前言:骨肉瘤（osteosarcoma）是原發(fā)性惡性骨腫瘤中最常見(jiàn)的類(lèi)型,在全世界的發(fā)病率大概是1-3/百萬(wàn)。骨肉瘤主要的臨床癥狀為逐漸加重的持續(xù)性的局部疼痛,可伴有包塊、肢體活動(dòng)障礙,皮溫升高,夜間痛尤甚,低生存率和疼痛使患者背負(fù)著極大的痛苦和生存壓力。骨肉瘤主要的發(fā)病人群為青少年,但在50歲以上人群中有一個(gè)二次峰值。骨肉瘤是由惡性成骨細(xì)胞產(chǎn)生未成熟骨或骨樣組織,可在組織學(xué)上分為:傳統(tǒng)型或經(jīng)典型、低級(jí)的中央型、骨膜型、骨膜旁型、毛細(xì)血管擴(kuò)張型、小細(xì)胞型和成軟骨細(xì)胞型。目前臨床治療骨肉瘤的主要方法是手術(shù)切除聯(lián)合新輔助化療。然而,單純手術(shù)的患者5年生存率大概在15-17%。手術(shù)切除聯(lián)合新輔助化療（阿霉素、順鉑、加或不加甲氨蝶呤）,這樣治療方案的進(jìn)步可以使5年生存率達(dá)到70%左右。但是,轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的骨肉瘤患者的生存率仍約20%左右。免疫治療在骨肉瘤的治療中發(fā)揮著重要的作用,因?yàn)楣羌?xì)胞與免疫系統(tǒng)細(xì)胞之間存在著重要的交叉和橋梁,開(kāi)創(chuàng)了骨免疫學(xué)的跨學(xué)科新領(lǐng)域。許多信號(hào)傳導(dǎo)通路RANK-RANKL system,IL?1,IL?6,IL?17和transforming growth factor?... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
第一部分 :MiR-421在人骨肉瘤組織中的高表達(dá)并與疾病進(jìn)展程度相關(guān)
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 組織標(biāo)本收集
        2.2 提取骨肉瘤組織和癌旁組織的總RNA
        2.3 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA質(zhì)量
        2.4 逆轉(zhuǎn)錄
        2.5 計(jì)算表達(dá)數(shù)值
        2.6 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 MiR-421在人骨肉瘤組織中高表達(dá)并其表達(dá)與疾病進(jìn)展相關(guān)
        3.2 MCPIP1在人骨肉瘤組織中低表達(dá)并與疾病進(jìn)展相關(guān)
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :MiR-421 促進(jìn)骨肉瘤MG63和U2OS細(xì)胞的增殖和遷移
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        2.1 人骨肉瘤MG63和U2OS細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 MG63和U2OS細(xì)胞解凍
        2.3 MG63和U2OS細(xì)胞傳代
        2.4 MG63和U2OS細(xì)胞再凍存
        2.5 MG63和U2OS細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.6 Real-time PCR和細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率
        2.7 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.8 MTT比色法檢測(cè)miR-421對(duì)MG63和U2OS細(xì)胞增殖的影響
        2.9 Transwell小室內(nèi)突破法檢測(cè)miR-421對(duì)MG63和U2OS細(xì)胞遷移和侵襲的影響
        2.10 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 MiR-421 促進(jìn)體外骨肉瘤MG63和U2OS細(xì)胞的增殖
        3.2 MiR-421 可以增加MG63 細(xì)胞和U2OS細(xì)胞中增殖相關(guān)因子cyclinD1 和抑制凋亡因子bcl-2的表達(dá)
        3.3 MiR-421 可以促進(jìn)骨肉瘤MG63 細(xì)胞和U2OS細(xì)胞的遷移
        3.4 MiR-421 可以增加骨肉瘤MG63和U2OS細(xì)胞中遷移相關(guān)因子MMP2 的表達(dá)
        3.5 MiR-421 可以促進(jìn)骨肉瘤MG63 細(xì)胞和U2OS細(xì)胞中促炎因子IL-6 的釋放
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 :MiR-421 可以通過(guò)調(diào)控MCPIP1 蛋白促進(jìn)骨肉瘤的疾病進(jìn)展
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 生物信息學(xué)預(yù)測(cè)并驗(yàn)證MCPIP1與miR-421 是否有共同的3?-UTR靶點(diǎn)
        2.2 人骨肉瘤MG63細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3 MG63細(xì)胞傳代
        2.4 MG63細(xì)胞再凍存
        2.5 MG63細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.6 Real-time PCR和細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率
        2.7 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.8 MTT比色法檢測(cè)miR-421 是否通過(guò)MCPIP1 影響MG63 細(xì)胞的增殖
        2.9 Transwell小室內(nèi)突破法檢測(cè)miR-421 是否通過(guò)MCPIP1 影響MG63 細(xì)胞遷移和侵襲
        2.10 裸鼠骨肉瘤成瘤動(dòng)物模型
        2.11 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 生物學(xué)預(yù)測(cè)并證實(shí)MCPIP1與miR-421 有共同的3?-UTR靶點(diǎn)
        3.2 MiR-421 能夠負(fù)向調(diào)控骨肉瘤MG63 細(xì)胞和U2OS細(xì)胞中MCPIP1 的表達(dá)
        3.3 MiR-421 可以通過(guò)負(fù)向調(diào)控MCPIP1 蛋白促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的增殖、遷移和促炎因子的釋放
        3.4 MiR-421 可以通過(guò)調(diào)控MCPIP1 蛋白促進(jìn)裸鼠骨肉瘤模型的疾病發(fā)展
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
本研究的局限性
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Interferon-α enhances sensitivity of human osteosarcoma U2OS cells to doxorubicin by p53-dependent apoptosis[J]. Xiang-wei YUAN~2,Xiao-feng ZHU~(3,5),Xiu-fang HUANG~4,Pu-yi SHENG~2,Ai-shan HE~2,Zi-bo YANG~2,Rong DENG~3,Gong-kanFENG~3,Wei-ming LIAO~(2,5)~2 Department of Orthopedic Surgery,The First Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;~3 State Key Laboratoryof Oncology in South China,Cancer Center,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510060,China;~4 Department of Pathology,The AffiliatedJiangmen Hospital,Sun Yat-sen University,Jiangmen 529030,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(11)



本文編號(hào)：3035289