植入
4.3.2.2 掃描電鏡前處理
4.3.2.3 組織切片制作過程
4.3.2.4 骨組織切片
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 復(fù)合材料植入前后的掃描電鏡觀察
4.4.2 組織學(xué)檢查
4.5 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄A 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]羥基磷灰石復(fù)合材料制備技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 張琦,浦益瓊,王冰,張彤,吳佩穎. 中成藥. 2015(12)
[2]促血管生成物質(zhì)在組織工程中的研究進(jìn)展[J]. 張瑩雪,王蔚,袁直. 高分子通報(bào). 2015(09)
[3]骨缺損動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J]. 岳飛翔,隋海明. 中國民族民間醫(yī)藥. 2015(16)
[4]骨組織工程支架的研究進(jìn)展[J]. 袁景,甄平. 醫(yī)學(xué)綜述. 2015(12)
[5]骨組織工程中支架材料的研究進(jìn)展[J]. 朱立家,杜大江. 醫(yī)學(xué)臨床研究. 2015 (05)
[6]骨組織工程中促進(jìn)血管化策略的研究進(jìn)展[J]. 陳凱,張超,王路,毛雨彥,盧建熙,陳雷. 中國骨傷. 2015(04)
[7]當(dāng)歸多糖對(duì)造血功能的影響及其機(jī)制的研究[J]. 毛宇,徐芳,鄒云,徐曉娟,賀建華. 食品研究與開發(fā). 2015(08)
[8]組織工程骨的快速血管化[J]. 鮑小剛,許國華. 中國組織工程研究. 2015(07)
[9]改良混合脫鈣液在骨髓活檢組織中的應(yīng)用[J]. 黃蓉飛,江亮,龍小藝,張國賓. 成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014(06)
[10]天然活性多糖提取及分離純化技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 楊麗華,林楚慧,黃佳鑾,姚松君,高新開,李丹,胡燁敏,孟平,焦紅,陳驍熠. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(23)
本文編號(hào):3045890
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/waikelunwen/3045890.html
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