第一部分人體正常與退變髓核組織中HOTAIR、ColⅡ、MMP3目的:分析HOTAIR、ColⅡ、MMP3的表達(dá)水平與椎間盤退變的關(guān)系。方法:選取爆裂骨折或脊柱側(cè)彎患者6例作為對照組（NC組）,椎間盤退變患者24例（按Pfirrmann分級Ⅲ級6例、Ⅳ級10例、Ⅴ級8例）作為實驗組（IDD組）,采用q RT-PCR法分別測定正常及退變椎間盤組織中HOTAIR、ColⅡ及MMP3的表達(dá)水平。結(jié)果:HOTAIR及ColⅡ在正常髓核組織中表達(dá)水平高于退變組,在退變組中表達(dá)水平隨退變等級增高而降低（P<0.01）。MMP3在正常髓核組織中表達(dá)水平低于退變組,在退變組表達(dá)水平隨退變等級增高而增高（P<0.01）。結(jié)論:人髓核組織的退變程度與HOTAIR、ColⅡ表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān),與MMP3表達(dá)水平呈正相關(guān)。第二部分人髓核細(xì)胞中HOTAIR與ColⅡ、MMP3表達(dá)的相關(guān)目的:在人髓核細(xì)胞中探討HOTAIR與ColⅡ、MMP3表達(dá)的相關(guān)性。方法:通過構(gòu)建si RNA轉(zhuǎn)染沉默HOTAIR表達(dá)組（si HOTAIR-1,si HOTAIR-2,si HOTAIR-3）與對照組（si NC）。... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人原代髓核細(xì)胞免疫細(xì)胞化學(xué)染色（20×20）

南華大學(xué)碩士學(xué)位論文243.1.2甲苯胺藍(lán)染色結(jié)果在髓核細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)內(nèi)蛋白聚糖可在甲苯胺藍(lán)染色下呈藍(lán)色，而本實驗中人原代髓核細(xì)胞經(jīng)染色后胞漿呈藍(lán)色，且靠近細(xì)胞核部分染色加深（圖2.2），證實培養(yǎng)細(xì)胞可合成蛋白聚糖。圖2.2人原代髓核細(xì)胞甲苯胺藍(lán)染色（10×10）3.2NP細(xì)胞中HOTAIR與ColⅡ、MMP3表達(dá)的相關(guān)性（1）通過構(gòu)建siRNA轉(zhuǎn)染沉默HOTAIR表達(dá)組（siHOTAIR-1，siHOTAIR-2，siHOTAIR-3）與對照組（siNC）。采用qRT-PCR檢測兩組間HOTAIR表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)HOTAIR沉默組各指標(biāo)表達(dá)量低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）（圖2.3）。qRT-PCR、WB檢測對照組與實驗組中ColⅡ、MMP3的表達(dá)水平，評估ECM合成與分解代謝水平。結(jié)果提示HOTAIR沉默表達(dá)組ColⅡ的表達(dá)水平低于對照組，MMP3的表達(dá)水平高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）（圖2.3，圖2.4）。（A）（B）（C）（A）對照組與siRNA沉默HOTAIR表達(dá)組中HOTAIR的相對表達(dá)量。（B）對

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Etiology for Degenerative Disc Disease[J]. Dhungana Hemanta,Xiao-xing Jiang,Zhen-zhou Feng,Zi-xian Chen,Yuan-wu Cao.  Chinese Medical Sciences Journal. 2016(03)
[2]HOTAIR:an oncogenic long non-coding RNA in different cancers[J]. Mohammadreza Hajjari,Abbas Salavaty.  Cancer Biology & Medicine. 2015(01)



本文編號：3032543